刘逸超，司 强，刘明健，卢 轩，闫 蒙，格根图，王志军，贾玉山*

(1.内蒙古农业大学草原与资源环境学院，农业部饲草栽培、加工与高效利用重点实验室，内蒙古 呼和浩特 010000；2.通辽市科尔沁左翼中旗林业和草原局，内蒙古 保康 029300；3.内蒙古民族大学农学院，内蒙古 通辽 028000)

随着畜牧业的发展，我国对优质饲料的需求也在不断增加，其中羊草(Leymuschinensis)和苜蓿(MedicagosativaL.)逐渐成为我国饲料生产的重要原料。羊草是禾本科、赖草属的多年生植物，因其耐寒、抗旱等特性，在欧亚东部的草甸草原和干旱草地上广泛分布，是中国内蒙古东、东北西部地区重要的草地资源。羊草早春变绿，晚秋变黄，利用期较长，它的根须具有极强的穿透性和侵略性，并能在一定程度上形成网状脉络，对土壤有很好的保护作用，是我国北方草地上的一种优势草，也是牲畜的主要食物来源。紫花苜蓿是多年生草本植物，是我国优质的豆科牧草，随着商品经济的发展，苜蓿产业化发展速度加快，种植面积也在逐步扩大，由于其优良的饲用特性，是制作青贮和青干草的重要原料[1-2]。在饲料加工过程中，由于受气候因素的影响，传统的干草调制在遭受雨淋后会出现养分的大量流失，而采用青贮技术，既能改善饲料的适口性，又能使贮藏期得到最大限度的延长，提高饲料的利用率。青贮饲料不仅是调节春冬季节青绿饲料不足和提高饲草利用率的一种行之有效的手段，还是实现规模化、现代化养殖的有效途径，可以大幅度降低养殖的风险，提高养殖效益。但是，在实际饲喂过程中，青贮饲料在开封后与空气接触，极易发生有氧变质，产生恶臭气味，使家畜的采食量下降，甚至产生有毒有害物质，严重危害家畜的健康[3-5]。

大量研究表明，采取适宜的装填密度能有效提高青贮饲料的有氧稳定性，在取用过程中延长饲料的保质期，保障家畜饲料安全。周天荣等人[6]对不同密度天然牧草裹包青贮的研究表明，在不添加添加剂的情况下，随着裹包密度的增加，其密封性进一步提高，高密度和中密度裹包青贮的青贮质量得到改善，合理的青贮密度是影响青贮饲料品质的重要因素。青贮密度过大时，会对牧草造成严重挤压，营养物质随着渗出液流失，发酵底物减少，乳酸菌的活动受到影响，导致青贮饲料乳酸含量较低，pH值和纤维类物质含量较高，贮成率较低。青贮密度过低时，大量空气会进入到青贮原料中，乳酸菌无法进行厌氧发酵，杂菌数量较多，青贮品质较差[7-8]。对于装填密度对青贮品质的影响，国内外学者研究结果表明，密度对发酵品质、微生物数量、有氧稳定性等影响较大，提高青贮密度可以改善青贮质量，提高其有氧稳定性。Sun等人[9]研究结果表明，在大麦青贮中提高装填密度降低了氨态氮、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量，提高了体外消化率。Driehuis等人[10]研究表明青贮发酵过程中有害菌会与乳酸菌进行底物和能量的争夺，其繁殖需要消耗较多的氧气。裹包密度较高时，牧草原料的间隙较小，氧气残存量较低，有利于乳酸菌发酵进程，可以为天然牧草保存较多的营养物质，提高品质。Geyer等人[11]的研究结果得出，青贮饲料调制过程中，青贮密度不仅决定了青贮饲料间孔隙中氧气的多少，而且对外界氧气渗透青贮饲料的程度也有一定的影响。

