何沅俊 刘丹妮

1 厦门大学附属第一医院杏林分院影像科，福建省厦门市 361021； 2 厦门大学附属中山医院影像科

甲状腺结节是指甲状腺局部细胞异常生长导致的散在病变，当前甲状腺结节分为良性、恶性性质，不同性质结节治疗方法及预后也存在较大差异[1]。因此早期鉴别、及时诊断，对改善患者预后有重要意义。CT是临床诊断甲状腺结节的有效方法，但医学影像学图像内含有多维信息，仅根据病灶形态、功能学特征，临床诊断价值较低[2]。纹理分析是指从影像学图中提取有意义的参数信息，并利用复杂的算法进行计算，可清楚反映结节的异质性及病灶性质[3]。当前已有研究[4]证实CT纹理分析对甲状腺结节性质鉴别有一定诊断意义，但关于CT纹理参数与肿瘤恶性生物学行为间的关系，临床鲜有报道。鉴于此，本文分析甲状腺结节CT纹理参数及其同原癌基因、抑癌基因水平的相关性，旨为甲状腺结节诊断提供参考，报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取我院2020年1月—2022年2月期间收治的85例甲状腺结节切除术患者，根据手术病理结果分为两组：良性组50例(73个结节)，男12例，女38例；年龄20～72(58.63±7.14)岁。恶性组35例(62个结节)，男8例，女27例；年龄20～73(60.12±6.98)岁。两组患者基线资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，可对比。纳入标准：(1)入组患者均在院接受甲状腺结节切除术；(2)甲状腺结节性质均经病理确诊；(3)术前经CT检查；(4)具有完整的临床资料；(5)患者知情研究，并签署同意书。排除标准：(1)亚急性甲状腺炎；(2)伴其他部位恶性肿瘤或免疫缺陷、凝血障碍者。

1.2 方法

1.2.1 CT诊断：Philips Ingenuity 64排CT诊断仪，从舌骨下缘扫描至主动脉弓上缘，扫描层厚为1mm，层间距为1mm，矩阵为512×512。CT平扫结束后进行增强扫描，经右肘前静脉注射非离子型对比剂(碘佛醇，320mgI/ml，江苏恒瑞医药，国药准字H20067895)50ml，注射速率为3ml/s，静脉期扫描延迟70s。纹理分析：经扫描图像导入MaZda 4.6软件，于肿瘤最大层面、病灶边缘勾画感兴趣区(ROI)，避开明显钙化、囊性、出血区，并ROI区进行纹理分析。先提取纹理参数，再对纹理特征进行筛选，选择前10个最优特征，最后对最优特征数据进行降维，分析熵值、峰态以及偏度等参数值，每项参数测量3次，取平均值。

1.2.2 癌基因表达：将术中冰冻的结节标本复温，采用荧光定量PCR法测定原癌、抑癌基因，先进行裂解细胞，加入并乙醇沉淀溶液中RNA，再高速离心15min，12 000r/min，使溶液内RNA沉积并形成一层胶状物，去除上层清液，清洗，干燥处理。对RNA沉淀进行溶解，以紫外吸收法测定溶液浓度及纯度，制备反应体系，利用实时定量PCR检测癌基因表达。

1.3 观察指标 (1)比较两组患者CT纹理参数差异，包括熵值、峰度、偏度、像素值及标准差；(2)比较两组原癌基因表达，包括原肌球蛋白相关激酶基因(TRK)、原癌基因RET(RET)、特异性结合域转录因子/过氧物酶体增殖物激活受体融合基因1(PAX8-PPARΥ1)；(3)比较两组抑癌基因表达：脑恶性肿瘤缺失基因1(DMBT1)、抑癌基因DPC4(DPC4)、抑癌基因PTEN(PTEN)、Tat结合蛋白30(TIP30)；(4)分析CT纹理参数与原癌基因、抑癌基因的相关性。

2 结果

2.1 两组患者CT纹理参数比较 恶性组CT纹理中熵值高于良性组(P<0.05)，两组其余参数值比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1 两组患者CT纹理参数比较

2.2 两组原癌基因表达比较 恶性组RET、TRK、PAX8-PPARγ1基因表达均高于良性组(P<0.05)，见表2。

表2 两组原癌基因表达比较

2.3 两组抑癌基因表达比较 恶性组DMBT1、DPC4、PTEN、TIP30基因表达低于良性组(P<0.05)，见表3。

表3 两组抑癌基因表达比较

2.4 相关性分析 经Pearson相关性分析，CT纹理熵值与原癌基因RET、TRK、PAX8-PPARγ1基因表达呈正相关(r=0.538、0.612、0.583，P<0.05)；与抑癌基因DMBT1、DPC4、PTEN、TIP30表达呈负相关性(r=-0.486、-0.525、-0.605、-0.593，P<0.05)。

