王 璇，陈林珍，林瑞超，陈美琳，范琦琦，李芝奇，赵崇军，李向日

重楼皂苷I对斑马鱼发育毒性、抗血管新生活性及其机制研究

王 璇，陈林珍，林瑞超，陈美琳，范琦琦，李芝奇，赵崇军*，李向日*

北京中医药大学 中药品质评价北京市重点实验室/中药炮制研究中心，北京 102488

基于模式生物斑马鱼研究重楼皂苷I的发育毒性、抗血管新生活性，并利用网络药理学探究重楼皂苷I抗血管新生的作用机制。将受精后6 h（6 h post fertilization，6 hpf）的斑马鱼胚胎暴露于不同浓度的重楼皂苷I中96 h，在实验终点确认重楼皂苷I对斑马鱼胚胎的致死曲线，计算20%致死浓度（20% lethal concentration，LC20）。在实验终点，以斑马鱼自主抽动次数、96 hpf心率、斑马鱼肝脏面积、静脉窦-动脉球间距、总胆固醇（total cholesterol，T-CHO）、三酰甘油（triglyceride，TG）、低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）含量等指标，结合吖啶橙、油红O染色观察综合评价重楼皂苷I的发育毒性及其相关靶器官毒性。安全剂量条件下，以斑马鱼肝脏面积和静脉窦-动脉球间距评价重楼皂苷I对相关靶器官的影响，同时以节间血管数评价重楼皂苷I对斑马鱼节间血管生长的影响。基于网络药理学预测重楼皂苷I抗血管新生的作用机制并通过qRT-PCR技术进行验证。重楼皂苷I对斑马鱼胚胎的致死曲线为＝270－23.62，LC20为0.16 µg/mL；在亚致死浓度暴露条件下的实验终点，与对照组比较，0.16 μg/mL重楼皂苷I能够诱导斑马鱼幼鱼出现卵黄囊吸收延迟，脊柱弯曲，尾巴畸变等明显的毒性特征，且T-CHO、TG、LDL-C含量明显升高（＜0.05、0.01）；吖啶橙染色及油红O染色表明0.16 μg/mL重楼皂苷I能引起斑马鱼肝脏细胞凋亡和脂肪变性。……