目前国内外对于不同密度青贮饲料的青贮过程中品质和微生物变化研究较多，但有关有氧暴露期间密度对品质劣变和微生物数量的影响研究较少，青贮饲料的有氧变质不仅会导致饲草资源的浪费，还会对动物的健康产生危害，影响畜牧业的发展。本试验通过研究装填密度对羊草和苜蓿青贮品质、有氧稳定性和微生物数量的影响，明确装填密度在青贮过程中和有氧暴露期间的影响，以期为生产高品质、高有氧稳定性的饲草青贮提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

羊草原料品种为‘吉生1号’，苜蓿原料品种为‘中苜1号’，种植于内蒙古自治区通辽市内蒙古民族大学科技园区内，试验地气候为温带大陆性季风气候，土地类型为沙化草地，地理坐标为122°11′25″E，43°59′15″N。

1.2 试验方法

羊草和苜蓿青贮原料分别于抽穗期和初花期刈割，用铡刀切割成2 cm左右，切碎混匀后按照不同密度装填到500 mL聚乙烯罐内，羊草青贮密度设置为：600 kg·m-3(Y6)、700 kg·m-3(Y7)、800 kg·m-3(Y8)，苜蓿青贮密度设置为：600 kg·m-3(M6)、700 kg·m-3(M7)、800 kg·m-3(M8)，控制青贮含水量在65%左右，每个处理设置3个重复，置于室温(20～30℃)保存，青贮60天后开罐，插入多通道温度记录仪后进行有氧暴露，测定青贮60天和有氧暴露8天时的各项指标变化。

1.3 测定指标

1.3.1营养指标 首先将样品放置在105℃的烘箱下进行杀青，再将烘箱调至65℃下进行48 h烘干至恒重，最后用40 mm和100 mm的筛子将样品粉碎并存储在自封袋中。营养指标与测定方法如表1所示。采用GB/T6435-2006干燥法测定干物质(Dry matter,DM)的含量；采用凯氏定氮法[16]测定粗蛋白质(Crude protein,CP)的含量；使用ANKOM(型号：A2000i)纤维分析仪测定酸性洗涤纤维(Acid detergent fiber,ADF)和中性洗涤纤维(Neutral detergent fiber,NDF)的含量；采用蒽酮-硫酸比色法[12]测定可溶性碳水化合物(Water soluble carbohydrate,WSC)的含量。

1.3.2发酵品质 羊草青贮和苜蓿青贮开罐后取10 g样品，加入90 mL蒸馏水，用均质拍打仪拍打2分钟，过滤得到青贮饲料浸提液。pH值采用酸度计测量；采用Agilent(型号：1100)高效液相色谱仪测定乳酸(Lactic acid,LA)、乙酸(Acetic acid,AA)、丙酸(Propionic acid,PA)和丁酸(Butyric acid,BA)的含量；采用苯酚-次氯酸比色法[18]测定氨态氮(Ammonia nitrogen,NH3-N)的含量。

1.3.3有氧稳定性 羊草青贮和苜蓿青贮开罐后，将多通道数据记录仪的探头(型号：MDL-1048A)插入试样的中心，每隔2个小时进行一次温度测量，记录温度的变化，每个无菌瓶口覆盖两层纱布，避免杂质污染和减少水分蒸发。本试验通过比较青贮饲料中心温度超过室温2℃所需要的时间来评估其有氧稳定性。

1.3.4微生物计数 羊草青贮和苜蓿青贮开罐后，取10 g样品，加入90 mL无菌水，用均质拍打仪拍打2分钟，过滤得到菌液。MRS培养基用于乳酸菌培养；马铃薯葡萄糖琼脂培养基用于霉菌和酵母培养；营养琼脂培养基用于好气性细菌培养；伊红美兰培养基用于大肠杆菌培养，采用平板计数法对微生物菌落进行计数。

1.4 数据处理

试验采集到的原始数据，在Excel 2010进行数据处理和表格制作，图片由Graphpad prism 8.0.2制成，SAS 9.2统计软件用于单因素方差分析。

