蒯梦妮,张志国,雷思敏,杨喜艳,吴 萍*

(1.常德市第一人民医院,湖南 常德 415700;2.湖南中医药大学第一附属医院,湖南 长沙 410007;3.长沙卫生职业学院,湖南 长沙 410100)

枇杷叶为蔷薇科枇杷属植物枇杷Eriobotryajaponica(Thunb.) Lindl.的干燥叶,寇宗奭《本草衍义》载:“其叶形似琵琶,故名。”枇杷叶始载于《名医别录》[1],具有清肺止咳、降逆止呕之功效,临床上用于肺热咳嗽、气逆喘急、胃热呕逆、烦热口渴等症。2020 版《中华人民共和国药典(一部)》分别收载了枇杷叶和蜜枇杷叶[2]。枇杷叶临床入药多以汤剂为主,且其炮制前后临床应用有所差异,生品长于清肺止咳,多用于肺热咳喘;蜜炙后能增强润肺止咳作用,常用于肺燥咳嗽[3]。在历代本草中,有关枇杷叶的炮制方法记载较多,枇杷叶炮制最早可追溯于晋代,出现净制;后经各朝各代的演变更替,出现甘草汁+酥制、蜜制、枣汁制、姜汁制、切制、炙制、制炭等各种炮制方法。现代对枇杷叶化学成分研究报道较多,对枇杷叶及其炮制品的药理活性、临床应用等研究比较少。为更好地挖掘枇杷叶的作用,扩大其临床应用,本研究对枇杷叶历代炮制沿革、枇杷叶的研究进展进行可视化分析,以期为枇杷叶的进一步研究提供参考。

1 枇杷叶古代炮制方法沿革

1.1 净制

枇杷叶净制首载于晋《肘后备急方》“拭去毛”。宋代有“刷去毛《伤寒总病论》”“温水浸,刷去毛《普济本事方》”“洗,刷去毛尽《小儿卫生总微论方》”。元代有“去毛,阴干《瑞竹堂经验方》”“去毛尖《卫生宝鉴》”。明代有“肥厚而大者良,刷去毛净,不尔令人咳《本草通玄》”。清代有“去毛筋《温热经纬》”。以上净制方法均包含枇杷叶去毛,一直沿用至今[4]。

1.2 切制

枇杷叶切制方法有“净刷去叶后毛,剉碎(元《活幼心书》)”。

1.3 炮炙

枇杷叶炮炙方法有加辅料炮炙与不加辅料炮炙。其中加辅料炮炙方法有:甘草汁、酥为辅料,“凡使,采得后秤,湿者一叶重一两,干者三叶重一两者,是气足,堪用,使粗布拭上毛令尽,用甘草汤洗一遍,却用绵再拭令干。每一两以酥一分炙之,酥尽为度(南北朝《雷公炮炙论》)”;蜂蜜为辅料,“拭去毛蜜涂炙,去毛涂蜜慢火炙(唐《外台秘要》、宋《圣济总录》)”“洗,刷去毛尽,涂蜜,炙焦黄色(宋《小儿卫生总微论方》)”“凡用剖去背上细毛,净尽,著蜜抹匀火烘(明《滇南本草》)”;姜汁为辅料,“拭去毛……姜汁炙(宋《圣济总录》)”“去毛尽涂姜汁炙令香熟为度(宋《太平惠民和剂局方》)”“去毛,姜汁炙黄(明《奇效良方》)”“背有黄毛,凡入剂中惟棵叶用,以粗布拭去毛净,捣,姜汁浸炙微黄,倒碎煎汤(明《本草蒙荃》)”;枣汁为辅料,“净刷去毛涂枣汁炙香熟(宋《圣济总录》)”;甘草汁、姜汁或甘草汁、蜜水为辅料,“凡用拭去毛,甘草汤洗再试。治胃病,以姜汁炙,肺病以蜜水涂炙(明《本草纲目》)”。不加辅料炮炙方法有:炙法,“拭去毛炙(晋《肘后备急方》)”“炙去毛(宋《博济方》)”“炙,刷去毛(宋《伤寒总病论》)”“用叶需火炙,布拭去毛,不尔射人肺,令咳不已(宋《重修政和经史证类备用本草》)”;焙法,“温水浸,刷去毛,焙(宋《普济本事方》)”。枇杷叶古代炮制方法见表1。

