省央宗，王淑芳，赵延红，王 斌，闫海全，白天俊

（1.天祝县华藏寺镇畜牧兽医站，甘肃 天祝 733299；2.天祝县动物疫病预防控制中心，甘肃 天祝 733299；3.天祝县种畜繁育研究院，甘肃 天祝 733299）

梨形虫病又称焦虫病、血孢子虫病，呈地方性流行。在武威市天祝县，梨形虫病被称为“疙瘩病”或“硬腿病”，患病牲畜以高热不退、贫血、黄疸、便秘与腹泻交替出现、肩前淋巴结不同程度肿大（往往一侧较明显，约核桃大小）等为主要症状，有些呈急性经过的犊牛2～4 d死亡。该病在天祝县西南山区莫科片的炭山岭、赛什斯、天堂、赛拉隆等乡（镇）较流行，严重影响着畜牧业的发展。2016年兰州兽医研究所对送检的牛血进行涂片镜检、血样PCR检测和蜱形态学鉴定，首次在天祝县牦牛体内发现中华泰勒虫和银盾革蜱等。李四通[1]发现中华泰勒虫在天祝县11个乡（镇）都有感染，阳性率最高达25.7%，其他瑟氏泰勒虫、双芽巴贝斯虫和环形泰勒虫3个虫种的分布也较集中。孙明等[2]在调查武威市蜱及蜱媒病种类时发现，天祝县牦牛蜱虫感染率为65.33%，种类多达7种。该病的流行严重影响着牛羊品种改良和幼畜生长。2022年，项目组在天祝县19个乡（镇）开展牛羊梨形虫病调查，分析蜱活动规律，并对梨形虫作虫种鉴定，为有效防控该病提供科学依据。

1 调查方法

1.1 采样时间

根据蜱活动时间，在全县19个乡（镇）于不同时间收集幼蜱、若蜱和成蜱，同时采集蜱感染畜血样。3月初蜱在气候较温暖的莫科片活动，随着气温上升，也在其他乡（镇）陆续出现。2022年3月，项目组在莫科片4乡（镇）采集样品，3月中旬在打柴沟镇等平川区域采样，3月底在抓喜秀龙乡等海拔较高的乡（镇）采样。4月份按照此顺序循环采样，一直到10月底蜱消失为止，采样时间共8个月。

1.2 样品采集

选择各乡（镇）感染牛羊各10头（只），包括成年畜和幼畜，采集耳尖血涂片、抗凝血各1份，抗凝血收集在EDTA涂层的真空管中，存储温度为-20 ℃。调查牛羊体表蜱平均感染率、感染强度。收集牛羊体表寄生饱血蜱、饥饿蜱若干，蜱采样瓶中放新鲜草叶，并透气。所有样品运送到兰州兽医研究所的病媒传播疾病中心待检。

1.3 检测方法

血涂片甲醛固定，姬姆萨染色镜检，观察虫体形态，统计感染率；抗凝血使用DNA提取试剂盒提取核酸，借鉴史智勇等[3]描述的梨形虫18S rRNA基因序列设计引物作PCR扩增；用体视解剖镜对蜱作形态学鉴定分类。

2 结果与分析

天祝县19个乡（镇）40村48场（户）共采集381份感染牛、羊血样品及血涂片，其中牛血106份、羊血275份。各乡（镇）蜱数量不一，共收集175只蜱。各乡（镇）蜱和梨形虫病感染情况见表1，不同梨形虫感染率见表2。

表1 各乡（镇）地理环境与家畜体表蜱及梨形虫病感染率

表2 不同牛羊梨形虫病感染率

2.1 蜱地理分布规律

蜱的地理分布受温度、湿度、宿主、日长及生境等生态因子的影响。表1显示，蜱滋生数量和当地海拔、气温、湿度（降水量）有密切关系，气温越低，蜱数量越少，两者呈正相关。以降水量判定干湿区，半湿润区（800～400 mm）蜱数量较多，其次为半干旱区（400～200 mm），干旱区（200 mm以下）分布最少。袁改玲等[4]调查显示，相对湿度低于50%时，青海血蜱的蜕变率、孵化率普遍降低，且幼蜱、若蜱会出现大批死亡；海拔也对蜱的生长有明显影响，山顶比山坡下蜱数量明显少。调查发现，阳面坡蜱分布较多，阴面坡蜱分布较少，说明日照长短对蜱的生活影响较大，综合判断气温较温和、降水量较湿润（＞400 mm）、海拔高度低于2 500 m的温湿环境有利于蜱的滋生。

