丁家宝,高 鲲,张 倩

(秦皇岛市第一医院 1.胸外科；2.风湿免疫科,河北 秦皇岛066000)

非小细胞肺癌具有较高的恶性生物学特性，严重威胁着患者的生命健康[1]。目前临床上对于非小细胞肺癌的具体发病机制尚不完全明确，研究发现，非小细胞肺癌的发生与多种细胞因子表达相关[2]。既往研究证实，SCNN1B、YAP1、ABCG2均参与恶性肿瘤的发生发展[3-5]。本研究分析SCNN1B、YAP1、ABCG2在非小细胞肺癌组织中的表达，报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

2019年7月—2020年7月秦皇岛市第一医院收治的120例非小细胞肺癌患者，男70例，女50例，年龄40-67岁，平均年龄(50.83±10.15)岁，≥60岁30例，<60岁90例；肿瘤直径：≥3 cm 59例，<3 cm 61例；TNM分期：Ⅰ+Ⅱ期60例，Ⅲ+Ⅳ期60例；有淋巴结转移42例；分化程度：中低分化46例，高分化74例；病理类型：鳞癌61例，腺癌59例。另外收集通过手术切除的肺组织良性病变标本120例，其中包括炎性假瘤78例，肺结核31例，其他11例。患者及家属均知情同意本次研究，且经医院伦理委员会审核批准。

纳入标准：符合《中华医学会肺癌临床诊疗指南(2018版)》[6]中关于非小细胞肺癌的诊断标准，且经细胞学、病理学及影像学确诊，自愿参与本次研究，未经放化疗治疗。

排除标准：合并肝癌、胃癌等其他恶性肿瘤者；合并先天性免疫缺陷病者；合并糖尿病、高血压等严重内科疾病者；心、肾、肝等脏器功能障碍者；合并精神障碍、沟通障碍者。

1.2 样本采集

取所有患者手术切除的癌组织、良性病变组织，采用40 g/L多聚甲醛固定后行石蜡包埋、切片，作后续指标检测。

1.3 实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测SCNN1B、YAP1、ABCG2表达量

取所制备的癌组织、良性病变组织标本，提取组织RNA(Trizol法)，之后使用紫外分光光度仪、聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定RNA纯度，利用PCR试剂盒合成cDNA。逆转录：模板RNA 14 μl，Enzyme mix 2 μl，5×RT缓冲液4 μl，使用蒸馏水补至20 μl，之后在PCR检测仪上做42℃ 1 h、95℃ 5 min的处理后，将所合成的cDNA在-20℃下保存。反应体系：0.4 μl上下游引物，cDNA模板 8 μl，SYBRP Green mix 10μl，PCR Primer mix 2 μl。反应条件：95℃ 10 min；95℃ 10 s；60℃ 1 min；40个循环。以β-actin为内参，采用2-△△Ct方法计算表达量。……