于树涛

（莱阳市动物疫病预防控制中心，山东莱阳 265200）

磷不仅是畜禽必需的营养物质，而且是功能最多的营养素之一。如果畜禽机体缺少钙、磷，就会导致饲料转化率降低，动物生长缓慢甚至停止生长，也会导致一些疾病发生，如佝偻病、软骨病等[1]。猪、鸡等单胃动物很难吸收饲料中的磷，因为饲料中的磷大部分以植酸磷形式存在，导致畜禽对植酸磷的吸收率很低，所以在饲料中添加植酸酶可以有效提高植酸磷利用率[2]。

目前，单胃动物的预混料、浓缩料、全价配合粉料中都添加了植酸酶，但是要在饲料中使用植酸酶，就必须考虑植酸酶在加工制粒过程中的热稳定性和在动物肠道内的水解效率。颗粒饲料的调制和制粒过程，温度可达80～90℃，普通植酸酶活性大幅降低，只有添加耐高温的植酸酶产品，才能保证植酸酶在颗粒饲料中使用的安全性[3-4]。

目前，国内外对植酸酶在猪、肉鸡等畜禽养殖方面的应用效果研究已有很多，但有关低磷日粮添加耐高温植酸酶对蛋鸡影响的研究还较少。植酸酶可替代日粮中0.1%有效磷[5]。因此，开展这方面的研究非常必要，对指导蛋鸡生产、合理应用酶制剂、减少磷的排放污染及环保养殖具有重要意义。为了提高饲料中磷的利用率，克服高温下植酸酶的变性失活，本试验以海兰褐蛋鸡为试验动物，通过饲养试验及屠宰试验，研究在含磷量较低的日粮中加入耐高温植酸酶对海兰褐蛋鸡蛋品质和产蛋性能的影响，并为耐高温植酸酶应用于蛋鸡养殖打下基础。

1 材料与方法

1.1 材料及仪器

1.1.1 试验动物。供试动物为海兰褐蛋鸡。

1.1.2 试验试剂。试验试剂主要包括HCl-HNO3混合酸、HCl溶液、无水乙醇、乙醚、耐高温植酸酶（潍坊宁潍化工有限公司，高温制粒后酶活保持在90%以上）。

1.1.3 试验仪器。主要试验仪器包括AF-610A原子荧光光谱仪（北京合悦达科技有限公司）、FA-1004电子天平（泰兴市凌基仪器有限公司）、游标卡尺（青海量具刃具集团公司）、蛋白高度测定仪（KIYA SEISAKUSHO公司）。

1.2 试验设计

试验前的日粮要求低磷，在预试验前筛掉不健康的鸡只，尽量保证每组鸡生产性能接近和只数相同。选取240羽24周龄海兰褐商品蛋鸡，采用笼养方式，随机分成4组进行试验，分别为对照组、试验1组、试验2组、试验3组，每组3个重复。对照组使用低磷日粮，试验1、2、3组从24周龄开始预饲7 d后分别在低磷日粮中添加600、900、1 200 U/kg耐高温植酸酶，试验时间8周。

1.3 日粮组成及饲养管理

低磷日粮组成及营养水平见表1和表2。整个饲养试验均在鸡舍内，鸡舍为阶梯式，每笼4只，预试期7 d，确定各组主要生产性能差异不显著后，才开始正式试验，试验时间8周，日喂2次，自由饮水。鸡舍温度控制为18～23℃，相对湿度为60%～70%，光照时间为16 h。按常规管理方法做好驱虫、免疫、消毒工作。在进行试验前，首先进行彻底的清洗、消毒，重点是对鸡笼、鸡舍、料槽和水槽进行消毒。在试验期间，每日清扫鸡舍，保证鸡舍卫生。

表1 低磷日粮组成 单位：%

表2 低磷日粮营养水平 单位：%

1.4 测定指标及方法

1.4.1 产蛋性能指标。试验中每天以组为单位记录产蛋数、软壳蛋数、蛋重、破壳蛋数，计算产蛋率、平均蛋重及合格蛋率，每周计算1次料蛋比。

1.4.2 蛋品质的测定及方法。试验结束之后，首先每个组随机抽选50枚鸡蛋放在室温（20℃）下，然后从每组再选取15枚鸡蛋，用来测定蛋黄指数、蛋壳厚度、蛋形指数，并计算哈氏单位。

1.4.3 胫骨质量的测定及方法。试验结束之后，每个重复随机抽选1只鸡屠宰并剥离左右侧胫骨，测定胫骨强度、灰分及钙、磷含量。将左胫骨处理后放入105℃烘箱中烘干24 h，测定长度、直径、胫骨重量。将胫骨压碎，放入坩埚，于茂福炉中550℃灰化18 h，测定灰分含量。胫骨钙采用EDTA络合滴定法测定；胫骨磷采用湿灰化钒黄比色法测定。

1.5 数据分析

使用Excel将所有试验数据建立数据库，采用SPSS 22.0统计软件中One-Way ANOVA方差分析检验组间差异的显著性，采用最小显著差数法（LSD），结果均以平均值±标准差表示。

2 结果与分析

2.1 低磷日粮中添加不同剂量耐高温植酸酶对海兰褐蛋鸡产蛋性能的影响

由表3可知：与对照组相比，试验1、2、3组平均蛋重差异不显著（P＞0.05）；产蛋率提高不显著（P＞0.05）；合格蛋率提高不显著（P＞0.05）；料蛋比差异不显著（P＞0.05）。

