基于P72、MGF和CD2v基因的非洲猪瘟三重荧光定量PCR检测方法的建立
2023-06-07张红云陈秋英严斯刚杜泓明陆志翔郑敏罗廷荣
张红云 陈秋英 严斯刚 杜泓明 陆志翔 郑敏 罗廷荣*
(1.广西大学生命科学与技术学院,广西 南宁 530004;2.广西悦牧生物科技有限公司,广西 南宁 530006;3.广西璞缔恩葳生物技术有限公司,广西 南宁 530006;4. 柳州市动物疫病预防控制中心,广西 柳州 545026;5.广西大学动物科学技术学院,广西 南宁 530004;6.广西壮族自治区动物疫病预防控制中心,广西 南宁 530004)
2018年8月在我国辽宁省首次报道非洲猪瘟(African swine fever,ASF)疫情,随后疫情从东北地区迅速蔓延至全国各地,对我国养猪业造成了不可估量的经济损失[1]。非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)是非洲猪瘟病毒科(Asfarviridae)的一种病毒,仅感染猪科动物[2]。
ASF刚传入中国呈现出感染性强、毒力强的特点,表现为高热、皮肤充血、多器官出血及流产、快速传染和死亡等急性症状,给养猪业造成重大损失。随着ASFV在中国的定殖,逐步出现基因缺失株、自然变异株、自然弱毒株等基因变异毒株,与传统的野毒株相比,生猪感染基因变异毒株后,表现为排毒滴度低、间隙性排毒、潜伏期长、难以早期发现和精确监测。基因变异毒株的基因组序列、致病力等发生明显变化。
ASFV基因变异毒株侵染初期没有明显的临床症状,采用抗体检测无法区分所感染病毒株的类型,采用保守的P72蛋白序列研制的荧光定量PCR方法进行检测,虽然可以尽早发现被ASFV感染的猪只,但是无法鉴别野毒株与基因变异毒株,因此建立能够鉴别野毒株和基因变异毒株的多重荧光定量PCR方法,对构建猪场生物安全屏障,开展ASFV的野毒株和基因变异毒株的鉴别诊断意义重大,有利于养殖场采取相应措施进行防控。……