表1 枇杷叶古代炮制方法

1.4 枇杷叶历代炮制方法可视化分析

应用Cytoscape 3.7.1软件以“制法、出处、朝代”为节点,各节点间依附关系为连线,构建枇杷叶历代炮制方法可视化网络,接着用Network Analyzer功能对网络进行拓扑分析,以顺时针降序排列各节点,其中节点形状越大、颜色越深说明其在网络中被引用的越多,见图1。由图1可知,净制在历代炮制规范中出现次数最多,在宋代枇杷叶的炮制方法得到了发展,出现的炮制方法种类最多。

图1 枇杷叶历代炮制方法可视化节点图

2 《中华人民共和国药典》及地方炮制规范相关标准中枇杷叶炮制要求

2.1 历版《中华人民共和国药典》中枇杷叶的炮制要求

自1963年版《中华人民共和国药典》收录枇杷叶后,历版《中华人民共和国药典》中枇杷叶炮制品有枇杷叶和蜜枇杷叶,见表2。

表2 历版《中华人民共和国药典》收录的枇杷叶炮制规范

2.2 现行地方炮制规范要求

通过查询20个省份枇杷叶现行炮制规范[26],其中枇杷叶炮制品有鲜枇杷叶、枇杷叶、炒枇杷叶、蜜枇杷叶,见表3。

表3 枇杷叶地方炮制规范

经考证各省份现行炮制规范,枇杷叶炮制方法为净制、切制、炮炙(炒枇杷叶、蜜枇杷叶)。其中枇杷叶净制时各地方规范都要求除去茸毛;切制时有要求切5～10mm丝(上海)、切粗丝(湖南)、切宽丝(北京)、铡成宽1～1.7cm的横条片(云南)、切3mm丝(吉林);炒枇杷叶只有上海炮制规范收载;大部分地方炮制规范都收载有蜜枇杷叶,然而蜜炙时每100kg枇杷叶丝,辅料炼蜜的用量北京与吉林用炼蜜25kg,其余各地为20kg。由此可见各地方炮制规范对枇杷叶的切制和蜜炙没有统一的标准,形成了各地的特色。

3 枇杷叶现代研究可视化分析

在CNKI文献数据库中,以“枇杷叶”为主题词选择全文搜索检索查询方式,查找1955-2022年间文献,去除无用文献后共得到345篇有效文献,本研究通过CiteSpace 6.1.R2软件进行可视化网络分析。

3.1 枇杷叶关键词共现分析

关键词是进行文献研究的核心观点与主题的高度概括,基于某领域关键词共现分析,可以挖掘该领域研究热点。运行Citespace 6.1.R2软件进行关键词分析,选择时间跨度为1955-2022年,时间切片为1年,节点类型为关键词,生成关键词知识图谱(图2)。关键词知识图谱中节点代表关键词,节点大小代表关键词出现频次,节点越大代表关键词共现频次越大,节点间的连线代表关键词间的共现强度。图2中共出现333个节点、473条连接,网络密度为0.008 6。分析结果显示,该领域关键词出现频次前10的有熊果酸、齐墩果酸、提取、科罗索酸、三萜酸、总黄酮、化学成分、提取工艺、超声波、多糖。说明目前枇杷叶的成分研究以及围绕化学成分的提取方法及工艺已经比较全面,未来的研究可以从药理作用及临床应用等方面着手。

