朱 清，唐明洋，黄园莉，张光辉，赵 艳

子宫内膜癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤，其主要发病原因可能与长期的雌激素刺激有关[1-2]，而与雌激素关系紧密的白血病相关蛋白LRP16是从健康成人外周血淋巴细胞中克隆的基因，该基因在人类多种肿瘤细胞中高表达，且与雌二醇的调控有关[3-4]。短发夹RNA(short hairpin RNA, shRNA)是可以克隆到表达载体并表达短的干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)的DNA分子，可根据靶向基因LRP16设计shRNA序列，并将其克隆到特定载体上[5]。本文旨在探讨LRP16在子宫内膜癌中的表达及其与临床病理特征的关系；通过RNA干扰下调人子宫内膜癌细胞株(Ishikawa, ISK)中LRP16基因的表达，分析其对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。

1 材料与方法

1.1 临床资料收集2015年1月～2016年12月蚌埠医学院第一附属医院病理科存档的子宫内膜癌组织160例，术后经常规病理组织检查证实均为雌激素依赖型(即子宫内膜样癌)；另选取60例正常子宫内膜组织(为子宫内膜活检或其他良性疾病中获取)作对照。本实验经蚌埠医学院第一附属医院伦理委员会批准，患者均知情同意。

1.2 细胞株及主要试剂人子宫内膜癌细胞株ISK、逆转录试剂盒、PCR试剂盒，购自上海吉玛公司。LRP16-shRNA表达载体(Santa Cruz Biotechnology, Inc.sc-149046-SH)；DMEM(高)培养液、胎牛血清(Hyclone)、PBS平衡液；LRP16抗体(Abcam公司、ab122688)；β-actin抗体(Abcam公司、ab8229)。Lipofectamine 2000、Trizol试剂，购自Invitrogen公司。CCK-8试剂、Transwell小室，购自上海碧云天公司。结合基质胶Matrigel购自BD公司。

1.3 方法

1.3.1免疫组化 标本经10%中性福尔马林固定，连续4 μm厚切片，脱蜡，免疫组化采用EliVision染色。切片在柠檬酸盐溶液中121 ℃ 3 min进行抗原修复，自然冷却后在3%H2O2溶……