林智强，毛海燕，阮开安

(玉林市第一人民医院 耳鼻咽喉科，广西 玉林 537000)

1 对象与方法

1.1 研究对象

2018年7月至2020年7月，本研究共招募104例初诊NPC患者，设为NPC组。所有的病理组织标本由2名经验丰富的病理学专家根据世界卫生组织病理诊断标准进行回顾和重新分类。纳入标准：(1) 符合《中国鼻咽癌分期2017版(2008鼻咽癌分期修订专家共识)》标准[6]，且在本院接受常规放射治疗；(2) 临床和病理资料(性别、年龄、Karnofsky状态评分、TNM分期和病理类型)完整；(3) 在获取组织和血液样本前均无化疗或放疗史。排除标准：合并其他部位恶性肿瘤者；放疗禁忌证或未完成全程放疗者；合并其他严重基础性疾病者。另选取100例同期经组织活检确诊为慢性鼻窦炎鼻息肉的患者[男64例，女36例；年龄32～78岁，平均(53.96±12.06)岁]作为良性病变组。两组患者年龄、性别构成相匹配(P>0.05)。本研究获得本院伦理委员会的批准，所有患者都按照机构指南签署了书面知情同意书。

1.2 治疗方法

1.3 检测指标

1.3.1 样本获取 (1) 血浆样本：均于患者入组当天抽取3 ml外周静脉血，置于乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA)抗凝管中，4 ℃环境下使用离心机以1 600 r·min-1离心10 min，将血浆储存于-20 ℃冰箱内待测。(2) 组织样本：将NPC组患者的部分癌组织及良性病变组患者的鼻息肉组织经生理盐水清洗后，使用液氮速冻，然后置于-80 ℃冰箱中储存待测。剩余样本均使用10%福尔马林固定，经石蜡包埋后制成4 μm的连续切片，供病理检查或免疫组织化学分析使用。

1.4 随访结局的定义

在全程放疗结束后，至少完成12个月随访，根据实体瘤疗效评价标准(response evaluation criteria in solid tumors，RECIST)1.1[7]对患者放疗敏感性进行评价，将患者分为放疗敏感组和放疗抵抗组。放疗抵抗定义为完成放疗后3个月内仍有残余病变[原发肿瘤和(或)颈淋巴结不完全缓解]或放疗完成后12个月内鼻咽癌和(或)颈淋巴结局部复发。放疗敏感是指在完成放疗后，3个月内无残余肿瘤灶[达到完全缓解(completed response，CR)])或完成放疗后疾病复发时间>12个月。

1.5 统计学处理

2 结 果

2.1 两组患者组织和血浆EB mi BART 3p表达水平比较

2.2 NPC患者EB DNA与EB mi BART 3p表达水平相关性分析

图1 Pearson相关系数分析EBv- DNA阳性NPC患者EBv- DNA拷贝数与EBv- miR- BART8- 3p表达水平的关系Fig 1 Pearson analysis of the relationship between the copy number of EBv- DNA and the expression of EBv- miR- BART8- 3p in EBv- DNA positive NPC patients

2.3 NPC患者血浆和组织EBv- miR- BART8- 3p表达水平在临床病理特征中的差异

表1 NPC患者组织和血浆EBv- miR- BART8- 3p表达水平在临床病理特征中的差异 例Tab 1 Relationship between expressions of tissue and plasma EBv- miR- BART8- 3p and clinicopathological features in NPC patients cases

续表

2.4 NPC患者血浆和组织EBv- miR- BART8- 3p表达水平在放疗效果中的差异

表2 NPC患者血浆和组织EBv- miR- BART8- 3p表达水平在放疗效果中的差异Tab 2 Relationship between expressions of tissue and plasma EBv- miR- BART8- 3p and radiation resistance in NPC patients

2.5 多因素Logistic回归分析血浆和组织EBv- miR- BART8- 3p与放疗抵抗的关系

表3 多因素分析NPC患者血浆和组织EBv- miR- BART8- 3p与放疗抵抗的关系Tab 3 Multivariate analysis of the relationship between plasma and tissue EBv- miR- BART8- 3p and radiation resistance in NPC patients

2.6 血浆和组织EBv- miR- BART8- 3p水平对NPC患者发生放疗抵抗的预测价值

图2 ROC曲线分析EBv- miR- BART8- 3p对NPC患者发生放疗抵抗的预测价值Fig 2 ROC curve on the predictive value of EBv- miR- BART8- 3p on radiotherapy resistance in NPC patients

3 讨 论