2 结果与分析

2.1 原料特性

青贮原料的营养成分和微生物数量如表1所示。羊草的DM为32.46 % FW，WSC含量为5.25 % DM，乳酸菌数量为1.69 lg cfu·g-1。苜蓿的DM为26.56 % FW，WSC含量为4.10 % DM；乳酸菌数量为2.17 lg cfu·g-1。

表1 原料营养成分和微生物数量

2.2 装填密度对羊草和苜蓿青贮营养成分的影响

表2为装填密度对羊草青贮和苜蓿青贮营养成分的影响。羊草青贮各处理的DM无显著差异，各处理有氧暴露8天的DM均显著降低(P<0.05)。青贮60天时，Y8处理的CP含量为12.13%，显著高于其它处理(P<0.05)；Y7处理的CP含量为8.99%，显著低于其它处理(P<0.05)；有氧暴露8天时，Y6处理的CP含量为8.96%，显著低于其它处理(P<0.05)；各处理有氧暴露8天的CP含量均显著降低(P<0.05)。青贮60天时，Y8处理的WSC含量为2.48%，显著高于其它处理(P<0.05)，Y7处理的WSC含量为2.01 %，显著低于其它处理(P<0.05)；有氧暴露8天时，Y6处理的WSC含量为1.25%，显著低于其它处理(P<0.05)；各处理有氧暴露8天的WSC均显著降低(P<0.05)。青贮60天时，Y6处理的NDF含量为72.83%，显著高于其它处理(P<0.05)；Y7处理的NDF含量为65.06%，显著低于其它处理(P<0.05)；有氧暴露8天时，Y8处理的NDF含量为71.41 %，显著低于其它处理(P<0.05)。羊草青贮有氧暴露期间不同处理组的ADF含量均无显著变化。

表2 装填密度对青贮营养成分的影响

苜蓿青贮60天时，M6处理的DM含量为23.52%，显著低于其它处理(P<0.05)；M7和M8处理的DM含量无显著差异；有氧暴露8天时，M7处理的DM含量为22.32%，显著高于其它处理(P<0.05)，M6处理的DM含量为15.89%，显著低于其它处理(P<0.05)；各处理有氧暴露8天的DM含量均显著降低(P<0.05)。青贮60天时，M8处理的CP含量为24.31%，显著高于其它处理(P<0.05)；M6处理的CP含量为16.96 %，显著低于其它处理(P<0.05)；有氧暴露8天时，M8处理的CP含量为22.05%，显著高于其它处理(P<0.05)；各处理有氧暴露8天的CP均显著降低(P<0.05)。青贮60天时，M8处理的WSC含量为2.43%，显著高于其它处理(P<0.05)，M6处理的WSC含量为2.10%，显著低于其它处理(P<0.05)；有氧暴露8天时，M7处理的WSC含量为1.27 %，显著高于其它处理(P<0.05)，M8处理的WSC含量为1.03%，显著低于其它处理(P<0.05)；各处理有氧暴露8天的WSC含量均显著降低(P<0.05)。青贮60天时，M6处理的NDF含量为46.61 %，显著高于其它处理(P<0.05)；有氧暴露8天时，M7处理的NDF含量为39.68%，显著低于其它处理(P<0.05)，M6处理的NDF含量为55.43%,显著高于其它处理(P<0.05)；各处理有氧暴露8天的NDF含量均显著升高(P<0.05)。青贮60天时，各处理的ADF均无显著差异；有氧暴露8天时，M8处理的ADF含量为35.25%，显著低于其它处理(P<0.05)；M8处理有氧暴露8天的ADF显著升高(P<0.05)，其它处理无显著变化。

