邱敬诚

[摘要] 目的 探讨慢性牙周炎患者采用盐酸米诺环素联合甲硝唑治疗的效果及对龈沟液中相关炎症因子水平的影响。方法 选取舟山市妇女儿童医院收治的126 例慢性牙周炎患者，采用随机数字表法分为联合组和对照组，每组各63 例，联合组采用盐酸米诺环素+甲硝唑治疗，对照组采用盐酸米诺环素，疗程均为4 周，比较两组患者的牙龈指数（gingival index，GI）、出血指数（bleeding index，BI）、探诊深度（periodontal probing depth，PD）、附着丧失（attach-ment loss，AL）及龈沟液（gingival crevicular fluid，GCF）中基质金属蛋白酶1（matrix metalloproteinase-1，MMP-1）、基质金属蛋白酶8（matrix metalloproteinase-8，MMP-8）、巨噬细胞炎症蛋白-1α（macrophage inflammatory protein 1α，MIP-1α）、可溶性细胞间黏附分子1（soluble adhesion molecules-1，sICAM-1）及疗效。结果 治疗前，联合组和对照组的GI、BI、PD、AL、GCF 中MMP-1、MMP-8、MIP-1α、sICAM-1 测定值比较，差异无统计学意义（P>0.05）；治疗后，联合组的GI、BI、PD、AL、GCF 中MMP-1、MMP-8、MIP-1α、sICAM-1 均低于对照组（P<0.05）。治疗后，联合组的显效率57.38%高于对照组的37.29%，两组临床疗效比较，差异有统计学意义（P<0.05）；治疗过程中，联合组的不良反应发生率8.20%与对照组的3.39%比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论 盐酸米诺环素联合甲硝唑治疗慢性牙周炎能显著改善患者牙周炎症反应，提高临床治疗效果。

[关键词] 慢性牙周炎；甲硝唑；龈沟液；炎症因子

[中图分类号] R781.4   [文献标识码] A   [DOI] 10.3969/j.issn.1673-9701.2023.12.023

牙周炎是口腔科的常见病、多发病，其发病逐渐呈年轻化，对患者牙周组织产生严重破坏。目前认为牙周炎的发病主要与遗传、免疫及微生物多种因素有关。牙周炎的治疗为早期诊断并清除感染微生物，为患者创造长期保持牙周组织健康的环境[1]。

目前对牙周炎的治疗方法较多，机械性方法通过清除牙周袋菌斑和牙石，虽然可以获得一定的治疗效果，但是由于侵袭性牙周炎致病因素较为复杂，预后较差，治疗不及时会对患者口颌功能产生影响，严重者导致牙齿缺失[2]。药物也是治疗牙周炎的重要方法之一，以往采取盐酸米诺环素治疗，抗菌谱广泛，但剂量大，药物不良反应频发，且牙周炎为厌氧菌感染所致，研究发现甲硝唑是抗厌氧菌药物，安全性更高，用于牙周炎治疗效果显著[2]。近年大量研究发现，牙周炎的发病与细胞因子关系密切，巨噬细胞炎症蛋白-1α 是趋化因子β 家族一员，在牙周炎患者牙龈肿表达显著升高，基质金属蛋白酶则是破坏牙槽骨和降解牙组织的重要物质，近年来对上述因子变化临床报道较少[3]。本研究旨在分析盐酸米诺环素联合甲硝唑在慢性牙周炎患者治疗中的作用，及对患者细胞因子的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取舟山市妇女儿童医院2019 年1 月至2020年10 月收治的126 例慢性牙周炎患者，纳入标准：①慢性牙周炎患者的诊断标准参考人民卫生出版社《牙周病学》[4]中的标准；②患者出现至少2 个患牙，且探诊深度均>4.0mm；③患者年龄19～75 岁；④病程>0.5 年；⑤研究方案经舟山市妇女儿童医院伦理委员会审批通过[伦理审批号：院伦（办）[2017]55 号]，治疗前与患者签署知情同意書。排除标准：①口腔肿瘤；②艾滋病感染患者；③妊娠或哺乳期妇女；④造血系统疾病；⑤对本研究治疗药物过敏者。入选的126 例患者采用随机数字表法分为联合组和对照组，每组各63 例，联合组患者年龄21～73 岁，平均（44.4±8.8）岁；性别男36 例、女27 例，病程（13.9±3.2）个月；体质量指数（22.8±2.2）kg/m2；合并疾病：高血压12 例、糖尿病6 例；吸烟21 例、饮酒24 例；退出研究2 例。对照组患者年龄25～75 岁，平均（46.1±10.0）岁；性别男32 例、女31 例，病程（15.0±3.5）个月；体质量指数（23.0±2.4）kg/m2；合并疾病：高血压15 例、糖尿病3 例；吸烟16 例、饮酒18 例；中途退出研究4 例，两组患者的基线资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法 对照组采用盐酸米诺环素软膏（批准文号：国药准字H20100244，生产单位：日本Sunstar INC 公司生产，药品批号：H20180318，规格0.5g/支）牙周袋内注射，1 次/周，连续治疗4 周。联合组采用盐酸米诺环素（批准文号：国药准字20180318，生产单位：日本Sunstar INC 公司生产，规格：50mg×10 粒/盒）+甲硝唑（批准文号：国药准字H20057236，生产单位：四川科伦药业股份有限公司生产，规格200mg/片）治疗，盐酸米诺环素治疗方法同对照组，同时口服甲硝唑400mg/次，3 次/d，连续治疗4 周。