2.2 蜱分类及感染率

经形态学鉴定，175只样品蜱均为硬蜱，归属于节肢动物门的蜘蛛纲硬蜱科（Lxodidae）的血蜱属（Haemaphysalis）青海血蜱；革蜱属（Dermacentor）的银盾革蜱、阿坝革蜱、草原革蜱；璃眼蜱属（Hyalomma）的小亚璃眼蜱、亚洲璃眼蜱；硬蜱属（Ixodes）的草原硬蜱等4个属的7种蜱，没有发现软蜱类蜱，这和孙明等[2]2016年的调查结果一致，与王和平等[5]的调查结果相差很大。王和平等[4]调查发现，硬蜱属只有亚洲璃眼蜱和草原革蜱2种，分析原因是因为采样点仅1个村，没有代表性。本次调查结果统计体表蜱平均感染率为28.94%，7种蜱中青海血蜱和亚洲璃眼蜱数量居多，合占50%以上，为天祝县牛羊寄生蜱的优势蜱种。蜱感染强度在0～67只，强度与感染率呈正相关。

2.3 蜱季节消长规律

调查发现，天祝县成蜱和若蜱以牦牛和羊为主要宿主，幼蜱的主要宿主为高原鼠兔类啮齿动物。2月末至3月初各种蜱的成虫和若虫开始出现，成虫占多数，4月中旬达到高峰，5月末消失，9月中旬至10月下旬活动的若虫占绝大多数，成虫占少数，达到小高峰，但比起2月末少许多，牛羊感染率也较低。幼蜱活跃在5—6月，5月下旬达到峰值，比成虫和若虫出现约迟1个月。

2.4 发病年龄

蜱主要寄生在牦牛颈部、腹部、尾部等部位，羊以耳部为主。山羊比绵羊感染率高。2岁以内牛羊感染率、发病率和死亡率较2～3岁或成年畜高。以牛为例，犊牛平均发病率、死亡率分别为30.3%、7.6%；成年牛为19.4%、1.7%。2岁以上的牛羊多为带虫免疫，很少发病。

2.5 蜱传梨形虫

381份血涂片染色镜检显示，红细胞内最高染虫率为42.3%。红细胞染虫强度为1～4。对比发现，没有临床症状的牛染虫率低于0.1%，染虫率在0.1%～2%的感染牛一旦再次受到蜱的侵袭，发病概率较高，表现临床症状的染虫率均在2%以上。381份抗凝血经过裂殖子提纯、基因组DNA纯化、基因PCR扩增等试验，与基因库中已知的巴贝斯虫、泰勒虫等基因序列做对比进行DNA鉴定，最终判定有9个种，各种虫体感染率在0.79%～21.25%，其中21.25%为混合感染，这和孙明等[2]调查天祝县牛各虫体感染率在0.57%～22%之间的结果相差不大。牛梨形虫按照感染率高低依次为中华泰勒虫、牛巴贝斯虫、瑟氏泰勒虫、环形泰勒虫、双芽巴贝斯虫等5种；羊梨形虫4种，按感染率高低依次是绵羊泰勒虫、吕氏泰勒虫、山羊泰勒虫、莫氏巴贝斯虫等。表1显示各乡镇感染率高低不一，综合平均感染率为45.86%。莫科片一带梨形虫感染率明显高于其他乡镇，均在80%以上，其次是西大滩、朵什镇等乡（镇），气候寒冷、干燥的高海拔毛藏乡、抓喜秀龙乡等地感染率较低，这和媒介蜱感染率呈正相关。