2.3 装填密度对羊草和苜蓿青贮发酵品质的影响

表4为装填密度对羊草青贮和苜蓿青贮发酵品质的影响。羊草青贮60天时，Y6处理的pH值为4.59，显著高于其它处理(P<0.05)，Y8处理的pH值为4.19，显著低于其它处理(P<0.05)；有氧暴露8天时，Y6处理的pH值为5.14，显著高于其它处理(P<0.05)，Y8处理的pH值为4.80，显著低于其它处理(P<0.05)；各处理组有氧暴露8天的pH值均显著升高(P<0.05)。青贮60天时，Y6处理的LA含量为24.06 g·kg-1，显著低于其它处理(P<0.05)；有氧暴露8天时，Y8处理的LA含量为11.03 g·kg-1，显著高于其它处理(P<0.05)，Y6处理的LA含量为8.24 g·kg-1，显著低于其它处理(P<0.05)；各处理有氧暴露8天的LA含量均显著降低(P<0.05)。青贮60天时，Y6处理的AA含量为12.56 g·kg-1，显著低于其它处理(P<0.05)；有氧暴露8天时，Y8处理的AA含量为6.96 g·kg-1，显著高于其它处理(P<0.05)，Y6处理的AA含量为4.25 g·kg-1，显著低于其它处理(P<0.05)；当各处理有氧暴露8天时，AA含量均显著降低(P<0.05)。有氧暴露期间未检测到PA，青贮60天时未检测到BA，有氧暴露8天时，Y8处理的BA含量为0.02 g·kg-1，显著低于其它处理(P<0.05)。青贮60天时，各处理的NH3-N均无显著差异(P<0.05)；有氧暴露8天时，Y8处理的NH3-N含量为0.17%，显著低于其它处理(P<0.05)；各处理有氧暴露8天的NH3-N均显著升高(P<0.05)。

苜蓿青贮60天时，M6处理的pH值为4.93，显著高于其它处理(P<0.05)，M8处理的pH值为4.51，显著低于其它处理(P<0.05)；有氧暴露8天时，M7处理的pH值为5.29，显著低于其它处理(P<0.05)；当各处理有氧暴露8天时，其pH值均显著升高(P<0.05)。青贮60天时，M8处理的LA含量为25.71 g·kg-1，显著高于其它处理(P<0.05)，M6处理的LA含量显著低于其它处理(P<0.05)，为21.38 g·kg-1；有氧暴露8天时，M7处理的LA含量为7.01 g·kg-1，显著高于其它处理(P<0.05)；各处理有氧暴露8天的LA含量均显著降低(P<0.05)。青贮60天时，M8处理的AA含量为14.00 g·kg-1，显著高于其它处理(P<0.05)，M6处理的AA含量为9.62 g·kg-1，显著低于其它处理(P<0.05)；有氧暴露8天时，M7处理的AA含量为3.02 g·kg-1，显著高于其它处理(P<0.05)，M6和M8处理的AA含量无显著差异；各处理有氧暴露8天的AA含量均显著降低(P<0.05)。有氧暴露期间未检测到PA，青贮60天时未检测到BA，有氧暴露8天时，各处理的BA含量均无显著差异。青贮60天时，M6处理的NH3-N含量为3.41%，显著高于其它处理(P<0.05)；有氧暴露8天时，M8处理的NH3-N含量为3.15%，显著低于其它处理(P<0.05)；各处理有氧暴露8天的NH3-N均显著升高(P<0.05)。

表3 装填密度对青贮发酵品质的影响

2.4 装填密度对羊草和苜蓿青贮有氧稳定性的影响

图1为装填密度对羊草青贮和苜蓿青贮有氧稳定性的影响。羊草青贮中Y6处理开罐70小时后超过室温2℃，有氧稳定性低于其他两组；Y8处理开罐86小时后超过室温2℃，有氧稳定性高于其他两组；Y7处理开罐74小时后超过室温2℃，有氧稳定性介于二者之间。苜蓿青贮中M6处理开罐60小时后超过室温2℃，有氧稳定性低于其他两组；M7处理开罐82小时后超过室温2℃，有氧稳定性高于其他两组；M8处理开罐76小时后超过室温2℃，有氧稳定性介于二者之间。

