唐薇，熊宇，高立明，王广成，许艳秋

(1.眉山市农业质量检测中心，四川 眉山 620020；2.四川省农业农村厅植物保护站，成都 610041)

嘧菌环胺(cyprodinil)是由先正达公司开发的一类嘧啶胺类杀菌剂，可抑制真菌水解酶的分泌和病原菌细胞中蛋氨酸的合成，从而发挥杀菌作用[1]。嘧菌环胺兼具保护和治疗活性，对灰霉病、斑点落叶病、黑星病等有很好的防治效果，与三唑类、咪唑类、吗啉类、二羧酸亚胺类、苯基吡咯类杀菌剂无交互抗性，对敏感或抗性病原菌均有优异的活性[2]。咯菌腈(fludioxonil)是新型苯基吡咯类杀菌剂，通过抑制葡萄糖磷酰化的有关运转以及病菌孢子的萌发，进而干扰真菌菌丝体的生长，促使病原菌死亡[3]。咯菌腈具有广谱、高效、低毒、低残留的特点，与现有杀菌剂无交互抗性，被广泛用于多种农作物种子处理，防治种子带菌及土壤传播的真菌病害[4-5]。为最大限度发挥2 种单剂的杀菌效果，减少使用剂量，延缓病原菌抗药性的产生，减少农民用药成本，通过科学复配了嘧环·咯菌腈混剂，在农业生产中主要用于防治灰霉病和菌核病等。随着不同嘧环·咯菌腈混剂的生产、销售和使用，农药质量问题应引起关注，混剂的质量检测很有必要。目前，有关63%咯菌腈·嘧菌环胺水分散粒剂的液相色谱分析方法已有文献报道[6]，但未见25%嘧环·咯菌腈悬浮剂的检测方法，也未看到该2 种农药制剂的气相色谱检测方法报道，因此，本文采用气相色谱建立了一种能够同时高效、准确地测定嘧环·咯菌腈悬浮剂中有效成分含量的方法，可用于嘧环·咯菌腈悬浮剂等相关产品的质量控制和检测。

1 材料与方法

1.1 仪器

7890A 型气相色谱仪，FID 检测器，配自动进样器(美国安捷伦科技有限公司)；HLPT-5A 型空气发生器、HLPT-50 型氢气发生器(北京汇龙昌海科贸有限公司)；BCE224-1CCN 型分析天平[赛多利斯科学仪器(北京)有限公司]。

1.2 试剂

99.0 %嘧菌环胺标准品(北京北纳创联生物技术研究所)；98.5%咯菌腈标准品(北京北方伟业计量技术研究所)；25%嘧环·咯菌腈悬浮剂(杭州宇龙化工有限公司，市售)；丙酮、磷酸三苯酯(成都市科隆化学品有限公司)，均为分析纯。

1.3 色谱操作条件

检测器为FID；检测器温度为280 ℃；色谱柱为DB-1 毛细管色谱柱，30 m×0.32 mm×0.25 μm；程序升温为120 ℃，保持2 min，以10 ℃/min 升至280 ℃，保持5 min；进样口温度为280 ℃；柱流速(N2)为1.0 mL/min；氢气(H2)流量为40 mL/min；空气(Air)流量为400 mL/min；尾吹(N2)为30 mL/min；分流比为50∶1；进样体积为1.0 μL。采用内标法定量。在该色谱操作条件下嘧菌环胺、咯菌腈和磷酸三苯酯的保留时间分别约为13.89、14.70、16.76 min，嘧环·咯菌腈+内标的典型色谱图如图1。

图1 嘧环·咯菌腈+内标的气相色谱图(进样质量浓度：嘧菌环胺2.65 g/L，咯菌腈1.72 g/L，磷酸三苯酯1.28 g/L)

1.4 测定步骤

1.4.1 溶液的配制

内标溶液：称取磷酸三苯酯6.4 g (精确至0.000 2 g)，置于1 000 mL 容量瓶中，加入适量丙酮溶解并稀释至刻度，摇匀备用。

标准溶液：准确称取嘧菌环胺和咯菌腈标准品分别为0.06 g、0.04 g(精确至0.000 2 g)，置于同一个25 mL 的容量瓶中，加入适量丙酮，使标样完全溶解后，再准确加入5.00 mL 上述配制内标溶液，用丙酮稀释至刻度，摇匀备用。

样品溶液：称取25%嘧环·咯菌腈悬浮剂样品0.4 g(精确至0.000 2 g)，置于25 mL 容量瓶中，加入少量水分散，用适量丙酮完全溶解后，准确加入5.00 mL 上述配制内标溶液，用丙酮稀释至刻度，摇匀备用。

1.4.2 测定

按照1.3 节色谱操作条件设置气相色谱，待基线平稳后，连续进样数针标准溶液，直至相邻2 针嘧菌环胺(或咯菌腈)与内标物峰面积相对变化小于1.5%后，按照标准溶液、样品溶液、样品溶液、标准溶液的顺序进样测定。

1.5 计算

按照下式计算样品中嘧菌环胺(或咯菌腈)的质量分数ω(%)：

式中：R1为标准溶液中，嘧菌环胺(或咯菌腈)与内标物峰面积比的平均值；R2为样品溶液中，嘧菌环胺(或咯菌腈)与内标物峰面积比的平均值；m1为嘧菌环胺(或咯菌腈)标样的质量(g)；m2为试样的质量(g)；ω1为标样中嘧菌环胺(或咯菌腈)的质量分数(%)。

2 结果与讨论

2.1 分析方法的线性关系

分别称取0.034 5g+0.020 7 g、0.052 2 g+0.033 4 g、0.067 0 g+0.043 7 g、0.078 6 g+0.057 8 g、0.0902 g+0.063 4 g，5 份不同质量的嘧菌环胺+咯菌腈标准品，按1.4.1 节方法配制成系列标准溶液后，在1.3 节色谱操作条件分别测定，以嘧菌环胺(或咯菌腈)和磷酸三苯酯的质量比为横坐标，峰面积比值为纵坐标拟合方法线性相关性，结果表明供试药剂质量比值与其响应值之间呈现出良好的线性关系，其线性回归方程和相关系数分别为：嘧菌环胺y=1.132 5x-0.029 4，R2=0.998 2；咯菌腈y=0.705 1x+0.012 1，R2=0.999 8。

2.2 分析方法的精密度

准确称取一定质量的嘧环·咯菌腈悬浮剂样品6 份，按1.4.1 节方法配制成样品溶液，测定嘧菌环胺和咯菌腈的质量分数，计算其对应的标准偏差和变异系数，结果见表1。可见，测得嘧菌环胺和咯菌腈质量分数的标准偏差和变异系数均小于修改的Horwitz 公式计算结果，说明该分析方法的精密度符合要求。

表1 分析方法的精密度测定

2.3 分析方法的准确度

准确称取6 份嘧环·咯菌腈悬浮剂样品，分别添加一定量的嘧菌环胺和咯菌腈标准品，按1.4.1 节方法配制成样品溶液，测定嘧菌环胺和咯菌腈的质量分数，计算添加回收率，结果见表2。可见，测得嘧菌环胺和咯菌腈的添加回收率均在99.30%～100.04%，平均回收率分别为99.54%、99.70%，说明该分析方法的准确度高。

表2 分析方法的准确度测定

3 结论

本文采用GC-FID建立了同时检测25%嘧环·咯菌腈悬浮剂中有效成分的定量分析方法，具有线性关系良好、重现性好、准确度高的优点，此方法准确、简便、快捷，能满足农药产品质量分析有关标准的要求，可用于嘧环·咯菌腈产品的质量控制。