王红

糖尿病属于发病率较高的慢性疾病之一,患者体内由于胰岛素分泌不足或外周组织对胰岛素不敏感引起的全身代谢性疾病,临床上以持续的高血糖为特征。随着病程的延长,持续的高血糖将会引起各种组织、脏器的长期损害、功能不全或衰竭［1］。根据糖尿病的发病机制不同可分为I 型糖尿病、Ⅱ型糖尿病、妊娠糖尿病及其他类型糖尿病等多种类型,导致患者糖尿病肾病、视网膜病变及糖尿病足发生率较高［2］。世界卫生组织(WHO)规定,以血糖作为糖尿病主要诊断依据,是判断病情、控制情况的主要指标［3］。当前,血糖常用的监测方法包括点式血糖监测、糖化血红蛋白(HbA1c)监测、连续血糖监测等,且随着医疗技术的不断发展,便携式血糖仪开始用于临床,但是该监测方法必须建立血糖仪检测质量保证体系,包括完善的室内质控与室间质评体系［4］。既往研究表明［5］：不同抗凝剂对血糖检测存在一定的影响,且不同品牌即时检验(POCT)血糖仪在不同抗凝物质组成的基准物质比对中,测定值存在差异,导致测定结果不准确。本研究参考GB/T19634-2005 标准,制备低浓度、正常范围、高浓度标本合计100 份,探讨抗凝剂物质对便携式血糖仪比对测试结果的影响,现报告如下。

1 材料与方法

1.1材料来源 根据中华人民共和国国家标准GB/T19634-2005 制备低浓度、正常范围、高浓度血糖标本共100 份。本研究获得伦理委员会批准,且血液标本采集均严格遵循要求制备,不同浓度的标本采用不同抗凝剂抗凝。

1.2仪器与设备 ①比对系统：日立全自动生化分析仪；②参比系统：拜尔抗RO、强生稳豪、罗氏、韩国i-SENS4 种便携式血糖仪及配套的原装试剂盒；全自动血糖检测试剂(购自葡萄糖测定试剂盒,采用已糖激酶法监测)；4 种便携式血糖配套试剂盒,均采用葡萄糖脱氢酶法测定；维生素C(VC)配制标准溶液10 g/L,分别加入上述已经调整浓度的低、中、高糖标本中。

1.3方法

1.3.1标本采集及血糖浓度测定 分别制备低浓度、正常范围、高浓度标本共100 份。以肝素锂、乙二胺四乙酸二钾盐(EDTA-K2)及氟化钠作为抗凝物质,血糖浓度和样本数：≤2.77 mmol/L 样本4 份,2.78～4.44 mmol/L 样本16 份,4.45～6.66 mmol/L 样本20 份,6.67～11.10 mmol/L 样本30 份,11.11～16.65 mmol/L 样本16 份,16.66～22.20 mmol/L 样本10 份,≥22.21 mmol/L样本4 份。选择健康体检者,肝素锂、EDTA-K2及氟化钠作抗凝,用于抗干扰能力检测分析。采集的血液标本充分混均后,每份平均分为3 管,10 ml/管。血糖浓度分别调整为低浓度(1.1～3.3 mmol/L)、正常范围(11.1～16.7 mmol/L)、高浓度(18.1～22.2 mmol/L)标本［6,7］。

1.3.2血糖仪、生化分析仪检测方法 ①血糖仪检测：根据便携式血糖仪说明书完成有关操作,每管标本充分混合后进行测定,每台血糖仪均对100 份标本进行测定,用于评估便携式血糖仪的精密度；②生化分析仪检测：检验人员根据实验项目标准化操作程序(SOP)相关文件完成标本的葡萄糖测定,标本离心后取血浆,并于30 min 内完成血糖水平测定,为了降低人为因素引起的误差,每份标本均测定2 次,取平均值,上述所有操作均严格遵循仪器与试剂盒说明书完成［8］。

