FFPE组织HPV检测中PCR-反向点杂交技术的应用:两种核酸提取方法的比较
2022-08-24童玲玲刘千琪
检验医学与临床 2022年16期
王 诚,童玲玲,刘千琪,况 薇
四川大学华西第二医院病理科/出生缺陷与相关妇儿疾病教育部重点实验室,四川成都 610011
在全球范围内,宫颈癌是女性癌症死亡的第3大原因,每年新发病例约52.8万,死亡病例约26.6万[1]。约95%的宫颈癌是由人乳头瘤病毒(HPV)持续感染引起的,尤其是高危型HPV(HR-HPV)16和18两种亚型,是肿瘤转化发生的主要激活因素[2-3]。目前,宫颈脱落细胞HPV检测是宫颈癌筛查及后续疫苗接种研究的主要手段[4]。然而,行宫颈脱落细胞HPV检测的大部分感染人群是一过性感染[5]。采用组织标本进行检测对明确HPV感染亚型与肿瘤病变的关系尤为重要。福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织是使用最广泛的可用于临床回顾性研究的标本资料,近年来,FFPE组织用于HPV检测引起研究者的广泛关注[6]。福尔马林固定及石蜡处理会引起DNA片段化、DNA与蛋白质相互交联,从而影响标本DNA的提取产量和扩增效率,因此对于FFPE组织的DNA提取及HPV检测方法尚存在争议。本研究通过对比粗提法和纯化法两种核酸提取方法获得的DNA质量,分析PCR-反向点杂交法(PCR-RDB)用于HPV检测所得结果的有效性,根据经济效益及实验室条件选择不同的核酸提取方法,为临床提供有效的HPV检测结果。
1 资料与方法
1.1一般资料 收集2019年9月至2020年10月四川大学华西第二医院病理科存档的宫颈癌标本(FFPE组织)25例。所有标本病理诊断均为浸润性宫颈癌,标本来源患者的中位年龄为48.7岁。其中宫颈鳞癌12例,腺癌/黏液腺癌6例,腺鳞癌6例,小细胞神经内分泌癌1例。……
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