1.2.2 评价指标 比较两组的治疗效果、牙龈指数（gingival index，GI）、出血指数（bleeding index，BI）、探诊深度（periodontal probing depth，PD）、附着丧失（attach-ment loss，AL）、GCF 中基质金属蛋白酶1（matrix metalloproteinase-1，MMP-1）、基质金属蛋白酶8 （ matrix metalloproteinase-8 ，MMP-8 ） 、巨噬细胞炎症蛋白-1α （ macrophageinflammatory protein 1α，MIP-1α）、可溶性细胞间黏附分子1（soluble adhesion molecules-1，sICAM-1）的变化。去除龈沟液收集部位的牙石和菌斑，漱口后用气枪将牙龈轻吹1min，无菌滤纸条垂直插入牙唇面的龈沟与牙周袋，遇阻力停留30s 取出，重复取样后将滤纸条置入微离心管，采用酶联免疫吸附法测定MMP-1、MMP-8、MIP-1α、sICAM-1 的水平，试剂均由加拿大Calblochem 公司提供，严格按照试剂盒说明书进行操作（ 试剂批号： 20180218 、20180311、20180402）。

1.3 疗效评价[4]

显效：患者在治疗后牙周的炎症症状基本上消退，疼痛感消失，牙周袋消失或变浅（>2mm），牙槽骨吸收呈静止型，患者的咀嚼功能较治疗前显著的好转，牙周无分泌物。有效：治疗后，患者的炎症反应状态得到一定的程度的减轻，牙龈疼痛感显著改善，对咀嚼功能影响不明显，牙周袋变浅（<2mm），牙槽骨吸收情况稳定，牙齿松动度减轻，分泌物较治疗前显著减少；无效：未达到上述治疗效果。

1.4 统计学方法

采用SPSS 21.0 统计学软件对数据进行分析处理， 符合正态分布的计量资料以均数±标准差（x ±s ）表示，组间比较采用t 检验；不符合正态分布的数据用中位数（四分位数间距）[M（Q1，Q3）]表示，采用F 检验；计数资料用例数（百分率）[n（%）]表示，采用χ2 检验，等级资料组间比较采用Mann-WhitneyU检验，P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组牙周健康指标比较

治疗前，联合组和对照组的GI、BI、PD、AL比较，差异无统计学意义（P>0.05）；治療后，联合组的GI、BI、PD、AL 均低于对照组（P<0.05），见表1。

2.2 两组患者龈沟液中的各项炎症指标比较

治疗前，联合组和对照组GCF 中的MMP-1、MMP-8、MIP-1α、sICAM-1 比较，差异无统计学意义（P>0.05）；治疗后，联合组的GCF 中MMP-1、MMP-8、MIP-1α、sICAM-1 均低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

