两种不同方法提取骨髓间充质干细胞来源外泌体的比较
2023-06-21徐海瑾李家瑞
徐 彧, 徐海瑾, 李家瑞, 孔 斌, 李 卉, 陆 宏, 宋 辉
(1. 宁夏医科大学基础医学院医学遗传学与细胞生物学系,银川 750004; 2.宁夏医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系,银川 750004; 3. 宁夏医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系,银川 750004)
间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一种具有多向分化潜能的成体干细胞[1],源于机体发育不同阶段的多个组织和器官中,如骨髓、脂肪、脐带、胎盘、牙髓等[2]。基于低免疫原性、组织来源多样化、易于在体外分离并快速扩增等优势[2-4],MSCs 的研究和治疗取得了一定进展。骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)是较早发现并研究较为深入的一种MSCs[5]。研究[6]表明,MSCs 主要通过其所衍生的外泌体来发挥旁分泌修复作用。外泌体粒径为30~150 nm,普遍存在于各种体液中,并携带亲代细胞中的蛋白质、脂质、DNA、RNA 等重要物质[7-8],可以进行细胞间信息传递,影响细胞的生理状态,并与多种疾病的发生发展密切相关[9]。研究[10]发现,MSCs 外泌体不仅具有与亲代MSCs 相似的生物学作用,且免疫原性更低,更容易量化,并能在储存和运输过程中保持生物活性,克服了MSCs 的很多缺陷,有望替代MSCs 成为新型的无细胞疗法。如何有效地制备外泌体,并保留其生物学特性,是进一步实验研究及临床应用的重要前提。目前,提取外泌体的主要方法有超速差速离心法、ExoQuick-TCTM法、密度梯度离心法、色谱法等[11-13],但均未形成规范化体系。本研究对大鼠BMMSCs 外泌体两种提取方法(超速差速离心法与ExoQuick-TCTM法)进行比较,以期筛选适合大鼠BMMSCs 外泌体的有效提取方法。……