图1 青贮饲料有氧暴露期间超过室温2℃所需的时间

2.5 装填密度对羊草和青贮青贮微生物数量的影响

表4为装填密度对羊草青贮和苜蓿青贮微生物数量的影响。羊草青贮60天时，Y8处理的乳酸菌数量为6.29 lg cfu·g-1，显著高于其它处理(P<0.05)，Y6与Y7处理的乳酸菌数量无显著差异；有氧暴露8天时，Y6中的乳酸菌数为4.52 lg cfu·g-1，与其它处理相比显著降低(P<0.05)，Y7与Y8处理的乳酸菌数量无显著差异；各处理经过有氧暴露8天后，乳酸菌数量均显著降低(P<0.05)。青贮60天时，各处理的酵母菌数量均无显著差异；有氧暴露8天时，Y6处理的酵母菌数量为6.27 lg cfu·g-1，显著高于其它处理(P<0.05)，Y7和Y8处理的酵母菌数量无显著差异；当有氧暴露8天时，各处理酵母菌数量均显著升高(P<0.05)。青贮60天时，Y8处理的好气性细菌数量为4.29 lg cfu·g-1，显著低于其它处理(P<0.05)；有氧暴露8天时，Y6处理的好气性细菌数量为6.53 lg cfu·g-1，显著高于其它处理(P<0.05)；当有氧暴露8天时，各处理好气性细菌数量均显著升高(P<0.05)。青贮60天时，各处理均未检测到霉菌，有氧暴露8天时，Y6处理的霉菌数量为2.1 lg cfu·g-1，显著高于其它处理(P<0.05)，在有氧暴露期间，均未发现大肠杆菌。

表4 装填密度对青贮微生物数量的影响

苜蓿青贮60天时，M8处理的乳酸菌数量为6.50 lg cfu·g-1，显著高于其它处理(P<0.05)，M7处理的乳酸菌数量为6.26 lg cfu·g-1，显著低于其它处理(P<0.05)；有氧暴露8天时，M7处理的乳酸菌数量为4.69 lg cfu·g-1，显著高于其它处理(P<0.05)，M6处理的乳酸菌数量为4.56 lg cfu·g-1，显著低于其它处理(P<0.05)；当有氧暴露8天时，各处理的乳酸菌数量都显著降低(P<0.05)。青贮60天时，M7处理的酵母菌数量为4.49 lg cfu·g-1，显著高于M8处理(P<0.05)；有氧暴露8天时，M7处理的酵母菌数量为6.07 lg cfu·g-1，显著低于其它处理(P<0.05)；当有氧暴露8天时，各处理的酵母菌数量均显著升高(P<0.05)。青贮60天时，M7处理的好气性细菌数量为4.47 lg cfu·g-1，显著高于其它处理(P<0.05)；有氧暴露8天时，M8处理的好气性细菌数量为6.60 lg cfu·g-1，显著高于其它处理(P<0.05)；当有氧暴露8天时，各处理的好气性细菌数量均显著升高(P<0.05)。青贮60天时，各处理均未检测到霉菌，有氧暴露8天时，M6处理的霉菌数量为2.38 lg cfu·g-1，显著高于其它处理(P<0.05)，M7处理的霉菌数量为2.18 lg cfu·g-1，显著低于其它处理(P<0.05)，在有氧暴露期间，均未检测到大肠杆菌。

3 讨论

3.1 原料特性

在青贮过程中，原料中的乳酸菌数量和可溶性糖是影响其品质的重要因素。当原料中乳酸菌的数量超过105cfu·g-1，可溶性碳水化合物含量超过5% DM时青贮更容易成功[13]。本试验中羊草和苜蓿原料的可溶性碳水化合物含量分别为5.25%和4.10%DM，原料中的乳酸菌数量较低，好气性细菌和大肠杆菌数量较高，需要通过调节青贮密度来促进乳酸菌生长，保障青贮的效果。

