王欣波 ，齐明明 ，邵音 ，赵宇 ，聂双莲 ，朴勇洙

1.黑龙江中医药大学附属第一医院，黑龙江 哈尔滨 150040；2.黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040

阿尔茨海默病（Alzheimer disease，AD）是一种病因尚不明确的中枢神经系统退行性疾病，临床以认知功能降低与进行性记忆力减退为主要表现。作为临床痴呆的常见诱因，AD以异常磷酸化的Tau蛋白聚集形成的神经原纤维缠结和含β淀粉样蛋白（Aβ）的老年斑块为主要病理特征，目前尚无特效疗法能阻止或逆转AD 进展[1]，给家庭和社会带来沉重的经济负担[2-3]。目前全球约有5 000万AD患者，预计到21世纪中叶罹患AD的人数将升至1.52亿，我国目前约有1 000万AD患者。

miRNA是一类核苷酸内源性非编码RNA，具有高保守性和组织特异性，通过Aβ代谢、氧化应激反应、神经炎症、Tau蛋白磷酸化和胆固醇代谢等生理过程参与AD发生发展[4]。课题组前期研究发现，安神定志方能抑制海马组织miR-103a-3p/BDNF通路，参与Tau蛋白磷酸化的调控，发挥改善AD大鼠学习记忆能力的作用[5]。本研究通过体外实验观察安神定志方对Aβ诱导的大鼠PC12 细胞miR-103a-3p/BDNF/TrkB 通路相关分子表达的影响，进一步阐明安神定志方治疗AD的作用机制。

1 材料与方法

1.1 动物与细胞

清洁级雄性SD大鼠20只，8周龄，体质量（200±5）g，购于黑龙江中医药大学动物实验中心，动物许可证号SCXK（黑）2015-003。饲养于黑龙江中医药大学中西医结合实验室动物房，温度22.5～24.5 ℃，相对湿度44%～53%，光照时间12 h/d，自由摄食饮水。大鼠PC12细胞株购于中国科学院上海生科院细胞资源中心。

1.2 药物及制备

安神定志方（党参15 g，茯神15 g，茯苓15 g，龙齿25 g，石菖蒲5 g，远志5 g），饮片购自黑龙江中医药大学附属第一医院中药房。……