1.3.3便携式血糖仪评价标准 参考《医疗机构便携式血糖测定仪管理和临床操作规范(试行)》的要求,对不同类型便携式血糖仪和不同抗凝剂物质测定结果进行判断。①准确度评价：当血糖浓度<4.2 mmol/L 时,至少95%检测结果偏差在±0.83 mmol/L 范围内；当血糖浓度≥4.2 mmol/L 时,至少95.0%检测结果偏差在±20.0%范围内。即每台仪器检测20 个标本中至少19 个结果在偏差允许范围内,否则为比对试验不通过或不合格［9］。②精密度评价：检测标本浓度为9.1 mmol/L,CV≤7.5%为合格［10］。

1.4统计学方法 采用SPSS24.0 统计学软件对数据进行处理。计量资料以均数±标准差()表示,采用t 检验,多组比较采用F 检验；计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P<0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1不同类型便携式血糖仪比对试验通过率比较 采用拜尔抗RO、强生稳豪、罗氏、韩国i-SENS 便携式血糖仪30 台完成血糖仪试验,30 台便携式血糖仪中3台仪器未通过,通过率为90.0%,其中拜尔抗RO 通过率为100.00%,而韩国i-SENS 便携式血糖仪通过率最低,为66.67%。见表1。

表1 不同类型便携式血糖仪比对试验通过率比较(台,%)

2.2各便携式血糖仪与生化分析仪血糖检测结果比较拜尔抗RO、强生稳豪、罗氏、韩国i-SENS 便携式血糖仪对低浓度、正常范围、高浓度标本的测定结果与生化分析仪比较差异均无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 各便携式血糖仪与生化分析仪血糖检测结果比较(,n=100)

表2 各便携式血糖仪与生化分析仪血糖检测结果比较(,n=100)

注：与生化分析仪比较,aP>0.05

2.3抗凝剂物质对便携式血糖仪比对测试结果的影响为了分析肝素锂、EDTA-K2及氟化钠不同类型抗凝剂物质对便携式血糖仪测定结果的影响,通过不同血糖浓度下利用4 种便携式血糖仪测定,结果表明：血糖浓度1.1～3.3 mmol/L、11.1～16.7 mmol/L、18.1～22.2 mmol/L 下拜尔抗RO、强生稳豪、罗氏、韩国i-SENS便携式血糖仪采用肝素锂、EDT-K2抗凝对血糖测定结果无影响；拜尔抗RO、强生稳豪、罗氏、韩国i-SENS便携式血糖仪采用氟化钠作为抗凝物质测定结果高于肝素锂和EDTA-K2,差异具有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 抗凝剂物质对便携式血糖仪比对测试结果的影响(,n=100)

表3 抗凝剂物质对便携式血糖仪比对测试结果的影响(,n=100)

注：与氟化钠比较,aP<0.05

2.4不同类型便携式血糖仪与生化分析仪血糖检测结果的相关性分析 采用Pearson 相关性分析软件,以生化分析仪作为因变量,便携式血糖仪为自变量,完成线性回归分析,拜尔抗RO、强生稳豪、罗氏、韩国i-SENS便携式血糖仪的r 值分别为0.999、0.994、0.984、0.987。见表4。

表4 不同类型便携式血糖仪与生化分析仪血糖检测结果的相关性分析

2.5不同类型便携式血糖仪精密度分析 以便携式血糖测定仪重复测定100 份标本进行计算,拜尔抗RO、强生稳豪、罗氏、韩国i-SENS 便携式血糖仪CV 分别为1.49%～2.21%、1.84%～2.51%、5.29%～5.53%和5.13%～6.98%,以CV≤7.5%为标准,所有仪器均合格。见图1。

图1 不同类型便携式血糖仪精密度分析

3 讨论

近年来,随着居民生活方式、饮食结构的改变,再加上劳动强度的降低,人均寿命的延长,使得糖尿病发生率呈上升趋势,并成为世界各国越来越严重的公共卫生问题［11］。当前,血糖监测常用方法有以下几种：①点式血糖监测：适用于血糖控制良好且稳定患者；②连续血糖监测：适用于新发糖尿病、治疗过程中出现血糖波动、开始新的或调整旧的治疗方案,如需要改变饮食、用药品种及其剂量等；③HbA1c 监测：用于患者本项目监测3 个月平均血糖水平的监测与评价。同时,血糖监测时间和频率亦是糖尿病管理的重要组成部分,其结果有助于评估糖尿病患者代谢紊乱程度,并制定针对性的降糖方案,亦可反映降糖治疗效果,指导临床治疗。

