薛运波│文

分子标记技术以其共显性、多态性和准确性等优点已广泛应用于动植物的遗传学研究，常用的分子标记包括以分子杂交为基础的RFLP标记和ISH标记，以简单重复序列为基础的SSR标记、ISSR标记，以PCR为基础的RAPD标记、AFLP标记和InDel标记，以单核苷酸多态性为基础的SNP标记等。这里简单介绍几种常用的分子标记技术：

1.RFLP标记

限制性片段长度多态性（RFLP）是发展最早的分子标记技术。RFLP技术的原理是检测DNA在限制性内切酶酶切后形成的特定DNA片段的大小，凡是可以引起酶切位点变异的突变如点突变和一段DNA的重新组织等均可导致RFLP的产生。此技术及其从中发展起来的一些变型均包括以下基本步骤：DNA的提取、限制性内切酶酶切、凝胶电泳分离、DNA片段转移、特定DNA片段显影和结果分析。

2.AFLP标记

扩增片段长度多态性（AFLP）标记技术较其他分子标记有着明显的优越性，应用广泛。其原理是基因组DNA经限制性内切酶充分酶切后，将特定的人工双链接头连在这些片段的两端，形成带接头的特异片段，根据接头序列和酶切位点设计引物，对特异性模板片段进行选择性扩增，扩增产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，最后根据凝胶上DNA指纹的特点进行分析。AFLP标记技术的出现，是DNA指纹技术的重大突破，具有多重优点：（1）AFLP分析所需DNA用量少；（2）AFLP技术能够获得更高的信息量；（3）试验重复性好，可信度高；（4）样品适用性广，基因组覆盖面大；（5）AFLP标记表现为典型的孟德尔方式遗传；（6）AFLP可作为物理图谱和遗传图谱的联系桥梁；……