不同因素对苹果酸酶-1和异柠檬酸脱氢酶-1标准样品的影响分析*
2022-10-07光姣娜周佳琪岳秉飞
魏 杰 王 洪 光姣娜 周佳琪 付 瑞 岳秉飞
(中国食品药品检定研究院,北京 102629)
苹果酸脱氢酶(malic enzyme,ME)和异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydorgenase,IDH)是三羧酸循环及其补充反应中的关键酶,在生物体能量代谢、合成及抗氧化过程中发挥着重要作用[1-2]。同工酶家族中ME-1和IDH-1的研究,不仅在生物发酵、种质选育以及肿瘤诊疗中发挥着重要作用,也是实验动物遗传质量控制国家标准中近交系小鼠的重要评价项目[3-6]。
我国检测机构众多,一方面有助于加强对产品的质量控制,另一方面由于各机构检测能力参差不齐。不同机构得到检测数据的有效性和科学性也为监管和公信带来了新的问题。因此,制备标准样品对检测机构进行能力评定就显得尤为重要。
本研究制备小鼠肾匀浆来源的ME-1和IDH-1标准样品,并通过品系差异、冻融、时间温度、运输、浓度等因素对标准样品的影响进行研究,从而为近交系小鼠遗传质量控制检测能力评定提供支持。
1 材料和方法
1.1 动物来源
BALB/c和C57BL/6小鼠各10只,8周龄雄性,购自中国食品药品检定研究院,实验动物生产许可证号SCXK(京)2017-0005;CBA小鼠10只,8周龄雌性,购自北京华阜康生物科技股份有限公司【SCXK(京)2019-0008】。本单位实验动物使用许可证号SYXK(京)2017-0013。本实验经过中国食品药品检定研究院实验动物福利审查,伦理号:中检动(福)第2019(A)001号。
1.2 仪器
Sartorius 酸度计(赛多利斯公司),ML4002 电子天平(梅特勒托利多公司), Bead Ruptor 24 Eilte 样品均质仪(OMNI公司), Thermo Multifuge X1R 离心机(赛默飞世尔公司), LABCONACO 冻干机(labconco公司), 海尔BCD冰箱(青岛海尔公司), Thermo恒温箱(赛默飞世尔公司), BioRad 3000Xi 电泳仪(伯乐公司)、 微量点样器(北京六一厂)。……
