APP下载

二虎护肝方对四氯化碳肝损伤小鼠的保肝作用*

2023-01-15邓棋卫包奇昌

中国中医药现代远程教育 2023年1期
关键词:四氯化碳保肝虎杖

陈 文 邓棋卫 包奇昌 王 英 徐 云

(江西中医药高等专科学校药学系,江西 抚州 344000)

二虎护肝方系本课题组负责人治疗肝炎的临床经验方,该方由虎刺、虎杖、黄芪、白芍、蒲公英、茵陈、女贞子、茯苓、甘草等药物组成,方中以虎刺和虎杖为主药。该方经临床实践证明对急、慢性肝炎均有较好疗效。本课题旨在通过实验研究验证评价该方的保肝作用。为其进一步开发应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物 昆明种小鼠60 只,体质量(20± 2)g,雌雄各半。由江西中医药高等专科学校实验动物部提供。

1.2 受试药物 二虎护肝方由虎刺10 g,虎杖10 g,黄芪10 g,党参10 g,白芍10 g,茯苓10 g,蒲公英10 g,茵陈10 g,甘草3 g 组成。方药以汤剂形式应用,用煎煮法煎取汤液,浓缩成1 g/mL(按生药计)浓度的药液,冰箱保存备用。临用时以生理盐水稀释后灌胃给药。对照药:联苯双酯滴丸(浙江医药股份有限公司新昌制药厂生产,国药准字H33020232)。

1.3 试剂 丙氨酸氨基转移酶(ALT)试剂盒、天冬氨酸氨基转移酶(AST)试剂盒、超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、丙二醛(MDA)试剂盒、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽(GSH)试剂盒均购于南京建成生物工程研究所;四氯化碳:天津市恒兴化学试剂制造公司。

1.4 实验方法 小鼠适应性饲养1 周后,随机分成正常对照组、模型组、二虎护肝方高剂量组、二虎护肝方中剂量组、二虎护肝方低剂量组、联苯双酯组,每组10 只。除正常对照组外,其余各组小鼠灌胃0.2%四氯化碳橄榄油溶液,灌胃剂量为0.1 mL/10 g 鼠体质量。于造模后24 h、48 h、71 h,二虎护肝方高、中、低剂量组分别给予二虎护肝方煎剂8.0 g/kg、4.0 g/kg、2.0 g/kg(按生药计)灌胃;联苯双酯组给予联苯双酯滴丸4 mg/kg 灌胃;正常对照组和模型组灌胃等体积生理盐水,共3 次。72 h 后,全部动物眼眶取血,4000 r/min 离心10 min(离心半径12.7 cm),分离血清,测定ALT、AST。称取肝脏组织0.4 g,加冷生理盐水9 倍,匀浆,离心后去上清液,按试剂盒说明书测定SOD、MDA、CAT、GSH。

2 结果

2.1 各组小鼠血清ALT、AST 含量的测定结果 与正常对照组比较,模型组小鼠血清ALT、AST 均明显升高,说明四氯化碳造成了小鼠的肝损伤。与模型组比较,二虎护肝方各剂量组对四氯化碳造成的肝损伤小鼠ALT、AST升高均有显著的降低作用(P<0.01),说明二虎护肝方对四氯化碳造成的小鼠肝损伤有保护作用。见表1。

表1 各组小鼠血清ALT、AST 含量的比较(,U/L)

表1 各组小鼠血清ALT、AST 含量的比较(,U/L)

注:与正常对照组比较,1)P<0.01;与模型组比较,2)P<0.01。

2.2 各组小鼠肝组织MDA、SOD 含量的测定结果 与正常对照组比较,模型组小鼠肝组织MDA明显升高、SOD明显下降。与模型组比较。二虎护肝方各剂量组均可显著降低四氯化碳致肝损伤小鼠肝组织MDA水平(P<0.01),升高肝组织SOD水平(P<0.01)。见表2。

表2 各组小鼠肝组织MDA、SOD 含量的比较()

表2 各组小鼠肝组织MDA、SOD 含量的比较()

注:与正常对照组比较,1)P<0.01;与模型组比较,2)P<0.01。

2.3 各组小鼠肝组织CAT、GSH 含量的测定结果 与正常对照组比较,模型组小鼠肝组织CAT、GSH均明显下降。与模型组比较,二虎护肝方各剂量组均可显著升高四氯化碳致肝损伤小鼠肝组织CAT水平(P<0.01)和GSH水平(P<0.01)。见表3。

