H2O2 诱导小鼠睾丸间质TM3 细胞铁死亡模型的构建

2023-06-21马丽媛母春兰刘春莲焦海燕

宁夏医科大学学报 2023年5期

关键词：检测

王佳，马丽媛，母春兰，刘春莲，焦海燕

（1.宁夏医科大学教育部生育力保持重点实验室，银川 750004； 2.宁夏医科大学基础医学院医学遗传学与细胞生物学系，银川 750004； 3. 宁夏医科大学总医院生殖中心，银川 750004）

近年来，不育已成为世界范围内的重要健康问题之一。近50%的不育与男性因素有关[1]，而活性氧（reactive oxygen species，ROS）介导的睾丸组织损伤是其主要原因[2]。睾丸组织细胞质膜中丰富的多不饱和脂肪酸易受ROS 攻击[3-4]。当机体内过量的ROS 打破氧化-抗氧化平衡时，则会发生氧化应激（oxidative stress，OS）。目前研究[5]发现，由ROS 导致的脂质过氧化物（lipid peroxide，LPO）积累是引发铁死亡的关键因素。铁死亡是一种铁依赖的LPO 积累引起的调节性细胞死亡。不同于其他的细胞死亡形式，当发生铁死亡时，细胞内Fe2+浓度升高，LPO 水平增加，谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidase 4，GPX4）活性降低[6]，线粒体萎缩，膜密度增大，嵴减少或消失[7]。有研究[8-9]显示，男性不育患者精子中ROS 积累、GPX4 活性降低，推测OS 导致的生殖损伤与铁死亡有关，但目前尚缺乏直接证据，且缺乏用于相关研究的细胞模型。因H2O2极易透过细胞膜，可与细胞内的Fe2+通过Fenton 反应使细胞产生大量ROS 和丙二醛（malondialdehyde，MDA）[10]，常被用于诱导细胞产生OS。本研究拟用H2O2诱导小鼠睾丸间质TM3 细胞建立铁死亡细胞模型，研究结果将为进一步研究铁死亡对生殖细胞的影响及抗氧化药物对雄性生殖细胞的保护作用及机制奠定实验基础。