王玉萍，雷 琪，付萍萍，马 畅

(陕西省农业检验检测中心，陕西 西安 710003)

1 前言

胆钙化醇灭鼠剂是一种安全性好、可以防治对抗凝血灭鼠剂产生抗药性的新型灭鼠剂，在美国、新西兰等发达国家得到广泛应用，我国也于2012年获得登记[1]。胆钙化醇又名维生素D3，是一种对人类及高等动物生长、发育、繁殖、维持生命和保证健康不可缺少的脂溶性维生素，其主要作用是调节钙、磷代谢，促进肠内钙、磷的吸收和骨质钙化，维持血钙和血磷的平衡，在食品、饲料、医药等领域广泛应用多年[2]。

2 试验部分

2.1 试剂和溶液 甲醇：色谱纯；水：新蒸二次蒸馏水或超纯水；胆钙化醇标样：已知质量分数，ω≥99.9%；胆钙化醇0.075%饵粒。

2.2 仪器 高效液相色谱仪：Agilent 1 260，具有二极管阵列检测器和自动进样器；Agilent色谱工作站；色谱柱：150mm×4.6mm(i.d.)不锈钢柱，内装ZORBAX SB-C18、5μm填充物。

2.3 液相色谱操作条件 流动相：Ψ(甲醇 ：水)=95 ：5，经滤膜过滤，并进行脱气；流量：1.0mL/min；柱温：30℃；检测波长：264nm；进样体积：5μL；保留时间：胆钙化醇约12.6min。典型的胆钙化醇的标样、样品色谱图(图1、图2)。

图1 胆钙化醇标准品液相色谱图

图2 胆钙化醇0.075%饵粒试样液相色谱图

2.4 测定步骤

2.4.1 标样溶液的配制 称取胆钙化醇标样0.05g(精确至0.000 1g)于100mL容量瓶中，用70mL甲醇超声溶解，冷却至室温，用甲醇稀释至刻度并摇匀，用移液管移取上述溶液2.0mL于50mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀。

2.4.2 试样溶液的配制 称取研磨后的3.0g(精确至0.000 1g)胆钙化醇饵粒样品于具塞锥形瓶中，加入70mL甲醇，55℃超声35min，冷却至室温，转移至100mL容量瓶中，多次润洗定容至刻度并摇匀，静置备用。……