3.2 装填密度对羊草和苜蓿青贮营养成分的影响

在青贮过程中，乳酸菌通过利用可溶性碳水化合物作为底物进行乳酸发酵，降低青贮饲料的pH值，抑制有害菌的生长，从而达到长期贮存的目的[14-15]。对不同装填密度羊草青贮和苜蓿青贮的营养成分分析可知，青贮60天时，M6处理的DM含量低于其它处理，Y8和M8处理的CP和WSC含量高于其它处理，低密度青贮的营养品质较差。这是由于在青贮前期，梭菌等好氧微生物与乳酸菌存在竞争关系，它们会利用糖类进行生长代谢，产生的蛋白酶能将原料中的氨基酸和粗蛋白质降解为含氮化合物。所以低密度青贮对好氧微生物的抑制效果较差，造成DM，CP和WSC含量下降[16]。Wilkinson和丁婉等人研究表明，高装填密度能通过挤压出饲料空隙中的氧气，来抑制植物细胞的呼吸作用和好氧微生物的活性，降低青贮饲料的营养损失[17-18]。同时，厌氧环境对乳酸菌生长有促进作用，使其加速发酵。让青贮饲料能更快达到稳定的状态，降低其对可溶性碳水化合物的消耗。Y6，M6的NDF含量较其它处理高，ADF含量无显著差别。这可能是由于低密度青贮下乳酸菌生长较为缓慢，纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶的含量很少，很难对植物细胞壁进行分解利用。在有氧暴露8天时，各处理的DM，CP和WSC含量均显著降低，其中Y8和M7处理的DM和WSC含量高于其它处理，NDF含量低于其它处理，说明高装填密度在有氧暴露期间能缓解营养成分的损失。这是由于高密度青贮的空隙较小，有氧暴露期氧气不容易渗入，能更好的抑制有机物的氧化过程和好氧菌的滋生[19-21]。M8处理在有氧暴露期间干物质含量显著下降，同时NDF和ADF含量显著上升，这可能与其有氧稳定性变差有关。

3.3 装填密度对羊草和苜蓿青贮发酵品质的影响

pH值是衡量青贮品质的一个重要指标，青贮60天时，Y8和M8处理的pH值低于其它处理，乳酸和乙酸含量高于其它处理。高密度青贮对乳酸菌的生长起到了促进作用，乳酸菌有同型发酵和异型发酵两种发酵方式，同型发酵的产物是乳酸，能迅速降低pH值从而保留营养物质；异型发酵的产物为乳酸、乙酸、乙醇和二氧化碳等，乙酸能抑制有害菌的增长并提高青贮饲料的有氧稳定性[22-23]。青贮60天时，各处理组中均未检测到丙酸和丁酸，发酵效果较好。M6处理的NH3-N含量显著高于其它处理，可能与发酵前期粗蛋白质降解程度有关，低密度青贮下粗蛋白质损失较多，产生了大量的氨态氮[24]。当有氧暴露8天时，不同处理的pH值均显著升高，而乳酸、乙酸的浓度显著降低。其中Y8和M7处理的pH低于其它处理，乳酸和乙酸含量高于其它处理，证明高装填密度在有氧暴露期间能减缓发酵品质的劣变，这是由于高密度青贮的乳酸含量较高，能更好的抑制腐败菌的生长。有氧暴露期间M8处理的pH值高于M7，这是由于青贮时过度挤压产生的汁液带走了大量的糖和酸类物质，其在接触氧气后发生挥发和氧化分解，导致酸度上升和品质下降[25]。有氧暴露期间各处理的BA和NH3-N含量均显著上升，它们会使青贮饲料品质变差并产生难闻的气味，严重影响家畜的采食量和适口性，造成饲草资源的浪费[26-27]。

