吴勇辉，杨定霖

(1.南方医科大学第七附属医院药剂科，广东 佛山 528244；2.佛山市仁汇医药科技有限公司，广东 佛山 528000)

夏枯草为唇形科夏枯草属的果穗，多年生草本植物。中医认为其具有散结消肿、清热解毒、清火明目等功效，可治疗目赤肿痛、瘰 疬、瘿瘤、乳痈肿痛、乳癖等[1]。现代药理研究发现，夏枯草对乳腺增生、乳腺肿瘤等具有较好的疗效[2-3]。前期，采用细胞膜固相色谱法筛选出夏枯草中抗人乳腺癌细胞 MDA-MB-231的效应成分为迷迭香酸、芦丁等[4]。本研究拟以迷迭香酸、芦丁的总提取率作为考察指标，通过正交试验设计法优选夏枯草的最佳提取工艺，现报道如下。

1 材料与方法

1.1仪器与试剂 岛津LC-20A效液相色谱仪(包括 LC-20AT型四元泵系统，Prominence SIL-20A自动进样器，SPD-M20A型DVD检测器)购自日本SHIMADZU公司，电子天平(型号：JJ224BC型)购自常熟市双杰测试仪器厂，数控超声波清洗器(型号：0605T型)购自深圳市华策科技有限公司公司，芦丁对照品为成都埃法科技有限公司生产(批号：AZ21080201，规格：98%)，迷迭香酸对照品为成都埃法科技有限公司生产(批号：AF21020951，规格：98%)，夏枯草(产地：江苏)购自康美药业股份有限公司，乙腈(批号：20201124，规格：色谱纯)、甲醇(批号：20200806，规格：色谱纯)均购自霍尼韦尔贸易(上海)有限公司，磷酸(批号：20210403，规格：分析纯)购自天津市富宇精细化工有限公司，双蒸水为自制。

1.2方法

1.2.1色谱条件 色谱柱：Cosmosil C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相：乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)，梯度洗脱(0～10 min，25%～40%A；10～30 min，40%～48%A；30～35 min，48%～60%A；35～40 min，60%～60%A)；检测波长：340 nm；流速：1.0 mL/mL；柱温：室温；进样量：20 μL。

1.2.2溶液的配制

1.2.2.1混合对照品溶液的配制 精密称取芦丁对照品2 mg、迷迭香酸对照品10 mg，加甲醇超声溶解，配制成每1毫升含20 μg芦丁、100 μg迷迭香酸的混合对照品溶液。……