表3 不同剂量植酸酶对海兰褐蛋鸡产蛋性能的影响

2.2 低磷日粮中添加不同剂量耐高温植酸酶对海兰褐蛋鸡蛋品质的影响

由表4可以看出：与对照组相比，试验1、3组蛋壳厚度差异不显著（P＞0.05），而试验2组蛋壳厚度提高显著（P＜0.05）；与对照组相比，试验 1、2、3 组蛋黄指数提高极显著（P＜0.01）；与对照组相比，试验2组鸡蛋的哈氏单位提高显著（P＜0.05），试验 1、3 组提高不显著（P＞0.05），试验 2组与试验 1、3组差异显著（P＜0.05）。

表4 不同剂量植酸酶对海兰褐蛋鸡蛋品质的影响

2.3 低磷日粮中添加耐高温植酸酶对海兰褐蛋鸡胫骨质量的影响

由表5可知：与对照组相比，试验2组胫骨重量提高显著（P＜0.05），试验 1、3 组不显著；与对照组相比，试验 1、2、3 组胫骨长度差异不显著（P＞0.05）；与对照组相比，试验2组的钙含量提高极显著（P＜0.01），试验1、3组的钙含量提高不显著（P＞0.05）；与对照组相比，试验 1、3组的总磷含量提高不显著（P＞0.05），而试验2组的总磷含量提高极显著（P＜0.01）；与对照组相比，试验1、2、3组的粗灰分含量提高不显著（P＞0.05）。

表5 不同剂量植酸酶对海兰褐蛋鸡胫骨质量的影响

3 结论与讨论

3.1 低磷日粮中添加耐高温植酸酶对海兰褐蛋鸡产蛋性能的影响

据报道，日粮含磷量低会引起蛋鸡的产蛋率、平均蛋重、饲料报酬下降，而加入耐高温植酸酶可有效提高蛋鸡的产蛋率、饲料报酬、日产蛋重，也可以提高钙和磷的利用率等[6]。黄 忠等[7]报道，在低磷日粮中添加植酸酶，其产蛋率、蛋重以及料蛋比分别比对照组提高了2.86%、3.24%和3.29%，每1 kg鸡蛋饲料成本降低3.45%，死亡淘汰率和破壳软壳蛋率降低。本试验在对照组和所有试验组海兰褐蛋鸡均未死亡、均无明显临床症状情况下的结果表明，低磷日粮中添加耐高温植酸酶改善了蛋鸡的产蛋性能。这是因为植酸酶能水解植酸释放出无机磷，同时解离植酸与各种营养成分的结合，使饲料的消化吸收效率和饲料的营养密度得到提高[8-9]。另外，添加900 U/kg组海兰褐蛋鸡的平均蛋重、产蛋率和合格蛋率均优于添加600、1 200 U/kg组，但添加900 U/kg组的料蛋比与添加600、1 200 U/kg组相比，分别降低了2.17%（P＞0.05）、4.76%（P＞0.05）。 综合考虑，添加 900 U/kg组优于添加600、1 200 U/kg组，说明适量添加耐高温植酸酶可有效地提高海兰褐蛋鸡的生产性能，但低磷日粮中添加耐高温植酸酶的经济性及后续效应仍需进一步研究。

3.2 低磷日粮中添加耐高温植酸酶对海兰褐蛋鸡蛋品质的影响

鸡蛋品质主要与鸡蛋的营养成分、食用价值密切相关，从而影响其商品等级、市场竞争力及经济效益，同时对鸡蛋的破损率、保存时间及种蛋孵化率等有一定的影响。低磷日粮中添加耐高温植酸酶能提高蛋重、蛋形指数、蛋壳厚度，且以添加900 U/kg耐高温植酸酶更有利于提高蛋品质。这可能是因为植酸酶可水解植酸释放出被其络合的Ca2+，提高钙的利用率，从而增加了钙在体内的存留及在蛋壳中的沉积量[10-11]。蛋形指数范围为1.30～1.35时的孵化率较高[12]。试验结果表明，与对照组相比，添加600、1 200 U/kg组蛋形指数及蛋壳厚度差异不显著，而添加900 U/kg组差异显著。说明适量添加耐高温植酸酶对蛋形指数及蛋壳厚度有明显影响。蛋黄指数是用来表示蛋黄品质和禽蛋的新鲜程度，哈氏单位是用来衡量蛋品新鲜度和蛋白质品质的重要指标[13]。本试验结果表明，与对照组相比，3个试验组蛋黄指数差异极显著，而哈氏单位只有添加900 U/kg组差异极显著，说明当日粮中钙、磷已达需要水平时，再添加植酸酶无明显效果。这是因为高钙不利于植酸酶作用，钙与植酸酶可形成复合物或植酸钙，从而影响植酸酶活性。

3.3 低磷日粮中添加耐高温植酸酶对海兰褐蛋鸡胫骨质量的影响

胫骨中灰分、钙及磷含量降低的主要原因是畜禽摄入钙、磷不足或机体对钙、磷需要量增加时，骨中钙、磷被动出来。在蛋鸡日粮中添加植酸酶可提高胫骨质量和胫骨灰分中钙、磷含量以及骨密度[14]。本试验胫骨分析表明，在低磷日粮中添加耐高温植酸酶显著提高了胫骨重量；与对照组相比，添加900 U/kg组的总磷含量及钙含量提高极显著；在一定范围内总磷含量随植酸酶的增加而增加，死亡率与腿病率随植酸酶的增加而降低。