3.4 装填密度对羊草和苜蓿青贮有氧稳定性的影响

青贮饲料在开袋后，好氧微生物以碳水化合物、蛋白质等养分为基质迅速生长繁殖，其代谢过程中释放出热量促使青贮饲料温度上升[28-29]。在本试验中，通过记录开袋后青贮饲料内部温度大于室温2℃所需时间，来比较各处理有氧稳定性的差异。对不同装填密度羊草青贮和苜蓿青贮的有氧稳定性分析可知，在有氧暴露期间，羊草青贮Y8处理的有氧稳定性最好，有氧稳定性最差的是Y6处理，随着羊草青贮装填密度增加青贮饲料有氧稳定性也有所提高。关于苜蓿青贮有氧稳定性，最好的是M7处理，最差的是M6处理，且M7处理的有氧稳定性高于M8处理，这是由于苜蓿原料含水量较高，太高密度的挤压会产生更多的组织液，在有氧暴露期间促进了有害菌的滋生，加速了青贮有氧败坏的过程。王旭哲等人[10]研究指出，适当的增加青贮压实度能提高有氧稳定性，但过高的压实度会降低有氧稳定性，与本研究结果一致。

3.5 装填密度对羊草和苜蓿青贮微生物数量的影响

微生物数量是青贮过程中和有氧暴露期间影响青贮饲料品质的重要因素。有研究表明原料上附着的有害菌群会在青贮初期与乳酸菌争夺底物，降低青贮发酵的效果[30]。当青贮饲料在有氧环境下，好氧微生物迅速生长，并消耗大量养分，并产生各种有害物质和难闻的气味，有氧败坏的饲料会降低家畜的采食量，并且一些有毒物质会随着家畜的生长代谢进入肉和奶中，对人类的健康造成威胁[31-32]。因此，需要特别关注在青贮饲料开袋后取用过程中饲料品质和微生物的变化，通过在制作青贮时进行适当的处理来提高其有氧稳定性。对不同装填密度羊草青贮和苜蓿青贮的微生物数量分析可知，青贮60天时，Y8和M8处理的乳酸菌数量高于其它处理，酵母菌和好气性细菌数量低于其它处理，说明高密度青贮能促进乳酸菌的生长，抑制酵母菌和好氧菌的数量，这与周天荣等人[6]的研究结果一致。青贮60天后，各处理均未检测出霉菌和大肠杆菌，表明青贮过程中没有受到污染，青贮发酵能有效抑制霉菌和大肠杆菌的活性。有氧暴露8天后，酵母菌、好氧菌和霉菌数量显著增加，相反各处理的乳酸菌数量显著减少。其中Y6和M6处理的乳酸菌数量最低，这是由于乳酸菌适宜在低pH值环境下生长且大多数为厌氧发酵菌，随着有氧暴露时间的延长，青贮产生的乳酸和乙酸等酸类物质逐渐减少，乳酸菌的活性受到抑制，数量开始下降[33]。有氧暴露8天时，低密度青贮的有害微生物增长较为严重，Y6和M6处理的酵母菌、好气性细菌和霉菌数量显著高于其它处理，它们是造成青贮有氧变质的主要微生物，会降解营养物质产生难闻的气味和有毒物质。Wang等人[34]研究表明乳酸利用型酵母菌在有氧暴露期间能将乳酸作为底物，分解成醇类和二氧化碳，降低青贮饲料的pH值。青贮饲料有氧变质过程中霉菌产生的真菌毒素会损伤家畜的肝脏和免疫系统。同时也会随着食物链的传递和累积，严重影响人类的食品安全[35]。

4 结论

本文通过研究装填密度对羊草青贮和紫花苜蓿青贮品质、有氧稳定性和微生物数量的影响，得以下结论：羊草青贮在800 kg·m-3装填密度下的pH值最低，粗蛋白质、可溶性碳水化合物含量最高，乳酸菌数量最多，青贮品质最好；苜蓿青贮在800 kg·m-3装填密度下的pH值最低，粗蛋白质、可溶性碳水化合物、乳酸和乙酸的含量最高，乳酸菌数量最多，青贮品质最好。羊草青贮在800 kg·m-3装填密度下有氧稳定性最好，苜蓿青贮在700 kg·m-3装填密度下有氧稳定性最好。有氧暴露后各处理的乳酸菌数量显著下降，酵母菌和好气性细菌数量显著上升，苜蓿青贮中有霉菌产生。