姜阳阳，成志强，游淑源

淋巴结活检的主要作用是对恶性肿瘤淋巴转移进行分级，明确肿瘤转移的具体范围，减少不必要的手术及术后并发症[1]。术中冷冻切片能在较短时间内获得淋巴结的病理诊断结果，对手术治疗方式和手术范围具有较高的指导作用，因此越来越受到临床医师的青睐。淋巴结组织由于其细胞丰富，质地较脆，外围常有脂肪包绕，在日常冷冻切片工作中较难获取高质量切片。固定是影响冷冻切片质量的主要因素之一[2]，组织固定欠佳直接导致染色质量差，严重影响诊断的准确性。本科室采用不同固定液对淋巴结冷冻切片进行HE染色，取得良好的效果，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料收集2020年6～8月我院手术室送检新鲜淋巴结标本，淋巴结直径均大于0.5 cm，合计30枚，均符合快速病理标本送检要求。

1.2 试剂及仪器试剂：甲醇，冰醋酸，Harris苏木精染色液，伊红(醇溶性)，樱花OCT包埋剂，无水乙醇，二甲苯，1% 碳酸锂水溶液，中性树胶等。A液 ∶甲醇；B液：冰醋酸-甲醇液(冰醋酸 ∶甲醇=5 ∶95)；C液：冰醋酸-95%乙醇液(冰醋酸 ∶95%乙醇=5 ∶95)。仪器：恒温冷冻切片机(Leica CM1950)，生物显微镜(OLYPMUS BX40)。

1.3 方法送检的新鲜淋巴结组织，规范取材后行冷冻切片。实验前将A、B、C液放置在冷冻切片机内，预冷至机箱温度(-20 ℃)。常规冷冻切片(5 μm厚)，每例淋巴结连续做 9张切片，分别浸泡于3种不同固定液中，固定时间分别为 15、30、60 s。待固定完成后，流水冲洗，收集所有切片置于染色架中，流水冲洗20 s后染色。染色步骤：苏木精染色液60 s，流水冲洗10 s，1%碳酸锂水溶液返蓝5 s，流水冲洗10 s，伊红溶液10 s，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。……