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女贞子有效成分提取工艺及含量研究进展

2022-11-18谭朝阳刘塔斯

湖北农业科学 2022年15期
关键词:女贞子齐墩女贞

赵 杰,肖 雨,谭朝阳,刘塔斯

(湖南中医药大学生物工程实验室,长沙 410208)

女贞(Ligustrum lucidumAit.)为木樨科(Oleanceae)女贞属(Ligustrum)常绿乔木,其干燥成熟果实即女贞子。女贞子甘、苦、凉,归肝、肾经,具有滋补肝肾、明目乌发之功效,可用于治疗头晕目眩耳鸣、腰膝酸软、须发早白、目暗不明等病症[1],历代医家沿用至今。女贞子的化学成分主要有三萜类、环烯醚萜类、苯乙醇苷类、黄酮类等。本研究通过查阅近年来的文献,就女贞子有效成分的提取工艺、质量检测方法及含量3个方面进行归纳总结,以期促进女贞子的进一步开发利用。

1 女贞子提取工艺研究进展

1.1 齐墩果酸提取工艺研究进展

齐墩果酸属五环三萜类化合物,具有弱酸性,脂溶性强,是女贞子中含量较高的成分之一,《中华人民共和国药典(2005年版)》[简称《中国药典(2005年版)》]曾规定女贞子中齐墩果酸的含量不得少于0.6%[2]。齐墩果酸药效明确,毒性低,具有保肝、免疫调节、抗炎、抗病毒、抗艾滋、保护心血管系统、降血糖血脂等作用[3-7]。临床上多用于急、慢性肝炎的辅助治疗。齐墩果酸结构复杂,不易合成,主要从天然植物女贞子中提取获得。女贞子中齐墩果酸常用的提取方法有回流提取、索氏提取、超声提取、微波提取、超临界CO2萃取、加速溶剂提取和闪式萃取等。

郗艳丽等[8]以甲醇为溶剂,采取索氏提取的方法,在单因素试验的基础上进行正交试验,确定最佳提取工艺条件为温度85℃、料液比1∶30(g/mL)、回流次数5次。在此条件下齐墩果酸的提取率为4.066%。

蒋珍菊等[9]以乙醇为提取溶剂,采用单因素试验和正交试验优化超声辅助提取工艺,料液体积比5∶40(V∶V),乙醇浓度95%,超声频率44 000 Hz,提取时间60 min,此时齐墩果酸含量可达(1.271±0.002)%。王莹等[10]采用同样的方法,料液比1∶8(g/mL)、提取时间30 min、提取温度30℃、乙醇浓度85%时,齐墩果酸含量最高,为1.0 mg/mL。

樊维等[11]通过正交设计优化微波提取工艺,得到的最优方案为90%乙醇,微波温度60℃,微波时间3 min,料液比1∶10(g/mL),微波功率300 W,提取率1.719 4%。朱沛沛等[12]使用单因素试验和响应面法优化微波提取工艺,得到最佳工艺为82%乙醇、料液比1∶11(g/mL)、微波时间3 min、微波功率300 W、微波温度58℃,与樊维等[11]的试验结果接近,但提取率更高,为2.858 9%。

CO2在超临界状态时有气体的扩散系数及黏度和接近液体的密度,对非极性物质溶解性极强,可根据不同成分在流体中的溶解度不同而将其分离开来。超临界CO2萃取具有提取与分离一体、适合工业生产、安全无毒等优点。郭姣等[13]提出了一种使用超临界CO2萃取技术提取齐墩果酸的方法,最佳工艺条件为萃取温度50℃,压力15 MPa,分离釜Ⅰ温度55℃,压力10 MPa,分离釜Ⅱ温度45℃,压力6 MPa,萃取时间120 min,齐墩果酸得率为2.011 7%。

褚姝含等[14]比较了浸渍提取法、回流提取法和超声波提取对齐墩果酸含量的影响,最终得出超声法相对传统的浸渍法和回流法提取率更高的结论,超声法得到的齐墩果酸含量为2.32%。蒋珍菊等[15]采用正交试验分别优选了超声提取、微波提取和超临界CO2提取的最佳条件,并对其进行比较,得到这3种方法相较于传统方法提取率均较高的结论。

