王玲玲

（辽宁省农业发展服务中心 110032）

1 乳尿素氮的产生机制

奶牛日粮主要营养成分是蛋白和能量两个方面。在瘤胃中微生物在细菌、原虫和真菌的作用下将蛋白质水解为肽与氨基酸，部分氨基酸会在脱氨基作用下降解为有机酸、氨、二氧化碳，氨可被瘤胃微生物利用合成蛋白质。当日粮蛋白质含量过高，降解速度过快而能量供应不足时，多余的氨会被瘤胃壁吸收进入血液并循环到肝脏形成尿素；瘤胃中过量的氨基酸也转化为尿素。所生成的尿素一小部分通过血液和唾液进入瘤胃继续参与瘤胃内氮代谢，大部分经过尿液排出。可见，尿素是肝脏把体内有毒的氨转变为无毒形式的一种小分子物质，是体内蛋白质的代谢最终产物。进入血液的血液尿素氮在泌乳过程中会通过乳腺上皮细胞扩散进入乳中成为MUN。其具有取样方便、代表性好、奶牛无应激反应、测定结果稳定等优点被作为必检指标之一[2]。

2 影响乳尿素值的主要因素

2.1 营养水平

日粮中蛋白质与蛋白质降解率对MUN 浓度的影响是极显著的，翟少伟对不同日粮处理组进行统计分析表明，蛋白水平1%的变化对MUN 测定值和氮的利用率都有显著的影响；奶牛蛋白质摄入量也是引起测定值变化的主要因素，当日粮蛋白水平的差异不到1.0%时即可对测定值产生显著影响，与黄文明等的研究日粮中粗蛋白与MUN 之间的相关指数最高的结果一致，当日粮粗蛋白每增加1%，MUN 测定值升高1.32mg/dL，同时降低了氮的利用率。

日粮蛋白质降解率对MUN 浓度的影响报道有所偏差，主要是由于日粮蛋白降解率的差异程度和日粮蛋白总摄入量对不同蛋白组分的掩盖作用。目前大多数学者研究结果表明日粮中蛋白质降解率的变化对MUN 值影响不显著。但是黄文明等研究表明，过瘤胃蛋白含量对MUN 值有极显著影响，翟少伟研究表明奶牛日粮的RDP 水平比RUP 水平更容易提高尿素氮的浓度[3]。

日粮能量不足也会导致MUN 浓度升高，能量不足时，鸟氨酸循环会加剧能量的需要，奶牛便动用机体组织供能分解蛋白质再进入肝脏代谢转化为尿素，MUN 浓度也会随着增高。如果日粮中的能量满足微生物生长需要，即使提高能量水平也不会降低MUN 浓度。当日粮中缺少非结构性碳水化合物时，瘤胃中的氨浓度会升高而无法被微生物利用会导致MUN 浓度升高。因此，MUN 浓度高并不一定代表蛋白质过量。 一些学者研究认为能量对MUN 没有显著影响。目前研究中日粮营养素对奶牛MUN 的浓度影响存在差异可能与试验研究中研究方法、日粮结构，群体管理及品种有一定关系，还待进一步研究。

2.2 采样时间和取样方法

MUN 值的准确性还受取样方法和采样时间的影响，目前我国取样方法主要有手工和流量计取样两种方法，对MUN 浓度存在极显著差异。手工取样仅收集某时间点的奶样，而流量计是整个挤奶过程中的奶样，因此流量计取样更具代表性。在一天早中晚三次取样中浓度差异极其显著，早晨的浓度极显著高于中午和晚上，晚上略高于中午；挤奶前期的浓度显著高于后期，随着挤奶时间的延长浓度也在下降。喂料和挤奶的间隔时间也是影响其浓度的主要因素，当奶牛在进食4～6h 内浓度最高，饲喂前2h 比后2h 略高[4]。在特定条件下，MUN 浓度的变化还会与产奶量呈正比关系。

2.3 防腐剂和保存条件

在奶样测定中会加入防腐剂保持成分稳定性，研究显示，在奶样中加入0.003g 的重铬酸钾时MUN 值会略高于不加重铬酸钾的奶样，略低于加入双倍量重铬酸钾的奶样，但是差异不显著。如果奶样中加入0.005g 的苯钾酸钠测定值略高于不加苯钾酸钠的奶样，显著高于加入双倍量的奶样，这与添加山梨酸钾的研究结果一致。因此，在MUN 测定时应选0.003g 的重铬酸钾做为防腐剂，在添入重铬酸钾后保存温度对测定值也会产生影响，常温保存时，浓度会逐渐下降，第6d 后会降到时最低水平，到第8d 时浓度会降了58%；4℃保存时，浓度在4～10d 变化辐度较大；刘琴等究发现，常温时浓度会忽高忽低，差异不显著；冷藏条件下，测定值有显著差异[5]。郭同军等研究表明，加防腐剂保存的奶样中测定值与不加入防腐剂奶样中测定值差异极显著[6]，与冷冻保存的奶样中测定值差异不显著，冷冻保存的测定值与鲜奶样差异极显著。重铬酸钾或冷冻保存时可能会抑制了产生脲酶的一些微生物的生长，才可保持乳尿素浓度不变。一般鲜奶样中尿素氮值会在2d 后急剧下降，可能是因为产生脲酶的细菌和真菌大量繁殖所致，因此，无论是常温还是冷藏条件下保存指标均不稳定，都应在采样后的2d内完成测定，避免出现检测偏差。

2.4 检测仪器

不同检测方法和实验室之间的MUN 检测值都存在差异。目前，国内外用于快速检测尿素氮的仪器主要有CL-10、Skalar、本特利、 福斯4000 和6000。在同一实验室，对五种仪器测定结果进行分析，本特利和福斯6000 的检测结果无明显差异，福斯4000 不适用于MUN 的检测；有研究表明福斯4000的准确性和重复性优于CL-10 法。但是在不同实验室之间福斯6000 检测值有高有低，本特利检测值的重现性最好。不同实验室之间检测值研究显，CL-10 的检测值有显著差异，福斯6000检测值有差异。实验室与牧场之间的交互作用对检测值也有影响，其中实验室占33.8%，不同牧场之间占59.5%；实验室之间的差异主要来源于操作人员不同；不同牧场之间的差异主要来于饲养管理、日粮水平、采样方式及保存方式等的差异。因此目前在检测分析中亟待解决的是完善制定不同实验室和不同仪器的校正方法，使检测值在各实验室的测定值具有可比性和稳定性。

综上所述，在测定中影响尿素氮值的有内在和外在因素，内在因素主要是营养因素，奶牛品种不同和饲养管理不同等导致奶牛对MUN 的耐受程度不同；外在因素中主要是奶样的取样方法、保存方法和测定方法不同及牧场和实验室的交互作用对检测值的影响。在探索MUN 值的准确性时应着重考虑内在因素和外在因素的影响，也是今后继续研究的方向。