刘新亚，刘英敏，范志勤，曾 敏

(1新疆医科大学附属肿瘤医院肿瘤心脏病科，2日间手术病房，3胸腹放射治疗科病区，乌鲁木齐 830011)

食管癌是常见的上消化道恶性肿瘤之一，发病率位居我国恶性肿瘤发病的第五位，死亡率位居第四位[1-2]。食管鳞癌(Esophageal squamous cell carcinoma，ESCC)占我国食管癌患者总发病数的90%以上，因患者早期症状不明显，70%的患者就诊时已发生局部浸润或远处转移[3]，5年生存率<20%[4]。因此提高食管鳞癌早期诊断的准确性，寻找有效生物学指标具有重要的临床意义。缺氧是许多实体肿瘤的共同特征，当肿瘤体积超过1 mm3时，会导致实体肿瘤发生缺氧[5]。缺氧诱导因子-1(Hypoxia inducible factor-1，HIF-1)是介导缺氧反应的最重要的核转录因子，由α和β亚单位组成的异二聚体蛋白[6]。在缺氧条件下，HIF-1α因羟化作用而稳定，并转移到细胞核并发挥转录活性[7]，激活下游信号进而参与到肿瘤细胞的浸润或者扩散等过程。血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)是血管生成的关键调节因子，在许多不同类型的肿瘤中均可发现该因子表达异常[8]。Zhu等[9]研究发现，在缺氧环境下HIF-1可直接与VEGF启动子区的缺氧反应元件相结合，通过激活HIF-1 /VEGF信号通路直接驱动血管生成，参与恶性肿瘤的侵袭和转移。HIF-1和VEGF的高表达可预示肿瘤的预后不良[10]，但两者在食管鳞癌中的相关研究较少。本研究通过检测食管鳞癌中HIF-1α mRNA和VEGF mRNA的表达水平，分析两者表达与患者临床病理特征的关系，探讨HIF-1α和VEGF在食管鳞癌发生、发展中的作用，为临床诊断治疗提供理论基础。

1 资料与方法

1.1一般资料收集2019年9月-2019年12月就诊于新疆医科大学附属肿瘤医院胸外科食管癌患者手术切除的癌组织标本40例，同时取距癌组织边缘>5 cm处的正常组织标本作为癌旁组织。所有组织标本于离体30 min内取材，经生理盐水清洗后迅速放置液氮速冻，存放于-80℃冰箱中待检。所有组织标本病理明确诊断为食管鳞状细胞癌。40例食管鳞癌患者中，男性31例，女性9例，年龄45～71岁，平均年龄58.73±6.85岁。按照美国癌症联合会于2017年修订的肿瘤TNM(Tumor node metastasis classification)分期标准进行肿瘤临床分期[11]：Ⅱ期7例，Ⅲ期33例；肿瘤分化程度：中分化24例、低分化16例；淋巴结转移患者29例，无淋巴结转移患者11例。本研究通过新疆医科大学附属肿瘤医院伦理委员会批准(伦理编号：K-2019053)，标本采集前患者均知情同意并签署知情同意书。

1.2纳入与排除标准[12]纳入标准：(1)临床、病理资料详细；(2)经病理诊断首次确诊为食管鳞癌；(3)均接受根治手术治疗；(4)术后标本切缘距肿瘤>5 cm；(5)患者签署知情同意书。 排除标准：(1)手术前接受过放、化疗治疗或靶向治疗；(2)转移性食管鳞癌患者；(3)合并其他恶性肿瘤。

1.3试剂与仪器Trizol试剂(美国Aambion公司,15596026)，逆转录试剂盒(美国ABM公司，G492)，PCR反应试剂(美国MasterMix-EL公司，2423583)。实时……