葛莉萍 葛春梅 杨 丽 王俊平

周口妇产医院妇产科，河南省周口市 466000

习惯性流产(RSA)是一种临床常见妇产科疾病，是指女性在同一伴侣情况下连续3次胎儿丢失。RSA发病原因极为复杂，近50%的患者发病原因不明确，临床称其为不明原因习惯性流产(URSA)[1]。目前尚无治疗URSA的明确方案。孕康口服液具有调节机体免疫力、缓解子宫收缩等作用，是一种临床常用安胎药物[2]。淋巴细胞主动免疫疗法(LIT)是将女性健康配偶或第三方新鲜淋巴细胞注入URSA患者皮内或皮下以达到调节机体免疫功能的新型免疫疗法，其在URSA患者治疗中发挥了重要作用[3]。但目前关于不同LIT治疗次数对URSA患者预后的影响临床仍缺乏大量循证依据。基于此，本文以我院68例URSA患者为观察对象，探讨孕康口服液联合不同LIT治疗次数对患者预后的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 将2018年1月—2020年1月在我院行孕康口服液联合LIT治疗的68例URSA患者纳入本次研究，根据患者LIT治疗次数不同将其分为对照组和观察组。对照组35例，年龄24～33岁，平均年龄(28.25±4.06)岁；流产次数3～5次，平均流产次数(3.98±0.42)次；体质量42～68kg，平均体质量(53.05±5.75)kg；月经周期27～33d，平均月经周期(29.37±3.14)d。观察组33例，年龄23～34岁，平均年龄(28.31±4.10)岁；流产次数3～5次，平均流产次数(3.88±0.37)次；体质量41～70kg，平均体质量(53.12±5.68)kg；月经周期26～33d，平均月经周期(29.29±3.22)d。两组基本资料无显著差异(P>0.05)。本研究已获得院伦理委员会批准。

1.2 选择标准 (1)纳入标准：①符合《复发性流产诊治的专家共识》[4]中的相关诊断标准，流产次数≥3次；②年龄20～35岁；③治疗前封闭抗体(BA)检测阴性，且LIT治疗2次后BA检测仍为阴性；④支原体、衣原体、TORCH病毒检查阴性；⑤无自身免疫性疾病；⑥配偶精液常规检查正常；⑦签署知情同意书。(2)排除标准：①其他明确原因导致的流产；②染色体异常；③夫妻任一人伴有传染性、感染性疾病；④RH阴性；⑤凝血功能、内分泌功能异常；⑥伴有生殖系统异常；⑦恶性肿瘤；⑧精神障碍。

1.3 方法 两组均接受孕康口服液联合LIT治疗。LIT治疗：抽取配偶静脉血30ml，离心获取淋巴细胞后使用生理盐水稀释成浓度为(20～50)×106/ml的悬液1ml，于孕妇前臂外侧行皮内注射，注射后观察局部反应，若出现红肿、水泡给予针对性处理。每3周治疗1次，治疗2次后复查BA。接受2次LIT治疗后BA仍为阴性且拒绝继续LIT治疗，并备孕者为对照组，其余继续治疗的为观察组，观察组再接受LIT治疗2次，无论BA是否转阳均备孕。受孕后给予两组孕康口服液(江西九华药业有限公司，国药准字Z10920062)保胎，20ml/次，3次/d，早、中、晚空腹口服，共用药2周。

1.4 观察指标 (1)妊娠成功率：记录两组未妊娠、流产、早产和足月产情况，统计两组妊娠成功率(足月产和早产胎儿存活)。(2)免疫功能：取两组患者治疗前后空腹静脉血，使用免疫荧光法检测 CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平。(3)细胞因子：取两组治疗前后空腹静脉血，使用酶联免疫法检查转化生长因子-β1(TGF-β1)、孕激素诱导阻断因子(PIBF)水平。(4)统计两组不良反应发生率。

2 结果

2.1 两组妊娠成功率比较 观察组妊娠成功率为84.85%，显著高于对照组的51.43%(χ2=8.668，P=0.003<0.05)，见表1。

表1 两组妊娠成功率比较[n(%)]

2.2 两组治疗前后免疫功能比较 治疗后，两组CD4+、CD4+/CD8+水平均较治疗前上升，而CD8+水平较治疗前下降，且观察组优于对照组(P<0.05)，见表2。