3 讨论与建议

天祝县属大陆性半干旱气候，位于青藏高原地带，境内群山起伏，沟谷纵横。尤其莫科片一带多为石质山地，有较为广阔的放牧草地和荒坡，灌木丛生，植被覆盖率高，平均海拔1 800～3 800 m，年降水量350～450 mm，平均气温5～6 ℃，无霜期约158 d。该地区温暖湿润的半干旱气候非常适宜牛羊放牧，也适合蜱生活，使整个莫科片成梨形虫病的重感染区。

调查表明，天祝县牛羊梨形虫病各乡（镇）都广泛存在，呈地方性、季节性流行。各乡（镇）蜱虫感染率为14.5%～51.0%，梨形虫感染率为13.2%～93.3%，其中青海血蜱和亚洲璃眼蜱为天祝县优势蜱种，主要传播中华泰勒虫、绵羊泰勒虫等9种梨形虫病。牛羊蜱虫平均感染率从2016年的65.33%下降到2022年的28.94%，下降了36.39个百分点，梨形虫平均感染率为45.86%，与2016年的65.35%相比，下降了19.49个百分点，说明近几年防治效果有一定成效。

蜱完成一个世代所需时间不一，有的数月，有的2～3年。本次调查时间长达8个月，时间跨度大，范围覆盖天祝县各乡镇，收集了全县幼蜱、若蜱和成蜱等各生长期蜱，调查比较全面。蜱种类为硬蜱属、血蜱属、革蜱属、璃眼蜱属的7种硬蜱，牛羊体表蜱以青海血蜱为主，其次是亚洲璃眼蜱、银盾革蜱。草原革蜱在体表很少，草丛和灌木收集蜱种检测较多，多寄生在野生动物。据了解，银盾革蜱主要分布在新疆、甘肃、内蒙古，偶尔也发现于西藏，甘肃和新疆的蜱类区系具有较高的相似性。亚洲璃眼蜱主要分布在新疆、内蒙古、甘肃、青海以及中亚地区，宿主广泛，以牛、羊、马、犬、兔、鼠等哺乳动物及鸟类为主，据文献报道，武威市几个县均有分布，可见媒介蜱的跨地理区域、多宿主活动为病原的传播提供了便利，同时家畜频繁交易使传播更广泛，增加了防控难度。

兰州兽研所在甘肃、河北等地分离到莫氏巴贝斯虫多分地方株[4]，本次调查在天祝县也查到此病原体，并证实它由长角血蜱和青海血蜱经卵传播，次代幼蜱、若蜱和成蜱均具有传播能力。文献记载天祝县羊血中检测出1例分离泰勒虫，与南非分离到的分离泰勒虫序列（AY260175）相似率达99.1%，本次调查没有检测到。

甘肃省从20世纪70年代开始重视牛羊梨形虫病防治工作，以药物治疗病畜为主，80年代加大力度研发防控原虫和蜱的药物，并推广使用取得了显著效果，药物以螨净、虫克星、灭蜱灵、贝尼尔、伊维菌素等为主，但21世纪后防治工作逐渐放松，导致发病率上升。分析原因，一是政府和畜牧部门对梨形虫病的防控意识不强，防重于治。季节发病前应开展群众集体环境灭蜱、牲畜注射预防药物等工作，以2岁以下幼畜为防控重点，从根本上防治梨形虫病及传播媒介。二是市场上没有特别有效、安全、污染低的灭蜱药物和治疗梨形虫病的药物。

蜱活动与海拔、温湿度、日长等有密切关系[6]，为了避免蜱传播疾病，在蜱活跃季节，牲畜尽量在高山上、阴面山坡放牧，减少低山坡和阳面山放牧时间。从非疫区引进牲畜时间尽量选择蜱不在哺乳动物身上寄生的季节，即在6—9月，或11月至次年2月调运为佳。此外，蜱不在哺乳动物身上寄生时，会在畜舍、洞穴和巢穴等特定小生境中，或在野生动物洞穴或巢穴内干草、树枝和土壤中，此时可用泥巴封墙缝，或火烧灭蜱，总之应根据蜱季节动态科学综合灭蜱和防治蜱传疾病。