韦润生，邬剑楠

(湖北省妇幼保健院 急诊科，湖北 武汉 430000)

1 材料与方法

1.1 主要实验材料

1.2 建模、分组和处理方法

将小鼠饲养在温度为20～25 ℃、相对湿度为55%～65%的环境中，12 h/12 h敏感交替，自由饮食和饮水。将45只小鼠分为对照组、UC组、UC+金荞麦片组(每组15只)。根据文献[8]，在适应性喂养1周后将3%的DSS加入到饮用水中连续1周来诱导UC急性反应。UC+金荞麦片组小鼠使用金荞麦片水溶液(32 mg·ml-1)灌胃，剂量为0.02 ml·g-1[9]，每日1次，连续7 d。

1.3 检测指标和方法

1.3.1 疾病活动指数 观察各组小鼠体质量变化、粪便黏稠度和粪便隐血，每项总分4分，疾病活动指数为3项得分之和，得分越高提示UC越严重。

1.3.2 结肠长度 小鼠颈椎脱臼后安乐死，取出整段结肠测量结肠长度。

1.3.3 HE染色 结肠组织用10%甲醛溶液固定48 h，流水冲洗。不同浓度的乙醇脱水，然后将组织浸入蜡中，并切成 5 μm 的厚度。将载玻片置于 65 ℃ 恒温烘箱中30 min。脱蜡水化后染色。细胞核用苏木精染色5 min，细胞质用伊红染色1～2 min。染色切片用纯酒精脱水并在显微镜下观察拍照。

1.3.5 肠黏膜通透性的测量 通过尿L和M比值评估肠黏膜通透性。将300 ml的L和 200 mg的M溶解在20 ml的蒸馏水中,在 12 h的禁食期后灌胃，剂量为1 ml。喂食后1 h，在乙醚麻醉下从海绵窦中取血，使用蜜二糖作为内标通过高效液相色谱测定L和M的浓度,检测L和M的浓度,计算L/M。

1.4 统计学处理

2 结 果

2.1 金荞麦对UC小鼠疾病活动指数和结肠长度的影响

UC组疾病活动指数显著高于对照组，结肠长度显著短于对照组(P<0.05)。UC+金荞麦片组疾病活动指数显著低于UC组，结肠长度显著长于UC组(P<0.05)。见图1、表1。

表1 金荞麦对UC小鼠疾病活动指数和结肠长度的影响

图1 金荞麦对UC小鼠疾结肠长度的影响

2.2 金荞麦对UC小鼠结肠黏膜损伤的影响

对照组小鼠结肠黏膜屏障完整；UC组小鼠结肠黏膜上皮细胞表现出明显的水肿，结肠黏膜完整性受损，出现炎性损伤。与UC组比较，UC+金荞麦片组小鼠结肠黏膜上皮细胞水肿显著减轻，结肠黏膜屏障完整性得到修复。见图2。

图2 HE染色检测金荞麦对UC小鼠结肠黏膜损伤的影响

2.3 金荞麦对UC小鼠结肠炎症因子水平的影响

表2 金荞麦对UC小鼠结肠炎症因子水平的影响

2.4 金荞麦对UC小鼠肠黏膜通透性的影响

UC组肠黏膜L/M为3.25±0.38，显著高于对照组的0.64±0.07(P<0.05)；而UC+金荞麦片组肠黏膜L/M为1.79±0.24，显著低于UC组的3.25±0.38(P<0.05)。

2.5 金荞麦对UC小鼠肠黏膜屏障的影响

表3 金荞麦对UC小鼠肠黏膜紧密连接蛋白Z 1和Occludin表达水平的影响

图3 Western blotting检测金荞麦对UC小鼠结肠黏膜中紧密连接蛋白Z 1和Occludin表达水平的影响

2.6 金荞麦对UC小鼠结肠组织I 6和STAT3 mRNA表达水平的影响

UC组结肠组织IL- 6和STAT3 mRNA水平显著高于对照组(P<0.05)，UC+金荞麦片组结肠组织IL- 6和STAT3 mRNA水平显著低于UC组(P<0.05),见表4。

表4 荞麦对UC小鼠结肠组织中I 6和STAT3 mRNA表达水平的影响

2.7 金荞麦对UC小鼠结肠组织I 6和STAT3 蛋白表达水平的影响

UC组结肠组织IL- 6和STAT3蛋白水平显著高于对照组(P<0.05)，UC+金荞麦片组结肠组织IL- 6和STAT3蛋白水平显著低于UC组(P<0.05)，见图4和表5。

表5 金荞麦对UC小鼠结肠组织I 6和STAT3 蛋白表达水平的影响

图4 Western blotting检测金荞麦对UC小鼠结肠组织I 6和STAT3 蛋白表达水平的影响

3 讨 论

目前UC的病因和发病机制仍不确定，遗传易感性、黏膜免疫系统失调、肠道微生物群失调和饮食习惯等因素是UC发展的重要因素[10]。目前UC的治疗主要采取服用氨基水杨酸、皮质类固醇、免疫抑制剂和生物制剂，重度难治UC需要手术治疗[11]。由于药物无效、药物依赖、不良反应，仍有一部分患者长期遭受UC困扰[12]。因此，为UC寻找新的治疗方法和药物极为重要。