闪式提取技术是指依靠高速机械剪切刀和超冻分子渗滤技术,数秒内把植物破碎为细微颗粒,并使有效成分迅速达到组织内外平衡,通过过滤达到提取目的,此法能最大程度保留有效成分,缩短提取时间。武景路[16]以齐墩果酸和熊果酸的总含量和干膏收率为指标,采用单因素试验和正交试验优选闪式提取工艺,得到提取时间60 s、料液比1∶4(g/mL)、提取温度65℃的结果,在此条件下闪式提取较其他方法提取率更高。

连续超声逆流提取是将超声提取技术和连续逆流提取技术结合起来,更加高效、节能、安全、环保。张静等[17]以齐墩果酸和熊果酸总量为指标优选工艺,得到的最佳条件是15倍量80%乙醇,超声频率30 kHz,此时齐墩果酸及熊果酸平均总质量分数为5.66%。

王文俊等[18]比较了加速溶剂萃取法、索氏提取和超声提取,发现加速溶剂提取率与索氏提取相近,均高于超声提取,但加速溶剂萃取相对索氏提取更加快速,溶剂和样品用量更少,加速溶剂萃取不失为一种中药材提取的好方法。

1.2 特女贞苷提取工艺研究进展

特女贞苷是女贞子环烯醚萜类化合物中含量最高的成分,也是女贞子专属性成分,具有抗氧化、抗衰老、保肝、保护血管等作用[19,20]。《中华人民共和国药典(2020年版)》[1]规定女贞子中特女贞苷的含量不得少于0.7%。

目前,提取特女贞苷多采用煎煮法、回流提取法、超声提取法和微波提取法等。特女贞苷属水溶性成分,张艳等[21]以水作为溶剂,加热回流提取,采用正交试验优化条件,确定最佳条件为10倍量的水,3次提取,每次2 h,此时所得特女贞苷含量为(17.22±0.16)mg/g。此法简单易行,成本廉价,得率较高,但是耗时较长。

程敏等[22]在单因素试验的基础上进行正交试验,考察了超声提取女贞子中特女贞苷的最优条件,70倍量水,提取2次,每次超声2.5 h,特女贞苷的得率最好,为0.976%。

张冕等[23]应用离子液体为提取溶剂,采用微波辅助法提取,并设计正交试验优化了工艺,最佳工艺为1.0 ml/L的溴化1-丁基-3-甲基咪唑提取剂,微波功率300 W,料液比3∶23(g/mL),提取时间6 min,此条件下特女贞苷的得率为15.13%。离子液体相对通常的提取溶剂甲醇、乙醇、乙酸乙酯等更安全环保,且提取率更高。

黎军等[24]通过单因素试验和响应面试验优化特女贞苷的水提醇沉工艺,得到最合适条件组合为液料比20 mL/g,进行水浴,每次3 h,得到特女贞苷提取率为52.50%,响应面回归模型极显著,预测值与实际值差异小,结果可靠。

为更好地提取女贞子中的有效成分,研究者们常将特女贞苷和齐墩果酸作为综合指标进行考察。郭宇洁等[25]采用正交试验设计,分别优选齐墩果酸和特女贞苷的乙醇提取工艺,二者的优选结果均为75%乙醇,6倍量溶剂,提取3次,每次2 h。

常星洁等[26]以特女贞苷和齐墩果酸为指标,采用单因素试验和Box-Behnken响应面法优化回流提取工艺,得到最优条件为67.2%乙醇,12倍量溶剂,提取2次,每次1.5 h。此时,特女贞苷与齐墩果酸的转移率分别可达96.96%和97.30%。

