肖福龙，宫丽鸿

冠状动脉粥样硬化性心脏病是冠状动脉粥样硬化使管腔狭窄或阻塞，导致心肌缺血、缺氧而引起的心脏病，与冠状动脉功能性改变即冠状动脉痉挛统称为冠状动脉性心脏病(coronary heart disease，CHD)，简称冠心病。近年来，随着我国国民经济的迅速发展，人民生活方式和生活水平发生巨大变化，冠心病的患病率和死亡率也逐渐升高，已经成为我国重要的公共卫生问题。研究显示，搜风祛痰中药通过抑制细胞凋亡发挥稳定动脉粥样硬化不稳定斑块的作用，但搜风祛痰中药对同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)损伤的大鼠心肌微血管内皮细胞(cardiac microvascular endothelial cells，CMECs)的作用尚未明确[1-4]。本研究探讨Hcy对CMECs线粒体凋亡的影响及搜风祛痰中药的干预作用，为搜风祛痰中药的临床应用提供科学的理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验细胞 原代大鼠CMECs，购自北京北纳创联生物技术研究院公司。

1.1.2 实验动物 8周龄无特定病原体(SPF)级雄性Sprague-Dawley大鼠40只，体质量(240±20)g，购自辽宁长生生物技术股份有限公司，实验动物生产许可证号：SYXK(辽)2013-0009。所用动物实验均符合中国有关实验动物使用和操作的伦理规则，并获得辽宁中医药大学动物伦理委员会的批准(编号：21000092018010)。

1.1.3 实验药物 搜风祛痰中药：全蝎5 g，蜈蚣1条，地龙20 g，陈皮15 g，半夏15 g，白术15 g，水蛭15 g，加工制成含生药2 g/mL的中药浓缩液备用，由辽宁中医药大学附属医院中药局提供。

1.1.4 实验试剂与仪器 Hcy(Sigma，69453)；CD31抗体(Servicebio，GB11063-1)；Bax抗体(Cell Signaling Technology，#2772)；Bcl-2抗体(CUSABIO，CSB-RA002611A0HU)；Cyto-C抗体(Servicebio，GB11080)；Caspase-9抗体(Cell Signaling Technology，#9508)；Caspase-3抗体(Cell Signaling Technology，#9662)；β-actin抗体(普利莱，C1845)；辣根酶标记的山羊抗兔IgG(北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司，SH-0031)；……