李杨 陈勇 白亮 李伟 孟勇 曾庆亮 赵耀伟 张雷 王叶密 庄全魁

(阜阳市第二人民医院骨外科,安徽 阜阳 236000)

骨质疏松多发生于老年人群,因成骨与破骨代谢平衡紊乱导致骨脆性增加,骨折风险明显提升,对患者生存质量造成严重不良影响〔1〕。对于老年骨质疏松患者临床多采取药物治疗,包括骨吸收抑制剂、促进骨形成的药物等,但仅能起到一定的减缓作用,治疗效果不理想〔2〕。近年研究发现,骨髓间充质干细胞(BMSCs)的分化与凋亡参与骨质疏松的病理机制〔3〕。BMSCs是一种具备多向分化潜能的成体干细胞群,便于获取且体外培养难度不高〔4〕。目前BMSCs以体外细胞学研究为主〔5〕,在骨质疏松性骨折大鼠中的作用效果及可能机制的研究仍十分少见。本研究分析BMSCs对骨质疏松性骨折模型大鼠的影响及作用机制。

1 材料与方法

1.1动物与主要试剂 雌性Wistar大鼠48只,体质量(270±10)g,购于安徽省盛鹏实验动物科技有限公司,实验动物许可证编号:SCXK(皖)2020-002,自由进食、进水,每日12 h光照。胰蛋白酶、DMEM培养基、胎牛血清均购于北京科美图生物科技有限公司;骨碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原交联C-末端肽酶联免疫检测试剂盒购于上海研谨生物科技有限公司。

1.2大鼠BMSCs原代提取及培养 将大鼠断髓处死,放入乙醇溶液中浸泡后取下股骨、胫骨,转入磷酸缓冲液中浸泡。使用手术刀将股骨、胫骨表面的软组织去除,同时切除干骺端,暴露髓腔。无菌注射器吸取细胞培养液冲洗髓腔,观察髓腔颜色变白后停止冲洗。2 000 r/min 4 ℃恒温离心15 min。……