2.3 两组临床疗效比较

治疗4 周后，联合组的显效率57.38%，显著高于对照组的37.29%，两组疗效比较，差异有统计学意义（Z=–2.299，P<0.05），见表3。

2.4 两组不良反应比较

治疗后联合组的不良反应发生率为8.20%，与对照组的3.39%比较，差异无统计学意义（χ2=1.262，P=0.261>0.05），见表4。

3 讨论

慢性牙周炎临床发病率较高，是导致牙齿缺失的重要因素，患者临床症状出现龈炎症，牙周袋形成，牙槽骨吸收，牙齿松动等，最终可导致牙齿脱落，严重影响患者生活质量[5]。有研究指出牙周炎的患病率约70%～85%，是造成心脑血管疾病、糖尿病等疾病发生危险因素[6-7]。还有学者认为牙周炎属于细菌感染性疾病，附着在牙菌斑的病原微生物和代谢产物累积是牙周炎发病的重要原因，以往认为伴有牙周疾病患者种植术后感染发生的概率会显著提升，有报道指出在牙周炎患者置入两颗种植体后种植体周围形成反复化脓，且迁延不愈，最终导致种植失败[8-9]。传统的治疗方案利用龈下刮治配合根面平整进行联合治疗，但是上述治疗方法均为机械性手段，对医生操作技术要求较高，而且对根面平整的次数较多，机械力会导致根面组织被损伤，牙本质易发生过敏和根折断，因此药物治疗在牙周炎的治疗中也占有重要的地位[10-11]。传统治疗方法以米诺环素局部用药治疗为主，虽然获得了一定的效果，但优势并不明显，而且随着抗菌药物耐药性的增加导致治疗失败也时有发生。通过联合甲硝唑治疗取得了良好的效果，甲硝唑属于乙磺酰基衍生物，半衰期更长，因此局部的浓度高，抗菌谱主要是厌氧菌和嗜二氧化碳微生物，抗菌作用是甲硝唑的3～4倍，且比甲硝唑更易透入细菌内杀灭细菌[12-13]。研究发现，甲硝唑治疗的起效机制一方面是进入到易感微生物细胞在无氧环境或者较低氧化还原电位下硝基易被电子传递蛋白还原变为具有细胞毒性作用氨基，可以抑制细菌DNA 合成过程，同时让已经合成DNA 发生降解，通过破坏DNA 双螺旋结构阻断转炉复制过程导致细胞出现死亡[14-15]。另一方面甲硝唑应用后最终形成无活性终产物，主要和抗厌氧菌生物活性与铁氧化还原蛋白还原酶调节硝基的还原作用有关，铁氧化还原蛋白还原酶是厌氧菌无氧糖代谢的关键酶，通过5-硝基基团的还原作用活化，产生一个不稳定的中间体，此毒性代谢产物先影响细胞内蛋自质，造成DNA 双螺旋空间结构解体，抑制修复，最终导致DNA 复制转录的终止，从而造成细胞死亡[16-18]。有学者对30 例中重度成人牙周炎活动期患者的治疗发现在治疗成人牙周炎采取甲硝唑葡萄糖注射液优于甲硝唑葡萄糖注射液，不良反应发生率也显著低于甲硝唑组，与本研究结果相似[19-20]。

本研究还分析了患者牙龈液多种炎症因子变化，有研究指出细胞外基质降解是牙周炎发生的重要基质，而基质金属蛋白酶破坏是关键因素，多种致病菌会导致宿主细胞基质金属蛋白酶分泌增多，因此通过减轻炎症反应并维持内环境稳定对患者牙周组织损伤恢复意义重大。MIP-1α 同样是炎症渗出液，研究发现在干燥症、牙髓炎、青少年牙周炎等口腔疾病中具有重要作用，同样可以作为慢性牙周炎症程度的重要指标之一。本研究中治疗后，联合组的MMP-1、MMP-8、MIP-1α、sICAM-1 均低于对照组，说明联合甲硝唑应用在慢性牙周炎治疗中减轻牙周炎症反应程度效果优于单纯使用米诺环素治疗。本研究还发现，治疗后联合组的GI、BI、PD、AL 均低于对照组，说明联合甲硝唑应用于慢性牙周炎治疗中改善牙周健康效果优于单纯使用米诺环素治疗。治疗4 周后，联合组的显效率为57.38%高于对照组的37.29%，两组比较，差异有统计学意义，说明联合甲硝唑应用在慢性牙周炎治疗中可以提升临床疗效。治疗过程中，联合组的不良反应发生率为8.20%与对照组的3.39%比较，差异无统计学意义，说明联合甲硝唑应用在慢性牙周炎治疗中不会增加不良反应，应用安全。本研究的优势在于甲硝唑联合治疗慢性牙周炎的作用，同时分析了患者炎症因子变化从分子生物学角度提升了临床证据的可靠性，同时选取了MMP-1、MMP-8、MIP-1α、sICAM-1 等炎症因子指标，进一步证实了联合治疗对于患者治疗效果的影响，为临床治疗牙周炎提供了可靠的治疗方案。

综上，盐酸米诺环素联合甲硝唑治疗慢性牙周炎能显著的改善患者的牙周炎症病情，对于提高临床治疗效果具有积极作用。

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（收稿日期：2022–08–05）

（修回日期：2023–02–06）