杜 然，王 湘，李希平，崔应东，曾 光

糖尿病肾病是糖尿病患者常见并发症之一，主要表现为肾小管上皮细胞损伤，最终导致肾脏纤维化和肾功能下降[1]。近年糖尿病肾病已成为重要的公共卫生问题，严重影响患者的生存质量[2]。肾小管上皮细胞活力下降和凋亡增加是糖尿病肾小管上皮细胞损伤的关键因素[3]。糖尿病影响肾小管上皮细胞活力和凋亡的确切分子机制并不清楚。长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度普遍>200个核苷酸的单链非编码RNA，调控各种底物基因的转录和翻译，参与调控泌尿系统的发育和病理改变[4]。已有研究证实，高糖能够诱导肾小管上皮细胞中lncRNA表达下调或上调，调控lncRNA的表达可有效抑制肾小管上皮细胞的损伤[5-7]。TMEM161B-AS1是一种lncRNA，其基因定位于人染色体5q14.3，长度为409个核苷酸，作为癌基因或抑癌基因参与多种肿瘤的发生发展过程。然而，目前并不清楚TMEM161B-AS1在糖尿病肾小管上皮细胞损伤中的作用。本文探究TMEM161B-AS1在高糖诱导肾小管上皮细胞增殖和凋亡中发挥的作用，并明确其确切分子机制，为探究新的糖尿病肾病防治靶点提供实验基础。

1 材料与方法

1.1细胞与试剂 人肾小管上皮细胞HK-2购于中国科学院细胞库；DMEM培养基、胎牛血清、Lipofectamine 3000试剂盒购于中国赛默飞科技有限公司；细胞凋亡检测试剂盒、qRT-PCR试剂盒购于北京索莱宝科技有限公司；双荧光素酶检测试剂盒、TMEM161B-AS1过表达载体、阴性对照载体购于美国Promega公司；hsa-miR-135b、has-miR-NC、野生型TMEM161B-AS1 WT和突变型TMEM161B-AS1 Mut质粒购于苏州泓迅生物科技有限公司；α……