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椰果内生枯草芽孢杆菌YZ-21甘露聚糖酶基因的克隆、表达及酶学性质研究

2023-08-15和子涵穆广亚贾一然张晓彤冯军厂常绪路张建新

饲料工业 2023年15期

■ 和子涵 穆广亚 贾一然 张晓彤 冯军厂 常绪路 张建新

(河南师范大学水产学院,河南新乡 453007)

β-甘露聚糖酶(β-1,4-mannanase)作为一种内切水解酶,在饲料、食品以及造纸等领域得到广泛的应用。饲料中添加β-甘露聚糖酶,动物肠道内能利用甘露聚糖作为底物进行水解,产生功能性糖类甘露寡糖,从而达到消除抗营养因子的功能,且在家禽饲料中添加β-甘露聚糖酶可以提高家禽体重和饲料利用率,改善家禽肠道环境,提高家禽免疫力[1-2]。在食品方面,β-甘露聚糖酶能够水解果汁中半纤维素的甘露聚糖部分,降低其黏度并释放其中的水分,可显著提高不同果汁的澄清度和产量[3]。在造纸方面,β-甘露聚糖酶对软木纸浆中的半乳甘露聚糖具有高度特异性,可以防止纸浆纤维进一步水解,同时也可以减少漂白过程中化学品的使用,具有成本效益和环境友好性[4-5]。

近年来,国内外研究人员为了增加β-甘露聚糖酶的酶活性及稳定性,研究方向逐渐从筛选产酶菌株、物理化学诱变育种以及酶蛋白的纯化,转移到了对异源表达高效β-甘露聚糖酶基因工程菌的构建。唐嘉婕等[6]将甘露聚糖酶在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中进行异源表达,结果发现异源表达酶具有较高酶活性,且在碱性环境下表现出较高的稳定性。田庚等[7]应用PCR 方法对地衣芽孢杆菌KD-1β-甘露聚糖酶基因ManBl进行基因克隆和定点突变,提高了酶活性及稳定性。Summpunn 等[8]将重组β-甘露聚糖酶基因导入大肠杆菌BL21(DE3)(415.18 U/mL)和巨大芽孢杆菌UNcat(359 U/mL)中,均得到高效表达。……

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