连灵燕，赵 慧，王国英，王建华，孙世贤

（1.长治市潞州区农业农村局，山西 长治 046000；2.中国农业大学 农学与生物技术学院种子科学系，北京 100193；3.中国农业科学院作物科学研究所，北京 100081；4.全国农业技术推广服务中心，北京 100125）

DNA指纹图谱是根据每个品种的DNA组成，为其建立的可见的条码式谱带图谱。它提供的证据是品种的基因型，是稳定的DNA带谱，不受栽培条件影响，并可通过计算机进行系统管理。DNA指纹图谱技术可对植物基因做出明确的鉴定，特别是对那些没有准确系谱记载的育种材料进行遗传分类，弥补系谱记载的缺失；育种人员可以采用这项技术鉴定自交系的遗传特征，保护这些自交系的品种权免受侵犯。因此，研究玉米自交系的指纹图谱具有重要意义。

本研究利用SSR分子标记技术构建20个玉米自交系的指纹图谱，以期找出其特征谱带，以便进一步利用并发挥其优势。

1 材料和方法

1.1 供试材料

本研究所用的材料包括20份玉米自交系，其中昌7-2、P138、478、HC、Mo17、Sh15、郑58、B73、丹598、9058为育种中常用的优良自交系，HCL2、HCL4、HCL5、P1、紫58、P2、J53、L50、Y1382、Y1281为中国农业大学农学与生物技术学院种子科学系近年选育的优良自交系。

表1 20个玉米自交系的编号及名称Tab.1 The number and name of 20 maize inbred lines

1.2 SSR分析

1.2.1 基因组DNA提取

采用改进的CTAB法提取叶片总DNA，用紫外可见分光光度计检测DNA的浓度，将DNA样品稀释至10 ng/μL备用。

1.2.2 PCR扩增

PCR扩增所需SSR引物由上海生工合成，溶解后置于-80℃贮存备用。

反应体系：每20μL体积中含1×EasyTaq Buffer，0.4 mmol/L dNTP Mix，SSR引 物(正 向 引 物 和 反 向 引 物)各0.25μmnol/L，1U EasyTaq DNA聚合酶，20 ng DNA模板，反应液上加盖一滴矿物油，于ABI 9700型PCR扩增仪上进行扩增。……