史卫军，林彦星，黄超华，曹琛福，曾少灵，吴 江，刘建利，陈 兵，阮周曦，花群义

（深圳海关动植物检验检疫技术中心，广东深圳 518045）

非洲马瘟（African horse sickness，AHS）是由非洲马瘟病毒（African horse sickness virus，AHSV）感染马属动物引起的一种急性或亚急性非接触性虫媒传染病[1]，拟蚊库蠓（Culicoides imicola）是其主要传播媒介[2]，动物发病后以发热、水肿、脏器出血为主要特征。所有马属动物均可感染AHSV，马最易感，骡和驴次之，易感动物感染后病死率可达95%[3]。该病主要分布在非洲撒哈拉沙漠以南地区，地中海周边国家、中东、欧洲等地偶有发生，近年来在亚洲个别国家也有流行，我国尚未有AHS 流行的报道[4]。世界动物卫生组织（WOAH）将其列为法定报告动物疫病，我国将其列为一类动物疫病和要重点防范的外来动物疫病。

AHSV 属于呼肠病毒科（Reoviridae）环状病毒属（Orbivirus genus）成员，已知有9 种血清型，不同血清型病毒毒力不同，各型之间具有交互免疫关系，如1 型和2 型，3 型和7 型，5 型与8 型，6型与9 型[5-6]。AHSV 基因组由10 个大小不等的双链RNA 片段构成，编码7 种结构蛋白（VP1—VP7）和4 种非结构蛋白（NS1—NS3、NS3A）。其中，VP7 蛋白在AHSV 各血清型中高度保守，是病毒血清群的特异性抗原[7]，因此编码VP7 蛋白的S7基因常被用于AHSV 检测[8]。

目前国内外学者已建立了多种AHSV 检测方法，如常规RT-PCR、实时荧光RT-PCR、RT-LAMP 等，但这些方法均耗时较长，且操作复杂。重组酶聚合酶扩增技术（RPA）是一种在恒温（37～42 ℃）条件下即可实现核酸扩增的新技术，反应程序简单，没有PCR 的高温变性、退火和延伸等步骤，而且反应时间不到PCR 的20%。实时荧光RPA 方法是将荧光探针技术与RPA 技术相结合，在20 min 内直接通过便携式等温扩增仪读取检测结果的新方法，在动物疫病现场快速诊断方面具有广阔的应用前景[9]。……