金婷等[27]不仅以齐墩果酸和特女贞苷为指标考察了最佳的醇提工艺,还考察了粉碎度的影响,趁热过滤与静置24 h后过滤的差异,并比较了醇提与水提的提取率差异。最后发现,单独提取特女贞苷,水提效果更好,但若综合考察2个指标,采用75%乙醇效果更好,最佳条件为取女贞子的压碎品,采用10倍量溶剂,75%乙醇,提取3次,每次1 h,趁热过滤,此时特女贞苷和齐墩果酸的提取率分别达74.5%和80.9%。该研究较为全面地考察了提取过程中的影响因素,可作为提取女贞子有效成分的参考。

高爽等[28]以特女贞苷、齐墩果酸、熊果酸为指标成分,采用单因素试验和正交试验优化女贞子回流提取工艺,发现使用8倍量60%乙醇,回流提取3 h,提取3次时,指标成分转移率最高,此时特女贞苷转移率为75.42%,齐墩果酸转移率为93.86%,熊果酸转移率为99.83%。所得结果良好,可用作回流提取女贞子的参考。

1.3 红景天苷提取工艺研究进展

红景天苷属于苯乙醇苷类成分,是水溶性成分,易溶于水和甲醇,可溶于乙醇,不溶于丙酮等脂溶性有机化合物。红景天苷是中药红景天中的主要活性化合物,广泛用于医疗保健和化妆品行业,有着保肝、抗肿瘤、抗心肌损伤、抗衰老和调节免疫等作用[29-33]。然而,红景天因过度采挖而资源匮乏,人工种植受到根腐病等生产条件的影响未能大规模推广,因此从其他药材如女贞子中提取红景天苷成为可行的方法。

郭加加等[34]以红景天苷和酪醇为指标,使用正交试验优选女贞子中红景天苷的酸水解工艺,最佳条件为采用20倍量冰乙酸,在100℃下回流提取20 h。使用冰乙酸水解,可以使很多含有红景天苷元的裂环烯醚萜成分水解转化为红景天苷,有效增加了红景天苷的含量,经研究,酸水解得到的红景天苷是未经水解的3倍,且所用冰乙酸无毒,更适合工业生产。

黄君梅等[35]采用正交试验法优化女贞子中红景天苷回流提取工艺,并对浓缩后的提取液使用冰乙酸水解,得到最佳工艺为使用6倍量水为溶剂,回流1 h,提取3次。此法有效提高了女贞子中红景天苷的含量,可减少对资源匮乏的红景天的采挖。

石任兵等[36]申请了一种基于碱转化从女贞子中提取红景天苷的专利,方案为采用40%~80%的乙醇回流2~4次,离心后上清液加碱水解后加酸中和,再进行纯化。此法得到的红景天苷转化率高达250%。

辛云霞等[37]通过单因素试验和正交试验优化微波提取工艺,发现在45℃下,采用30%乙醇,20∶1(mL/g)的固液比,600 W的微波功率,提取2 min效果最好,红景天苷的提取率为0.9113%,微波提取较传统的回流提取明显省时高效。

许玲玲等[38]在单因素试验的基础上进行了正交试验,优化了酶解法提取工艺,最佳条件为纤维素酶用量0.10%,酶解温度50℃,酶解时间4 h。此时,红景天苷的提取率为0.90%。还比较了超声提取、回流提取、闪式提取与酶解法提取率的差异,发现酶解和超声提取率较高,而闪式提取和回流提取的提取率较低。酶解法耗时相对长,但是操作简便,与超声提取比较不会产生噪音,无仪器要求,更适合用于工业生产。

从女贞子中提取红景天苷的研究目前还相对较少,大多数都是从红景天中提取红景天苷,所用的方法有很多,如回流法、超声法、微波法、超临界CO2萃取、酶解法、闪式提取法、仿生提取法等。优选工艺时采取的试验设计方案也很多,如正交试验法、均匀设计法、响应面法、正交设计-多元回归法等。这些方法和设计方案也可用于从女贞子中提取红景天苷。

2 女贞子的质量检测方法

定量分析是评价一种药材质量的关键步骤,只有使用可靠的测定方法来测定药材中的有效成分含量,才能准确地评估或鉴别药材质量。近年来,女贞子定量分析方法研究主要有薄层色谱法、高效液相色谱法、气相色谱法、毛细管电泳法、紫外分光光度法以及近红外光谱技术等。

