武艳霜，王岩金，杨馥吉，严永敏,2

(1. 江苏大学医学院, 江苏 镇江 212013； 2. 江苏大学附属镇江三院肝病科, 江苏 镇江 212005)

非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver diseases，NAFLD)是一类影响全球约1/4成年人口的慢性肝病，造成了严重的健康负担[1]。肝细胞的脂肪变性是NAFLD的重要组织学特征[2-3]。外泌体是细胞间通讯的重要介质，其中包含各种生物分子，如核酸、脂质和蛋白质。外泌体可以将这些生物分子传递到细胞中，参与分化发育、能量代谢、免疫调节等各种生物学过程。越来越多的证据表明，外泌体参与NAFLD的发展[4-7]。如Cheng等[8]研究发现人脐带间充质干细胞外泌体miR-627-5p 通过抑制脂肪质量与肥胖相关基因(fat mass and obesity-associated gene，FTO)表达改善NAFLD。骨髓间充质干细胞及其外泌体对miR-96-5p 的上调可以缓解NAFLD[9]。但是肝细胞来源的外泌体(exosomes derived from hepatocytes，LO2-Ex)在NAFLD中的作用尚不清楚。本研究旨在探讨LO2-Ex对高脂肪饮食诱导的NAFLD小鼠肝脏脂质沉积的抑制效果。从动物水平考察LO2-Ex对脂质的抑制作用，为NAFLD的治疗提供新思路。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与仪器

高脂饲料(常州鼠一鼠二生物科技有限公司)，人肝细胞系LO2细胞(中国科学院上海细胞生物学研究所)，RPMI 1640 培养基(美国Gibco公司)，胎牛血清(澳大利亚Bovogen公司)，青霉素-链霉素双抗(美国Invitrogen公司)，超滤离心管、HE染色试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司)，台式高速离心机(德国Eppendorf公司)，超速离心机(美国Beckman Coulter公司)，BCA 蛋白定量试剂盒(北京康为世纪生物科技有限公司)，兔抗人β-肌动蛋白一抗、兔抗人CD9一抗、兔抗人Calnexin一抗、兔抗人TSG101一抗(英国Abcam公司)，羊抗兔二抗(北京康为世纪生物科……