梅文馨，胡高斌，彭 辉，经文善，黄 龙，于庆生

(1.安徽中医药大学第一附属医院,安徽 合肥 230031；2.安徽省中医药科学院中医外科研究所,安徽 合肥 230031)

肝纤维化是由饮酒、代谢障碍和病毒等引起的慢性肝损伤的过程，是一种可逆的创伤愈合反应[1]。在肝脏持续损伤过程中，慢性炎症和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的持续积累导致肝实质逐渐被瘢痕组织替代，最终导致肝硬化。许多类型的细胞、细胞因子和miRNA均参与肝纤维化和肝硬化的进程，如库普弗细胞、肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)、血小板源性生长因子、转化生长因子-β(transforming growth factor beta,TGF-β)[2-3]。肝纤维化的发展与HSCs的激活密切相关，在肝脏慢性损伤发展过程中，静止的HSCs被激活，并进一步分化成肌成纤维细胞，分泌大量以Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白为主的ECM。因此，抑制HSCs的激活成为改善肝纤维化的研究热点[4]。前期研究[5]发现，健脾活血中药能明显提升门静脉高压合并脾功能亢进脾切除患者术后肝脏血液供应，改善肝功能。因此，笔者推测健脾活血中药在改善肝功能的同时，能进一步改善肝纤维化。本研究通过细胞实验观察健脾活血中药对HSCs的主要纤维化指标的影响，探究其改善肝纤维化的机制。

1 材料

1.1 细胞与试剂 人HSCs细胞系LX-2(货号 CC4023)：上海细胞所；高糖DMEM培养基(货号 01-052-1ACS)：以色列Biological Industries公司；澳洲胎牛血清(fetal bovine serum, FBS；货号 10099-141C)、胰蛋白酶(货号 25200-072)、双抗[青霉素+链霉素(P.S)；货号 15140-122]：美国Gibco公司；TGF-β1试剂盒(货号 240-B-002)：美国R&D Systems；一抗内参(GAPDH；货号 60004-1-Ig)：武汉三鹰生物技术有限公司；一抗[α平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin，α-SMA；货号 380653)、胶原蛋白Ⅰ(collagen Ⅰ，Col-Ⅰ；货号 R26615)、胶原蛋白Ⅲ(collagen Ⅲ，Col-Ⅲ；货号 R23957)：正能生物；……