嫩肉粉在DNA粗提和鉴定中的应用
2023-09-21邵江樵
邵江樵



DNA主要分布在细胞的染色体中,它与蛋白质都是染色体的主要成分。木瓜蛋白酶是嫩肉粉的主要成分,可对肉类中的弹性蛋白和胶原蛋白进行部分水解,使肉制品嫩而不韧。
染色体中的DNA是生物大分子,其与蛋白质结合无法用显微镜直接观察。如何感知并鉴定DNA,笔者进行了探究。
一、实验器材
香蕉,洗洁精,无碘食盐,2 mol/L NaCl,冷藏的95%乙醇,二苯胺试剂,双缩脲试剂,嫩肉粉,100 mL蒸馏水,100 mL量筒,10 mL量筒,250 mL烧杯,50 mL烧杯,20 mL试管,玻璃棒,电子秤,吸水纸,透明密实收纳袋,纱布,橡皮筋,小刀,试管架,37 ℃水浴锅,100 ℃水浴锅,记号笔,标签纸,等等。
二、实验过程
(一)破碎细胞
取50 g香蕉果肉放入透明密实收纳袋中,将其擠压成泥。
(二)获取含DNA的滤液
1.往50 mL烧杯中倒入50 mL蒸馏水、5 mL洗洁精,再加入2 g无碘食盐,用玻璃棒搅拌均匀。
2.将提取液倒入装有果泥的透明密实收纳袋中,挤压1 min,使其充分混匀。
3.用橡皮筋在250 mL烧杯口扎上纱布,往烧杯中倒入果泥,收集滤液。将滤液分成两等份,记作滤液A和滤液B。
(三)去除滤液中的杂质
往滤液B中加入1 g嫩肉粉,搅拌使其溶解后放入37 ℃水浴锅中保温15 min,用玻璃棒不断搅拌。
(四)DNA的析出
待滤液B保温结束后,将等体积冷藏过的95%乙醇缓缓注入上述滤液中,静置2~3 min,观察是否有白色丝状物析出。用玻璃棒往同一个方向缓慢搅动,使析出的丝状物缠绕,避免断裂。
(五)DNA和蛋白质的鉴定
取6支20 mL试管,按1—6号依次做好标记,各加入5 mL 2 mol/L NaCl溶液。将未经嫩肉粉处理的丝状物分别放入1号、2号试管,振荡使其溶解。将经嫩肉粉处理的丝状物分别放入3号、4号试管,振荡使其溶解。……