表2 两组治疗前后免疫功能比较

2.3 两组治疗前后细胞因子水平比较 治疗后，两组TGF-β1、PIBF水平均较治疗前上升，且观察组高于对照组(P<0.05)，见表3。

表3 两组治疗前后细胞因子水平比较

2.4 两组不良反应发生情况比较 对照组1例患者出现注射部位红肿，发生率为2.86%(1/35)；观察组2例患者出现注射部位红肿，发生率为6.06%(2/33)；两组不良反应发生率无统计学差异(χ2=0.413，P=0.520>0.05)。

3 讨论

随着外界环境、生活饮食习惯以及生育规律的改变，近年来我国女性URSA发病率在不断提高，URSA不仅会给女性和家庭带来极大的心理压力，且流产反复发作还会损伤子宫内膜、破坏宫腔环境，从而进一步增大胚胎着床难度，最终导致女性不孕发生。既往临床治疗URSA主要以孕后保胎治疗为主。孕康口服液是一种保胎中成药物，常用于肾虚型及气血虚弱证型的先兆流产及RSA患者，其具有健脾固本、养血安胎之功效，含有黄芪、山药、续断、当归等药物是传统中医安胎的常用药物，而现代药理学研究显示孕康口服液可降低子宫收缩能力，还可调节性腺轴内分泌，改善子宫内环境，进而促进胚胎着床和胎儿发育[5]。

目前，临床对于URSA的研究和认识不断加深，越来越多临床证据显示免疫失调与URSA的发生存在密切联系，怀孕后，孕妇免疫系统会对胚胎内存在的抗原进行识别，并通过BA分泌起到抑制淋巴细胞作用，进而避免孕妇免疫系统攻击胎儿，而URSA患者多存在不同程度的BA缺乏和T淋巴细胞比例失衡，紊乱的免疫功能会对胚胎进行攻击，最终导致反复流产发生[6]。LIT治疗现已成为临床治疗URSA的重要手段，其通过将配偶或健康志愿者的淋巴细胞注入女性体内以激活其免疫系统，“预演”胚胎半异体移植过程，增加BA阳性率，建立母—胎免疫平衡，从而避免妊娠后孕妇免疫系统异常攻击胚胎，保证妊娠持续进行[7]。梁仲珍等[8]的一项Meta研究亦证实LIT治疗可有效提高URSA患者BA阳性率、妊娠率及活产率，但目前尚不完全明确LIT治疗次数对URSA患者的影响。

在既往研究中，BA转阳是临床中止LIT治疗、患者进行备孕的常用标准，但亦有研究显示BA是否转阳与URSA患者妊娠情况并无显著相关性，且LIT治疗次数较多会进一步加重患者免疫功能紊乱情况，从而影响受孕和妊娠[9]。本文以接受2次LIT治疗后BA仍未转阳患者为观察对象，探讨是否继续接受LIT治疗对URSA患者的影响。结果显示继续接受LIT治疗的观察组妊娠成功率及CD4+、CD4+/CD8+水平较对照组高，而CD8+水平较对照组低(P<0.05)，这表明在一定次数范围内，增加LIT治疗可进一步改善URSA患者免疫功能，对改善妊娠结局有积极作用。分析原因：这可能是因为在一定时间内多次免疫刺激才可有效调节患者T淋巴细胞平衡，并产生足够的BA，最终达到改善妊娠结局的目的。本文结果显示增加LIT治疗次数还可调节机体TGF-β1、PIBF合成及分泌，TGF-β1是一种免疫抑制因子，其可通过抑制淋巴细胞增殖减轻免疫排斥反应，从而发挥抗流产作用；而PIBF是一种孕激素调节剂，其不仅能反映女性孕酮水平，还可调节母体免疫微环境，保证胎儿免疫系统形成和妊娠持续[10]。而观察组治疗后TGF-β1、PIBF水平上升，则表明增加LIT治疗次数能有效改善URSA患者母胎免疫环境，从而提高临床治疗效果。本文中两组患者不良反应均以注射部位红肿为主，红肿未经治疗自行缓解，且两组不良反应发生率无显著差异，表明增加治疗次数并不会增大治疗风险。

综上所述，增加LIT治疗次数联合口服孕康口服液可有效调节URSA患者免疫功能和TGF-β1、PIBF表达，能有效改善患者妊娠结局，可资临床借鉴。