唐静 阳帆 周丽丽 袁小波

(湘潭市第一人民医院 1医学转化中心,湖南 湘潭 411100;2营养科;3湖南交通工程学院护理学院)

老年性白内障是主要致盲性疾病之一,随着老年人口的快速增加,白内障患病率进一步提升,在降低患者生存质量的同时加重了社会医疗负担〔1〕。由于老年性白内障的病因尚未阐明,导致药物疗效不佳,临床治疗仍以手术为主〔2〕。研究发现,晶状体蛋白质变性会影响正常的折射功能,引发不同程度的晶状体混浊〔3〕。泛素化是蛋白质翻译后修饰的主要方式,其中E3连接酶与底物蛋白的特异性密切相关,因此在调控泛素化过程中的作用最明显〔4,5〕。相关研究已证实,老龄大鼠晶状体上皮细胞中存在DNA损伤和DNA修复酶活性下降,提示DNA氧化损伤及修复障碍可能参与老年性白内障的发生与发展〔6〕。研究报道显示,8-氧代鸟嘌呤-DNA糖基化酶(OGG)1参与晶状体上皮细胞的DNA修复过程,在白内障病情发展中起关键作用〔7〕。但关于OGG1蛋白翻译后修饰的研究仍十分少见。本研究探讨热休克蛋白70羰基末端反应蛋白(CHIP)介导的OGG1在老年性白内障发展中的作用。

1 材料与方法

1.1材料 SRA01/04永生化人晶状体上皮细胞株购于上海弘顺生物有限公司;RPMI1640培养基、胎牛血清、胰蛋白酶购于百草泰克(北京)生物科技有限公司;手持中波紫外线检测灯购于苏州圣光仪器有限公司;CHIP蛋白过表达质粒由北京博云华康基因科技有限公司设计合成;兔抗人CHIP单克隆抗体,鼠抗人OGG1单克隆抗体,鼠抗人β-actin单克隆抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗兔IgG和山羊抗鼠IgG均购于铭修(上海)生物科技有限公司。……