李 港 刘博文 王子晗 王彦彦 高崇玉

（新乡医学院三全学院，河南新乡 453000）

植物内生菌是指整个生命活动都在宿主各细胞间隙、组织和器官内，而不会对宿主产生严重危害和引起宿主产生排斥反应的微生物[1-2]。内生菌种类多样、分布广泛，主要概括为内生真菌、内生细菌和内生放线菌三个大的种类，其与宿主之间存在着和谐联合的关系[3]。由于内生菌寄生于宿主中，随着生物的进化发展，内生菌不仅获得了与宿主产生相同或相似产物的能力，还具有产生宿主所不能产生的物质的能力。植物内生菌因与宿主间存在共生关系，其次级代谢产物可影响宿主植物的物质代谢、能量代谢，提高宿主植物对生物（寄生虫、害虫和动物等）或非生物（温度、pH值、盐、碱、重金属、紫外线、水分和海拔等）胁迫的耐受性[4-5]，有效保障宿主植物良好的生长发育。由于内生菌的代谢产物非常丰富，具有很高的临床研究价值，已成为医学界科研人员探索的宝库之一。

1 内生菌的分离与纯化

1.1 传统的分离与纯化

1.1.1 内生真菌的分离与纯化。内生真菌分离与纯化基本上是先用乙醇与次氯酸对植物表面消毒，然后剪成小份放入PDA培养基中培养分离。例如，赵作威等[6]提取白花蛇舌草内生真菌时，依次用75%乙醇浸泡30 s、3% NaClO溶液浸泡60 s、75%乙醇浸泡30 s对白花蛇舌草进行表面消毒，然后将白花蛇舌草各部分剪成小块放入PDA培养基上培养，当观察到培养基上有真菌长出时，及时接种到新的PDA培养基上进行纯化培养。……