2.1 薄层色谱法

《中国药典(2005年版)》规定采用薄层色谱法测定女贞子中齐墩果酸含量,作为女贞子质量控制的指标。研究者们多采用薄层色谱法测定齐墩果酸的含量,但由于结果重现性较差,且难以将齐墩果酸与熊果酸分离,近10年,随着高效液相色谱仪的普及,齐墩果酸的含量测定也多改用高效液相或超高液相色谱法来进行。

石力夫等[39]对不同极性溶剂的萃取液和女贞子弱脂溶性有效成分红景天苷及其活性衍生物的薄层色谱行为进行考察和分析,得到的最佳色谱条件为硅胶G板,氯仿和乙酸乙酯萃取液分别用环己烷-乙酸乙酯-乙酸(5∶2∶1)和乙酸乙酯-甲醇-甲酸(8∶1∶1)展开;红景天苷及其衍生物用乙酸乙酯-甲醇-乙酸(8∶1∶1)展开,10%硫酸乙醇液显色,能够起到良好的分离鉴定作用。

2.2 高效液相色谱法(HPLC)和超高液相色谱法(UPLC)

HPLC和UPLC不仅具有稳定、准确、高效、灵敏、能够同时测定多种化学成分等优点,而且对样品的适用性广,不受样品挥发性和热稳定性的干扰,是近年来测定中药材含量研究采用最多的方法。

李元圆等[40]使用HPLC法同时测定了女贞子中红景天苷和女贞子苷的含量,通过优化色谱条件最终使得基线平稳,分离度耐用性好,结果准确。色谱条件为以Dikma inspire C18色谱柱(4.6 mm×250.0 mm,5 μm)、甲醇-水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长220 nm。

廖晓燕等[41]使用HPLC-荧光法测定酒女贞子中酪醇、羟基酪醇和红景天苷的含量。结果显示,该法不仅对混合物分离效果好而且测定结果非常准确,仪器灵敏度方面也很优越。

易骏等[42]使用RP-HPLC法同时测定女贞子中羟基酪醇、红景天苷、特女贞苷、女贞苷、女贞苷G1、橄榄苦苷、类叶升麻苷(毛蕊花糖苷)和芹菜素8种化学成分,重现性和分离较好,结果准确,并考察了环烯醚萜类、苯乙醇苷类和黄酮类多种活性成分的含量,更加全面地反映了女贞子的药材质量。

燕霞等[43]建立高效液相-电雾式检测方法测定了女贞子中齐墩果酸和熊果酸的含量,此法稳定、重复性好且齐墩果酸和熊果酸能很好分离,使用的CAD检测器检测范围更广,灵敏度较之常用的紫外检测器更高,可用作测定齐墩果酸和熊果酸的含量。

任爽等[44]采用HPLC测定了女贞子和酒女贞子饮片中红景天苷、酪醇、特女贞苷、木犀草苷、木犀草素、芹菜素、齐墩果酸和熊果酸8种成分的含量,并比较女贞子、酒女贞子饮片及水煎煮前后成分的含量,发现木犀草素、芹菜素可用于真伪鉴别,而红景天苷、酪醇、特女贞苷和木犀草苷则为质量控制的特征成分。

韩疏影等[45]采用HPLC建立女贞子中红景天苷、女贞苷、特女贞苷、橄榄苦苷和oleonuezhenide含量的测定方法,以特女贞苷为参照物,其他成分的相对校正因子为定量参数,其他成分与特女贞苷的相对保留时间为定性参数,建立了女贞子“一测多评”法,多项结果均表明其准确可靠,为女贞子多指标成分的质量控制提供了参考,且促进了“一测多评”法的运用。