图2 枇杷叶关键词共现图谱

3.2 枇杷叶关键词聚类分析

在关键词共现分析的基础上进行聚类分析,通过LLR计算方式归纳出了10个聚类板块,分别为:“#0齐墩果酸”“#1分离纯化”“#2抗氧化”“#3药理作用”“#4正交试验”“#5质量控制”“#6乌索酸”“#7挥发油”“#8功能成分”“#9提取效果”“#10枇杷”,聚类图谱见图3。模块化Q值为0.853 3(>0.3),聚类平均轮廓值为0.967 9(>0.5),本次聚类显著有效。由聚类分析可知“#0齐墩果酸”“#4正交试验”“#5质量控制”“#6乌索酸”“#7挥发油”“#8功能成分”围绕了枇杷叶的质量控制方面进行了大量研究。其中齐墩果酸是枇杷叶中的主要活性成分之一,也是《中华人民共和国药典》中作为评判枇杷叶质量优劣的成分之一。同时研究者对枇杷叶的质量控制采用了高效液相、薄层扫描、一测多评、指纹图谱、气相色谱、气质联用等一系列的研究方法。朱诗塔等[27]采用高效液相色谱同时测定不同产地枇杷叶中3种黄酮类成分(芦丁、槲皮素和山柰酚)的含量,发现山柰酚含量在不同产地样品中最稳定,均可检出,可作为枇杷叶质量控制的标志成分。蔡雪萍等[28]采用一测多评测定法测定了枇杷叶中6个三萜酸成分的含量,为枇杷叶多指标成分评价提供了参考。

图3 枇杷叶关键词聚类图谱

从“#2抗氧化”“#3药理作用”聚类模块可知,枇杷叶中黄酮类成分、多糖类成分、总酚类成分等具有良好的抗氧化活性[29-31]。枇杷叶提取物可通过激活PI3K/Akt信号通路减轻LPS诱导的A549细胞增殖抑制、凋亡和氧化应激效应[32]。枇杷叶中6种三萜酸在肠道菌群生物转化后可能具有一定的降血糖增效作用。枇杷叶提取物对卵清蛋白诱导的哮喘小鼠气道炎症有抑制效果[33]。叶广亿等[34]通过化痰止咳平喘动物实验,表明蜜炙枇杷叶优于生枇杷叶,并且水提物优于醇提物。

4 讨论

4.1 枇杷叶历代炮制方法的演变

由上述表1和图1可知,枇杷叶历代炮制方法中出现次数最多的为净制,且所有的净制都要求去毛(有拭去毛、炙去毛、刷去毛、火炙后用布拭去毛、温水浸后刷去毛等方式),一直沿用至今。从《新修本草》中“枇杷叶,须火炙,布拭去毛,不尔,射入肺,令咳不已”的记载可看出,历代医家解释了枇杷叶去毛的原因是担心未去毛的枇杷叶会导致咳嗽。自唐代后随着医药学的发展、炮制技术的提高,枇杷叶出现了炙制、蜜炙、姜汁制等,由于蜜炙可增强润肺止咳作用,其中蜜炙枇杷叶逐渐成为主流的炮制方法。由《中华人民共和国药典》和地方炮制法规标准可知,目前各地所用枇杷叶的炮制品也多为蜜枇杷叶。

4.2 枇杷叶研究现状分析

本研究关键词共现与聚类分析显示,枇杷叶的主要研究涉及了化学成分、有效成分的提取分离、药理作用等方面。枇杷叶化学成分研究有熊果酸、齐墩果酸、科罗索酸、山柰酚、三萜酸等。提取分离用到了神经网络技术、微波辅助提取、超声提取、索式提取、大孔树脂、柱层析等。药理作用有化痰止咳、抗糖尿病、抗氧化、抗炎等。从目前的研究现状可知,关于枇杷叶的化学成分研究较多,但是大部分化学成分研究多局限于单一的化学成分或是某几种化学成分研究,还不能从整体上反映枇杷叶的质量控制;而在药理作用与临床研究方面的研究还不够深入。随着多学科在中医药学中的应用发展,为中药的研究带来了新的机遇,这也为枇杷叶由“单味药→药对→方剂→临床”的点状应用向全面发展带来了极大的可行性。

综上所述,由枇杷叶历代炮制方法的演变可知,枇杷叶历代炮制方法大致为净制、切制、不加辅料制与加辅料制,其中蜜炙自唐代《外台秘要》出现后,一直沿用至今。然而对于现今枇杷叶炮制用辅料的标准、炮炙的火候、辅料的用量等尚未有统一的标准,流通中的枇杷叶药材与其炮制品标准,还有待进一步研究。本研究将枇杷叶炮制方法与现代研究进行了可视化处理,为开展枇杷叶的炮制工艺规范化、经典名方复方中药制剂研发,和及时了解枇杷叶研究发展动态提供了参考。