王振东，臧晓南，丛晓梅，朱清

(中国海洋大学 海洋生物遗传育种教育部重点实验室，山东 青岛 266003)

引 言

二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid，DHA)是一种具有抗炎、保护心脑血管、促进视觉细胞和神经系统发育等重要生理功能的n-3多不饱和脂肪酸。裂殖壶菌是一种单细胞球形真菌，被认为是一种新兴的理想的二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid，DHA)来源。裂殖壶菌能够在脂滴内积累大量的多不饱和脂肪酸(PUFAs)，主要是n-3 PUFAs。裂殖壶菌总脂肪酸含量超过其细胞干重的50%，尤其是DHA，含量占总脂的30%～40%[1]。这意味着和DHA合成相关的基因的启动子能高效地启动基因的转录和表达，而裂殖壶菌DHA合成途径中的关键酶基因主要包含在三个基因簇pks1、pks2和pks3中，所以本实验尝试扩增得到pks1及pks3基因的启动子序列，为裂殖壶菌的基因工程操作提供有效的启动子元件。

启动子是一段脱氧核糖核酸序列，一般位于结构基因的5′端上游，可以活化RNA聚合酶，使之与启动子特异性识别并结合，从而起始转录，调控下游基因的表达[2]。启动子自身并不具有基因调控功能，需要和多种转录因子及RNA聚合酶结合后形成转录起始复合体，然后才可以调控基因的表达[3]。启动子是基因的重要组成成分，是基因表达调控过程中的顺式作用元件，影响基因的表达水平，同时启动子也在基因工程载体的研究中发挥着重要的作用。一般按表达方式将启动子分为：组成型启动子、组织特异性表达型启动子和诱导型启动子三类[4]。但这种分类也不是绝对的，某些启动子可能会兼具两种类型的特点[5]。……