草莓脱毒方法研究进展

2022-11-25于文华孟祥坤德克西勒李新柱

农业工程技术 2022年26期

于文华，何川，孟祥坤，于新，德克·西勒，宋国，李新柱

（1.金正大生态工程集团股份有限公司，山东临沂 276700；2.养分资源高效开发与综合利用国家重点实验室，山东临沂 276700；3.山东省水肥一体化工程技术研究中心，山东临沂 276700）

草莓种苗繁殖主要为匍匐茎进行无性繁殖，多年无性繁殖造成病毒在草莓体内积累，致使草莓品质日益退化，产量越来越低。据调查，种苗露地常规繁殖，病毒感染率以每年20%～30%的速度递增，造成产量降低20%～50%。利用草莓茎尖脱毒结合组织培养快繁技术培育草莓组培苗，可部分或全部脱除病毒，使品种的优良性状得以保持，产量提高。培育和应用脱毒组培苗己成为改善草毒品质、提高草莓产量的有效途径[1]。

一、茎尖培养

罗静静等[2]，以“妙香7 号”草莓茎尖为材料进行组织培养，得出组培苗的繁殖系数比自繁苗的田间繁殖系数提高了58.5%，亩产量增加了24.49%，草莓果实的可溶性糖含量提高了22.7%，可滴定酸含量稍徽下降，Vc 含量提高了16.76%，大大提高了草莓的产量和品质。王玮玮等[3]采用“红颜”草莓茎尖进行组培，发现在培养基中加入1 g/L 活性炭可以有效抑制褐变，并且在瓶苗期促进幼苗生长增值。王峰[4]研究比较草莓茎尖得到的脱毒苗与常规苗的生长状况，发现脱毒苗植株相对较健壮，病虫害发生减少，草莓产量和品质也得到大大提高。赵海红[5]以草莓匍匐茎茎尖为材料进行脱毒苗组织培养，得出培养基中加入6-BA2.0 mg/L 和GA31.0 mg/L 时，可以有效促进草莓脱毒苗的快速繁殖。

二、花粉培养

龙照春等[6]分别以草莓茎尖、花药、幼叶等为材料进行脱毒技术研究，得出采用草莓花药进行组织培养，脱毒率可以达到100%。其培养基为，愈伤组织诱导：LS+BA2 mg/L+NAA0.5 mg/L，诱导率可达92.8%；不定芽诱导：LS+BA 2 mg/L+NAA0.3 mg/L，分化率10%；生根培养：MS+BA0.2 mg/L，生根率100%。采用茎尖脱毒，当茎尖小于0.5 mm 时，脱毒率可以达到20%。

晁慧娟等[7]以“甜查理”草莓花药为材料，进行72 h 低温处理后，其愈伤组织出愈率达到70.9%，不定芽分化率达到38%。肖君泽等[8]以“章姬”草莓花药为材料进行组织培养，取材为单核期花粉，此时花药呈淡黄色，直径约为1 mm，花蕾直径4 mm 左右，花瓣尚未开裂，此为培养愈伤组织和不定芽的较佳时期。其诱导愈伤组织形成和分化不定芽的较佳培养基均为MS+6-BA2.0 mg/L，较佳增殖培养基为MS+6-BA1.5 mg/L。

王敬东等[9]在草莓花药培养的培养基中添加了TDZ，得出较佳培养基为MS+TDZ1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L，草莓愈伤组织分化率高达75%。程海洋等[10]将桃熏草莓的花苞进行灭菌，然后从花苞中剥离出花药进行组织培养，诱导愈伤组织的诱导率可达到90%以上，并且愈伤组织可以长期保存。

三、根尖脱毒

钱长根等[11]以草莓根尖作为材料，研究其脱毒苗的组培条件。首先将草莓进行一段时间的热处理，然后切取0.2 mm 根尖进行组培，得出较适宜诱导培养基为MS+NH4NO3400 mg/L+KNO3500 mg/L+KH2PO450 mg/L+6-BA0.3～0.5 mg/L+2.4-D0.1～0.3 mg/L+水解乳蛋白1 g/L。增殖培养较适培养基为MS+NH4NO3400 mg/L+KNO3500 mg/L+KH2PO450 mg/L+6-BA0.2～0.5 mg/L+NAA0.1～0.3 mg/L+水解乳蛋白1 g/L。继代培养的较适培养基为MS+NH4NO3400 mg/L+KNO3500 mg/L+KH2PO450 mg/L+6-BA0.1～0.3 mg/L+水解乳蛋白1 g/L。生根培养的较适培养基为MS+NH4NO3400 mg/L+KNO3500 mg/L+KH2PO450 mg/L+NAA 0.1～0.5 mg/L+水解乳蛋白1 g/L。

四、热处理

李志强等[12]先将草莓苗进行热处理，然后再对茎尖进行组织培养，得出以1/2MS+IBA0.1 mg/L 为生根培养基，生根率达到100%，珍珠岩与蛭石比例为1：1 作为基质进行移栽，成活率达到95%以上。顾地周等[13]将草莓苗进行高温处理，然后进行茎尖组织培养，匍匐茎诱导率达到99.5%，再生苗脱毒率达到100%。赵霞等[14]将通过草莓茎尖进行组织培养，得到草莓组培苗，然后将组培瓶放到38℃条件下进行热处理，培养46 天脱毒效果较佳。刘健[15]将草莓茎尖放到35～50℃之间进行处理，发现在40℃条件下脱毒效果较佳，并且成活率较高。

五、超低温脱毒

近年来有科学家发现，利用传统方法对草莓轻型黄边病毒进行脱毒效果不佳，但经过超低温处理后，脱毒率可达到95%。窦炎丹[16]将草莓茎尖接种到培养基上，先在4℃条件下进行培养，然后经过冷冻保护脱水剂处理，再进行液氮速冻，最后在40℃水浴锅中进行复苏，发现经过超低温处理后，既可以提高草莓苗脱毒率，也可以提高成活率。陈曦等[17]将草莓茎尖经过超低温冷冻处理后，发现脱毒率可以达到100%。邱静[18]以红颜草莓茎尖为材料进行超低温脱毒处理，发现经过处理后的草莓苗的4 种主要病毒（镶脉病毒、轻型黄边病毒、皱缩病毒和斑驳病毒）脱毒率可以达到100%。