目前,临床上主要利用血糖仪完成毛细血管血糖检测,包括患者自我血糖监测(SMBG)及在医院内POCT 血糖检测,均为血糖监测的基本形式［12］。住院患者院内血糖监测可通过实验室生化分析仪完成静脉血浆或血清葡萄糖检测,但是更多患者的血糖检测通过快速、简便、准确的POCT 方法完成。因此,加强对便携式血糖仪的规范性管理,保证检测数据的有效性,对指导临床治疗具有重要的意义。本研究中,30 台便携式血糖仪中3 台仪器未通过,通过率为90.0%,提示便携式血糖仪用于血糖检测的通过率相对较高,基本能满足患者血糖监测所需。《医疗机构便携式血糖检测仪管理和临床操作规范》中指出,血糖仪属于PCOT设备,POCT 方法只能用于糖尿病患者的血糖监测。患者血氧类型、采血部位、血氧红细胞压积和多种内源性、外源性物质等均会对便携式血糖仪检测结果产生影响。血糖仪准确性因素包括便携式血糖仪测量结果与实验室血糖检测结果的一致程度,同一样本多次重复测量后一致程度［13］。

血糖是细胞进行正常代谢及维持器官正常的必需条件,临床上血糖测定的主要目的是了解患者体内神经激素的调节是否相对平衡,为临床进一步的诊断、观察治疗效果、判断病情发展提供参考［14］。因此,葡萄糖测定结果的准确性将直接影响临床诊断。但是,血液离体后由于红细胞能存活较长的时间,存活的红细胞会不断消耗血浆中的葡萄糖作为能量,使得血液中的葡萄糖降低。为了保证血糖检测结果的准确性,减少糖尿病患者的误诊和漏诊,血糖标本有必要使用能抑制糖分解的抗凝剂。肝素锂、EDTA-K2及氟化钠均为临床上常用的抗凝剂,但是不同抗凝剂原理存在差异性。肝素是一种含硫酸基团的黏多糖,其抗凝机制是与抗凝酶Ⅱ一起,在低浓度下抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3 之间的作用,并能加强抗凝血酶Ⅲ灭活丝氨酸蛋白酶,从而阻止凝血酶形成。而EDTA 则是通过与水相中的钙离子形成稳定螯合物,阻止血液的凝固。氟化钠亦是临床上常用的抗凝剂,具有抗凝和防止血糖酵解双重作用。氟化钠能在一定程度上抑制醌蛋白葡萄糖脱氢酶的生物学活性,导致血糖测定仪测定的微电流强度降低,从而对血糖值测定结果产生影响。本研究中,肝素锂、EDTA-K2抗凝对拜尔抗RO、强生稳豪、罗氏、韩国i-SENS 便携式血糖仪检测1.1～3.3 mmol/L、11.1～16.7 mmol/L、18.1～22.2 mmol/L 血糖的结果无影响；而采用氟化钠抗凝的拜尔抗RO、强生稳豪、罗氏、韩国i-SENS 便携式血糖仪血糖测定结果偏高,从本研究结果看出,抗凝剂物质会对便携式血糖仪测定结果产生干扰,且氟化钠抗凝对血糖检测结果的影响最大。张霞等［15］的研究表明：氟化钠对采用葡萄糖脱氢酶法的便携式血糖仪测定结果产生干扰,能在一定程度上影响疾病的诊疗。因此,便携式血糖测定仪测定患者血糖时,不宜使用氟化钠进行血液抗凝,尽可能采用EDTA-K2及肝素抗凝,降低对检测结果产生干扰。

综上所述,拜尔抗RO、罗氏、韩国i-SENS 便携式血糖仪的检测结果一致性较好,而国产强生稳豪的检测结果受到氟化钠抗凝物质的影响,但是均与日立全自动生化分析仪结果存在强相关性,临床检测时应根据需求选择合适的便携式血糖仪,降低内外源性干扰物的影响。