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实时荧光定量PCR 鉴定食品中绿豆源性成分

2023-10-17徐石勇王雅偲兰青阔

湖北农业科学 2023年9期
关键词:检测方法

王 成,徐石勇,李 纳,王雅偲,陈 锐,兰青阔,王 永,赵 新

(1.天津市农业科学院种质资源与生物技术研究所,天津 300381;2.天津农学院园艺园林学院,天津 300392)

绿豆[Vigna radiata(L.)Wilczek]是豆科(Leguminosae)蝶形花亚科(Papilionoideae)豇豆属(Vigna)一年生直立草本植物,原产于中国[1],在非洲、南美洲和亚洲其他地区也被广泛种植[2]。绿豆是中国传统的食用豆类作物,具有药食两用性[3,4]。绿豆作为中药材,具有消暑利水、清热解毒、保肝明目等功效[5-8];作为食品,可制作成各种风味小吃,如绿豆糕、绿豆饼干等。同时,绿豆的直链淀粉含量较高且具有高交联特性,是淀粉类食品的优质原料[9]。但绿豆也是引发过敏性喉头水肿的过敏原之一,在中国已有相关报道[10]。

传统的食品检测技术包括化学比色法、酶联免疫法、免疫胶体金法等。这些方法成本低,易于操作。随着分子生物学技术的逐渐成熟,PCR 方法因其特异性强和灵敏度高而备受关注[11]。其中,实时荧光定量PCR 技术(Real-time fluorescent quantitative PCR,qPCR)通过收集荧光信号可以实时监测生成的PCR 产物[12]。与传统方法相比,qPCR 的优势在于,不仅可对目标物进行定性判别,还可通过绘制标准曲线分析目标物的含量。TaqMan 探针法是常用的方法之一。利用该项技术,前人已在多项研究中实现了对不同目标物的定量检测[13-21]。但目前对绿豆成分的检测以定性方法居多。因此,本研究旨在建立一种精准、灵敏的绿豆源性成分定量检测方法,在弥补相关检测方法空白的同时,为食品掺伪检测及过敏原成分筛查提供技术支持。

1 材料与方法

1.1 材料……
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