杨 然 李韶山

（华南师范大学生命科学学院 广东广州 510631）

新冠病毒感染人体后，会在鼻腔、咽部、下呼吸道等处“定居”并进行繁殖。通过采集鼻咽拭子等标本进行病毒核酸检测，是目前尽早确定是否感染新冠病毒最有效的检测方法。开展大规模的核酸检测有利于精准防控、早诊早治，维护群众的身体健康；同时也利于保障人员的合理流动，推动社会经济复苏及人们生活秩序的恢复。

1 新冠病毒的核酸检测

新冠病毒的核酸检测其实就是对其遗传物质RNA进行检测，其方法是实时荧光定量RT-PCR法。新冠病毒通过呼吸道感染人体，所以从呼吸道采集样本。目前常规的样本类型大致有2类：①用咽拭子在人的上呼吸道（咽部或鼻腔）擦拭采集。②收集下呼吸道痰液、支气管灌洗液、肺泡灌洗液等。通常肺部灌洗液和痰液中的病毒含量高于鼻咽等呼吸道拭子，而呼吸道拭子中的病毒量会远远高于血液。出于大量采集样本需要便携与快捷的考虑，大多核酸检测通常采取咽拭子在人的上呼吸道擦拭采集。采集到的样本将被低温封存，并送到专门的检测机构进行检测。

新冠病毒的核酸检测步骤为：①从采集的样品提取RNA。②将RNA逆转录成cDNA：加入逆转录酶、Oligo（dT）引物、dNTP。根据碱基互补配对原则，Oligo（dT）引物与病毒RNA 3′端相结合，逆转录酶在此结合处开始，以RNA为模板沿着5′→3′端合成碱基互补的DNA链，即cDNA。③PCR扩增，通常采取探针法，即以新冠病毒cDNA某一高度保守基因序列区域为检测靶标，通过PCR扩增，使这段靶标数量呈指数级式增加，通过检测靶标的荧光信号来确定样本中是否有病毒核酸。……