吴明媛 赵伟 赵远 毋亚坤 张瀚文

(焦作市人民医院,河南 焦作 454000)

宫颈癌主要指发生在子宫阴道部及宫颈管的恶性肿瘤。一般采用化疗、放疗治疗宫颈癌,但是效果较差,预后不良〔1,2〕。早期宫颈癌常无明显症状和体征,宫颈可光滑或难与宫颈柱状上皮异位区别。晚期症状根据癌灶累及范围出现不同的继发性症状。如尿频、尿急、便秘、下肢肿痛等;癌肿压迫或累及输尿管时,可引起输尿管梗阻、肾盂积水及尿毒症;晚期可有贫血、恶病质等全身衰竭症状〔3,4〕。紫草素具有抗癌、抗炎、抗菌等作用,临床也可以用于治疗急、慢性肝炎、肝硬化〔5,6〕。紫草素可以抑制肿瘤细胞的增殖,促进细胞凋亡,但其分子机制尚不是很明白〔7〕。本实验主要探究紫草素对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭及其miR-214表达的影响。

1 材料与方法

1.1药物 紫草素购自中国食品药品检定研究院,纯度>99%。

1.2实验动物 20只6周龄雌性 BALB/c 裸鼠(每组n=5)购自河南实验动物中心(中国郑州)。

1.3材料 宫颈癌细胞株Hela(中国科学院上海细胞库);胎牛血清(FBS)、DMEM培养基(美国Hyclone公司,批号NXA0544、NZE1147);胰蛋白酶(美国Sigma公司,批号2242B80);MTT试剂(美国Sigma公司,批号1313B12);Transwell小室(美国Corning公司,批20130204)。

1.4仪器 Q5实时定量PCR扩增仪(美国Cell Signaling公司);PTC-200型热循环仪(美国Bio-Rad公司);5415D型离心机(德国Eppendorf公司);F-4500型荧光定量检测仪(日本HITACHI公司)。

1.5药物处理 使用二甲基亚砜(DMSO)溶解紫草素,并使DMSO的终质量浓度小于0.01 g/L,-20 ℃避光保存。

1.6细胞培养与分组 宫颈癌细胞Hela用含10% FBS的DMEM培养基培养,待细胞生长至80%融合度时,用0.25%胰蛋白酶消化,取对数生长期细胞进行实验。用……