张会芳，宋婷婷，安 杰，杨 月，韩玉贞

肿瘤微环境(tumor microenvironment, TME)由肿瘤细胞和间质细胞及基质等构成，在肿瘤的浸润和转移中发挥重要作用。肿瘤细胞激活形成的癌相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts, CAF)是乳腺癌组织中的主要间质细胞，可分泌多种细胞因子促进乳腺癌的浸润和转移。许多研究表明，乳腺癌细胞中TGF-β1和p53的表达与乳腺癌预后有相关性[1-2]。目前，两者在乳腺癌间质中的表达研究较少，且有关TGF-β1和p53在乳腺原发癌和淋巴结转移癌间质中的相关性国内外尚未见报道。因此，本文着重探讨乳腺原发癌和淋巴结转移癌间质中TGF-β1和p53的表达及预后价值，以提高临床与病理医师的认识水平。

1 材料与方法

1.1 材料收集2011年1月～2016年12月滨州医学院附属医院病理科有淋巴结转移的非特殊型浸润性乳腺癌160例，其有完整的随访资料，包括患者年龄、肿块直径、组织学分级、转移淋巴结个数、ER、PR、HER-2、Ki-67的表达。患者均为女性，术前均未接受新辅助治疗。随访截至2020年6月或患者死亡，中位随访时间为58个月。

1.2 方法采用免疫组化EnVision法染色。TGF-β1抗体购于博奥森公司，p53抗体和二抗购于北京中杉金桥公司。标本均经10%中性福尔马林固定，石蜡包埋，4 μm厚连续切片，将切片置于64 ℃烤箱中烘烤1 h，脱蜡至水，高温高压法修复抗原后晾凉，3%H2O2去除内源性过氧化物酶，加入一抗TGF-β1(稀释比1 ∶200)及p53(稀释比1 ∶200)抗体4 ℃过夜，放置37 ℃恒温箱中复温30 min，PBS水洗后加二抗37 ℃孵育30 min，DAB显色，苏木精复染，1%盐酸乙醇分化，脱水透明，中性树胶封固。以PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照，以已知阳性切片作为阳性对照。……