指纹图谱技术能够全面地反映中药所含化学成分的种类及数量,提供了丰富的药材信息,HPLC指纹图谱技术常用来规范质量标准。吴修红等[46]以木犀草素峰为参照峰,以乙腈-水为流动相,采用二极管阵列检测器建立了酒女贞子饮片的HPLC指纹图谱,并且测定了红景天苷、齐墩果酸、木犀草素及特女贞苷的含量,方法学考察良好,分离效果好,能够很好地反映女贞子的质量。崔蕴慧等[47]以红景天苷为参照峰,以乙腈-水为流动相,建立了女贞子HPLC指纹图谱,并测定了红景天苷和特女贞苷的含量,方法简单,结果准确,该研究为考察女贞子的真伪和质量提供了参考。许浚等[48]采用乙腈-0.1%甲酸为流动相,使用HPLC-Q/TOF-MSE对指纹图谱共有峰进行归属,建立了女贞子HPLC指纹图谱和女贞子多指标成分的测定方法,测定了女贞子中松果菊苷、红景天苷以及特女贞苷的含量,结果准确,能有效控制女贞子质量。

超高效液相法相较于高效液相法分析时间短、灵敏度更高,并且减少了溶剂的用量。纪鑫等[49]使用UPLC同时测定女贞子中红景天苷和特女贞苷,并且探讨了不同炮制时间酒女贞子成分含量的变化,发现酒女贞子随炮制时间的增加,红景天苷逐渐增多而特女贞苷逐渐减少,原因可能是炮制使得特女贞苷水解,分解出红景天苷成分。

2.3 气相色谱法

气相色谱法具有效率高、灵敏度高、分析速度快、应用广泛等特点,多用于低沸点挥发性成分的分析。周静等[50]建立了一种使用气相色谱测定女贞中齐墩果酸和熊果酸的方法,色谱条件为HP-1毛细管柱(25 m×0.32 mm,0.52 μm),柱温280℃,以氮气作为载气,采用氢火焰检测器检测,方法学考察良好,齐墩果酸和熊果酸分离度良好,可作为女贞子质量检测的参考。

郭胜男等[51]采用顶空固相微萃取/气-质联用法分析女贞子酒制前后挥发性成分的变化,发现酒女贞子与女贞子的成分差异很大,苯乙醇等成分减少,烯类成分有所增加。此法可以测得整个药材的挥发性成分,且不会对成分产生破坏,是考察女贞挥发性成分的好方法。

2.4 毛细管电泳法

毛细电泳法具有高效、快速、分离率高、仪器简单、样品和溶剂使用量少等优点。王文俊等[18]建立了一种加速溶剂萃取-毛细管区带电泳测定女贞子中齐墩果酸和熊果酸的方法。考察了硼砂浓度、β-环糊精浓度、pH和甲醇浓度对分离度的影响,从而确定最优电泳条件,最终确定为40 mmol/L硼砂,1 mmol/L β-环糊精,pH 9.5和6%甲醇,在此条件下分离良好。此法更加简单省时,分析效率高,且具有创新性,有一定的应用前景。

巫利璇等[52]使用毛细管区带电泳高频电导检测女贞子中齐墩果酸和熊果酸的含量。试验结果表明该法虽然操作简便但是不影响准确度,重现性也十分优越。

黄宝美等[53]采用毛细管电泳-安培检测法测定女贞子中齐墩果酸的含量。该法只对女贞子所含各种成分中具有电化学活性的化学成分有响应,所以其受干扰的程度比较小、分离效率也相应更高,仪器以及试验操作上较为简便,不失为一种理想的方法。

2.5 紫外分光光度法

黎彧等[54]以芦丁为对照品,用硝酸铝显色,采用紫外-可见光分光光度法测定女贞子总黄酮含量。试验结果显示该法测量范围广、选择性较好、灵敏度较高,是较为理想的测定方法。

2.6 近红外光谱法

近红外光谱法有时不需要进行预先分离,也可以定量测定已知化学成分混合物中特定化学成分,虽然不如HPLC法精确,但能快速测量并得出结果。周颖等[55]使用近红外光谱技术对女贞子中特女贞苷含量进行测定。根据各项数据可知HPLC法实测值和近红外光谱法预测值之间相差不大,能够准确测定。张迪文等[56,57]采用偏最小二乘法-近红外光谱法建立了女贞苷和特女贞苷定量校正模型,模型预测值与实测值相关度高,模型结果可靠。