3 讨论

纹理分析是利用相关算法计算影像学图中相关信息，根据相关信息反映病灶异质性及病灶性质。通过纹理分析，能够反映肿瘤病灶病理学异质性，表现细胞过度增殖、异常血管生成及坏死[5]。其中熵值、偏度、峰度等是描述体素值的基本分布，与肿瘤细胞坏死、增殖及新生血管数量关系密切[6]。本文结果显示，恶性组CT纹理中熵值高于良性组(P<0.05)，两组其余参数值比较差异无统计学意义(P>0.05)。主要原因是恶性病灶熵值与结节硬度有关，恶性病灶内存在钙化灶且硬度增加，故使熵值异常增加；而偏度、峰度是反映目标结节的平均亮度，肿瘤病变早期亮度无明显变化，故使偏度、峰度等水平无异常变化[7]。

近年来，寻找一种有效、准确的生物学标志物来有效预测甲状腺结节良恶性是主要的研究方向。在恶性结节发生、进展过程中，癌基因表达占据着重要作用。其中原癌基因是癌细胞分化、增殖、远处转移的重要机制，抑癌基因是抑制恶性肿瘤分化、增殖等主要机制，通常原癌基因与抑癌基因呈动态平衡，在肿瘤因子刺激下，使原癌基因表达异常升高，此时抑癌基因表达会相应下降，肿瘤细胞增殖分化迅速[8-9]。本文结果显示，恶性组原癌基因RET、TRK、PAX8-PPARγ1表达均高于良性组，抑癌基因DMBT1、DPC4、PTEN、TIP30表达低于良性组(P<0.05)，该结果与上述理论相一致。原癌基因中RET基因是通过染色体异位、倒立重排形成一段新的融合DNA序列，即癌基因，在转录、翻译过程中成为新的融合蛋白；并能促进细胞内信号通路活性，促使肿瘤细胞增殖与分化；TRK属于含有络氨酸激酶的受体，是促使甲状腺腺瘤逐渐转化为甲状腺癌；PAX8-PPARγ1是甲状腺转录因子DNA与PPARγ1 A-F区融合蛋白，可抑制PPARγ1激活，参与到肿瘤细胞周期调控、肿瘤细胞形成与发展过程[10]。DMBT1可促使人体免疫机制建立，在多种恶性肿瘤表达中为异常低表达；DPC4是人体内重要的抑癌基因，在多种恶性肿瘤中，DPC4呈功能丧失状态，影响癌基因转录，抑制肿瘤形成[11]；TIP30通过调控Tat蛋白转录过程，促使肿瘤细胞凋亡，有效抑制肿瘤细胞的增殖、分化及远处转移；PTEN主要是对FAK、PI3K/AKT等下游信号通路的调控，发挥显著的抑癌作用[12]。因此研究说明恶性肿瘤细胞形成，与抑癌基因表达下降、原癌基因表达升高有关。本文结果显示，经Pearson相关性分析，CT纹理熵值与原癌基因表达呈正相关，与抑癌基因表达呈负相关性(P<0.05)。结果表明，对甲状腺结节采用CT纹理检查，对预测甲状腺结节良恶性有重要意义。当熵值越高，甲状腺结节恶性程度越高，抑癌基因越低、原癌基因表达越高，故可将CT纹理中熵值作为判定甲状腺结节良恶性的重要参数指标。

综上所述，甲状腺良性与恶性结节之间CT纹理参数差异明显，且原癌基因表达升高，抑癌基因表达下降，CT纹理参数中熵值与原癌基因、抑癌基因表达量密切相关。根据CT纹理上熵值可有效评估甲状腺结节良恶性，为疾病诊断提供参考。但该研究尚有不足，CT纹理参数较多，研究选用的CT纹理参数多为一阶特征，并有二阶特性及高阶特性，而该研究尚未讨论。同时甲状腺恶性结节存在淋巴结转移情况，可能会影响研究结果。另研究样本量少、研究范围受限，使肿瘤内抑癌、原癌基因表达水平受到一定影响，故仍需未来扩大样本量、选用CT纹理多参数分析，分析甲状腺结节CT纹理参数中熵值与原癌基因、抑癌基因表达之间的关系。