程晓宏，杨 娟，张卫兵

（南通市疾病预防控制中心，江苏 226007）

过氧化氢（H2O2）有极强的氧化能力，具有漂白、消毒、氧化、防腐等作用，广泛用于食品安全和环境保护中[1-2]。过量过氧化氢对机体有害，我国国家标准禁止食品中检出过氧化氢残留。目前快速检测过氧化氢的方法主要有碘量法[3]、钛盐比色法[3]、电化学法[4]、荧光法[5-6]、过氧化氢酶法[7-8]、血红素类似物模拟酶法[9]、纳米粒子模拟酶法等[7-8，10]，这些方法或使用昂贵的生物酶、危险的强酸试剂，或需要复杂的仪器设备和合成工艺等，因此构建快速、低成本和高灵敏度检测过氧化氢的方法十分必要。

天然酶具有高催化性能、高选择性等优点，但存在易失活、稳定性差、成本较高和不易制备等缺点，因而应用受限。本文提供一种快速高效、构建简单和廉价易得的检测过氧化氢方法，可应用于食品安全和环境保护等领域，报告如下。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂 圆二色谱仪（Jasco J-815，日本），电子分析天平（XS205，瑞士梅特勒公司），分光光度计（TU1901，北京普析通用公司），数显恒温水浴锅（DK-S26，上海精宏实验设备公司），微量台式离心机（WIGGENS BIOCEN 22R，维根技术北京公司），超纯水机（Milli-Q，密理博上海公司）。30% H2O2、Tris（三羟基氨基甲烷）、NaCl、HCl、KCl、底物ABTS［2，2’-连氮基-双-（3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸）二铵盐］、二甲基亚砜、Triton X-100 表面活性剂均为分析纯。实验用二级纯水由Millipore 纯水仪制备。G4-DNA EAD4 序列为5’-CTG3（TTG3）3A-3’[11]。

1.2 溶液配置

1.2.1 缓冲溶液：称取1.2114 g Tris、0.7455 g KCl、2.925 g NaCl 于1 L 烧杯中，加入800 mL 水溶解，稀盐酸调节pH 至7.5，加入400 μL Triton X-100，加水补充至1 L，转移至1 L 玻璃瓶中，得到含20 mmol/L pH 7.5 Tris/HCl，20 mmol/L KCl，150 mmol/L NaCl，0.04% Triton X-100 的缓冲液。

1.2.2 G4-DNA 溶液：按照说明书要求，用1.2.1 缓冲液（1.0 mL）溶解G4-DNA（2 OD），并在95 ℃水浴加热10 min 后迅速用冰冷却至室温，浓度为10 μmol/L，4 ℃静置过夜，备用。……