3 女贞子药材含量研究进展

《中华人民共和国药典(2005年版)》将齐墩果酸作为女贞子含量测定指标,2010年及以后的历版《中华人民共和国药典》将含量测定指标改为专属性成分特女贞苷,同时《中华人民共和国药典(2020年版)》还新增红景天苷作为酒女贞子的含量测定指标,以反映女贞子炮制后的成分变化。近年来,对女贞子药材含量的研究也多围绕这些成分进行。

3.1 不同产地女贞子药材含量研究

刘欢等[58]考察了安徽、四川、湖南、云南、河南、山西6个省49个县与女贞子中酪醇、红景天苷、松果菊苷、芦丁、毛蕊花糖苷、女贞苷、特女贞苷、槲皮素8种成分含量的关系,采用多种统计学方法分析,最终发现8种成分含量与地理位置无关。

刘美等[59]用HPLC法测定了23批不同产地女贞子中特女贞苷的含量。结果表明安徽省产出的女贞子中特女贞苷含量最高,江苏省产出的含量最低。不同产地之间含量差异较明显。

张炯怡等[60]使用HPLC法测定贵州省不同市级单位以及县级单位女贞子中红景天苷、特女贞苷以及女贞苷的含量。研究显示即使是在同一个省份,位于不同市或县含量都有差异,试验中采集的10个地区样品之间最大含量差异可达1.6倍,红景天苷∶贵州惠水含量最高,贵州贵阳市含量最低。特女贞苷∶贵州都匀含量最高,贵州铜仁含量最低。女贞苷∶贵州惠水含量最高,贵州铜仁含量最低。

李彦灵等[61]用HPLC法测定了不同产地女贞子中红景天苷、女贞苷、特女贞苷的含量。研究测得河南省平顶山市的女贞子红景天苷含量最高,四川省含量最低;河南省女贞子中所含女贞苷和特女贞苷均为最高,而安徽省均为最低。

易骏等[42]使用RP-HPLC法测定了12个省份12个地区女贞子中红景天苷、特女贞苷、羟基酪醇和女贞苷的含量。结果显示不同产地不同成分含量差异较大,特女贞苷∶江西樟树含量最高,河北保定含量最低。红景天苷∶江西赣州含量最高,安徽合肥含量最低。羟基酪醇∶江西樟树含量最高,安徽合肥含量最低。

崔蕴慧等[47]采用HPLC法测定了湖北蕲春、广东、江苏、河南、广西、云南、江西、安徽、甘肃、陕西、浙江杭州、湖南邵阳12个地区的女贞子中红景天苷和特女贞苷的含量,研究发现陕西女贞子红景天苷含量最低,而广东含量最高;浙江杭州女贞子特女贞苷含量最低而广西含量最高。不同地区红景天苷及特女贞苷含量差异较大,这可能与产地自然环境差异以及采收时间不同有关。

黎彧等[54]利用紫外-可见光分光光度法测定了广西、湖南、广东、浙江4个省(自治区)女贞子样品中总黄酮含量。结果表明,浙江省生产的女贞子总黄酮含量最高,广西最低,含量差异接近2倍,证明女贞子中黄酮含量与地理因素有关。

3.2 不同采收期女贞子药材含量研究

刘欢等[58]采用HPLC测定了女贞子中酪醇、红景天苷、松果菊苷、芦丁、毛蕊花糖苷、女贞苷、特女贞苷、槲皮素的含量,并采用相关性分析、单因素方差分析、主成分分析等统计学方法考察了女贞子性状、成分含量、采收时间、产地之间的关系,研究发现女贞子中红景天苷在6月含量最高,8种成分总体在8—10月份含量较高。

谭会颖等[62]通过HPLC测定了不同采收期女贞子中红景天苷、特女贞苷、齐墩果酸和木犀草苷的含量,发现9月特女贞苷含量达最高,而红景天苷在11月含量最高,齐墩果酸含量变化不大,木犀草苷含量较低,综合考量,9—11月为女贞子的最佳采收期。

