李梦磊,张锐铮,于皓同,张 琪,许信刚

(西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌 712100)

山羊传染性胸膜肺炎(Contagious caprine pleuropneumonia,CCPP)被世界动物卫生组织列为必须报告的动物传染病[1-2]。该病主要临床症状表现为高热、鼻腔有黏性分泌液,个别患病羊有铁锈色鼻液,剖检可见肺脏实质硬变,甚至肺脏与胸膜发生粘连。本病在初春及秋冬季节多发,天气寒凉、营养缺乏、羊群密集等均会诱发本病[3]。山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasmacapricolumsubsp.capripneumoniae,Mccp)是山羊传染性胸膜肺炎的主要病原[4]。因支原体体外培养较为困难,直到1976年才分离到Mccp,并命名为F38,随后在世界其他多个国家和地区均有Mccp的分离报道[5]。Mccp 0507基因为已知Mccp的毒力基因,在长期的进化历史中未发生变化,具有较高的保守性,可作为包被抗原的选择。

近年来,随着我国畜牧业的不断发展,山羊传染性胸膜肺炎的流行呈现上升趋势,严重制约着我国羊产业的发展。因此,对传染性胸膜肺炎开展检测以及流行病学调查十分必要。本研究通过对Mccp 0507基因进行基因克隆和原核表达,将0507蛋白作为包被抗原,拟建立一种能够快速检测Mccp抗体的间接ELISA方法,进一步丰富Mccp的检测技术。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株质粒与血清样品 pet-28a(+)质粒、山羊支原体山羊肺炎亚种阳性病料由西北农林科技大学动物医学院兽医微生物实验室鉴定并保存。山羊支原体山羊肺炎亚种阳性血清、绵羊流产衣原体阳性血清、绵羊立克次体阳性血清、牛支原体阳性血清均由中国动物卫生与流行病学中心血清库提供; 山羊血清样品282份,采自陕西省部分山羊养殖场。……