表3 各组小鼠肝组织CAT、GSH 含量的比较()

表3 各组小鼠肝组织CAT、GSH 含量的比较()

注:与正常对照组比较,1)P<0.01;与模型组比较,2)P<0.01。

3 讨论

二虎护肝方由虎刺、虎杖、黄芪、党参、白芍、茯苓、蒲公英、茵陈、甘草等药组成。方中以虎刺、虎杖为主药,是治疗肝炎起主要作用的药物。配以清热利湿退黄的茵陈蒿、蒲公英;益气健脾扶正的黄芪、党参;解毒保肝的甘草、白芍等药,对肝炎起到较好的综合性治疗作用。

虎杖具有利胆退黄、清热解毒、散癖止痛、止咳化痰之功效。现代研究[1,2]显示,虎杖中主要含有蒽醌类、黄酮类、茂类、酚类以及一些单糖类的化合物,有多种药理作用,包括抗炎、抗病毒、抗菌、调血脂、抗血栓、改变血流变、扩张血管、保护心肌、抗氧化、抗肿瘤等[3,4]。虎杖临床广泛用于治疗急、慢性肝炎。研究[4]证实,虎杖对乙肝病毒有一定抑制作用,所以对对乙型肝炎及乙肝病毒携带者,临床医师也都多用虎杖,可用于治疗急性黄疸肝炎和慢性肝炎。虎杖提取物及活性成分能通过抑制炎症因子、炎症相关基因表达、信号通路转导等途径实现抗炎作用。广泛的临床研究[5]也证实虎杖具有抗炎作用,可用于肝炎、关节炎或急性肺损伤等炎性疾病。

虎刺又名绣花针、小黄连,分布于长江流域及以南地区,中医主要用于治疗肝炎、风湿痹痛、黄疸、水肿等病证[6,7],虎刺为江西民间治疗急、慢性肝炎的常用草药。急性肝炎可用虎刺1 两,配合茵陈蒿1 两、车前草1 两,水煎服。慢性肝炎可用虎刺根水煎浓缩成浸膏,酌量内服,对肝功能的恢复有很好效果[8],该药化学成分中报道较多的是以大黄素为代表的蒽醌类化合物。有研究[9]表明,虎刺的水提取部位具有良好的保肝作用,同时发现,75%乙醇提取物、乙酸乙酯部位和剩余水部位的保肝活性与所含的总蒽醌呈正相关。

四氯化碳引起肝损伤模型是肝损伤的经典模型。其特点是能准确反映肝细胞的功能、代谢及形态学变化,重复性好[10,11]。四氯化碳在肝氧化代谢中可产生三氯甲基自由基,继而攻击脂质细胞膜,造成肝细胞脂质过氧化性损伤[10]。ALT是存在于肝细胞浆内的可溶性酶,肝细胞损伤后被释放入血,血清ALT是反映肝损伤的灵敏指标[12],其水平高低可以反映肝细胞损伤程度。脂质过氧化物及其代谢产物MDA可以破坏细胞膜结构,其含量可反映机体过氧化损伤程度和细胞受损程度[13]。SOD、GSH、CAT均参与机体的抗氧化过程。本实验结果显示,二虎护肝方对四氯化碳肝损伤模型小鼠的ALT升高有明显的降低作用,并能降低小鼠肝组织MDA水平,提高SOD、GSH、CAT水平。表明二虎护肝方具有明显的保肝作用,其机制与抗脂质过氧化性损伤有关。

猜你喜欢

四氯化碳保肝虎杖
El regreso triunfal del alforfón
治淋浊试试虎杖
IAA、温水、超声波处理对虎杖种子发芽率影响的研究
虎杖苷对类风湿关节炎大鼠的治疗机制探究
肝清宁合剂对四氯化碳致肝硬化大鼠的影响
金线风总黄酮对四氯化碳致急性肝损伤小鼠的保护作用及机制研究
过墙风总黄酮对四氯化碳致急性肝损伤小鼠的保护作用及机制研究
保肝合剂对急性免疫性肝损伤小鼠的保护作用
保肝药物体内活性筛选方法的建立
高含量DHA/EPA甘油三酯的降血脂和保肝作用的研究