刘芳等[63]使用HPLC考察了十堰市冬至前后特女贞苷、红景天苷、酪醇3种成分累积量的变化,采用层次分析法对不同成分加权分析,发现最佳采收期为冬至前1个月。

孔德平等[64]研究了南京女贞子不同采收期多指标成分的动态累计,使用HPLC和紫外分光光度法进行含量测定,主成分分析法进行评价,研究发现三萜类成分随着果实成熟含量逐步下降,红景天苷和特女贞苷含量先升后降,而糖类成分则随月份含量逐渐上升,综合考察认为10月下旬为南京女贞子的最佳采收期。

蒋梅 香等[65]使 用HPLC测定 了2016年9月 至2017年1月不同生长时期株洲女贞子药材中特女贞苷以及红景天苷的含量。结果表明女贞子药材中这两种成分含量变化趋势相反,综合考虑12月为株洲女贞子的最适采收期。

王甫成等[66]采用HPLC考察了8—12月5个采收期女贞子中红景天苷、酪醇、木犀草苷、女贞苷和特女贞苷的含量动态变化,发现除酪醇外其他成分均在9月含量最高,10月次之,9、10月为女贞子的最佳采收期。

戴一等[67]采用紫外分光光度法考察了8—12月中旬7个不同采收时间女贞子总黄酮和多糖含量的动态变化,试验结果表明女贞子中黄酮含量与采收期有直接关系且黄酮含量与多糖含量变化趋势大致相反。

仇小月等[68]采用紫外-可见光分光光度法测定安徽省2014年7—12月出产的女贞子药材中总黄酮含量。结果显示2014年7—10月女贞子中总黄酮含量较高,中间有小幅波动含量比较稳定,12月中旬含量最低。由此可知女贞子中黄酮含量与采收期有关。

杨元丰等[69]采用HPLC对江西省南昌市2015年11月2日至2016年1月2日不同采收时期女贞子中熊果酸和齐墩果酸含量进行了测定,发现在药典规定采收期内,这两种成分含量变化不大,推测女贞子齐墩果酸和熊果酸与“女贞子在冬至前后采收”无关。

《中华人民共和国药典(2020版)》中规定女贞子的采收时间为冬季果实成熟时,但是诸多研究人员试验证实不同成分含量最高的时间存在差异,很多有效成分在冬季12月含量较低,需根据不同的需求确定采收时间,但是总体来说秋冬两季女贞子有效成分含量较高。

4 结语

女贞子广泛分布于华东、华南、西南及华中各地,且具有2 000多年的用药历史,药理作用明确,毒性小,是极富开发利用价值的药用资源。然而,当前对女贞子的研究还存在一些问题,限制了其开发利用。①通过大量文献查阅可知,目前对女贞子中脂溶性有效成分齐墩果酸研究较多,但是对其特女贞苷等水溶性有效成分研究略显不足,应当进一步研究。②女贞子成分丰富,仅考察1~2种成分不足以评价其质量,建立多指标成分定量评价体系成为亟需解决的问题。此外,各产地女贞子的质量差异较大,品质良莠不齐,有些地区女贞子的有效成分含量甚至不能达到药典要求。虽然药典规定了采收期,但是全国各地的最佳采收期并不完全一致,有的地方在8—9月女贞子中活性成分含量最高、质量较好,也有的地方10—12月是最佳采收期。且女贞子中不同成分含量动态变化也较大,这些均需进一步研究。

目前市场上已有多种以女贞子为主要原料开发的中成药,对女贞子的应用也不再局限于中药配方。女贞子保健食品的开发研究也取得了一定成果,例如女贞子饮料、女贞子酒等[70]。未来应当不断开发女贞子的潜在药理作用,克服目前存在的技术瓶颈,并将已经研究清楚的药理成分开发出更多的使用形式,还可以将应用领域延伸到化妆品行业,比如抗氧化面霜、修护面膜等。

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