符舒琦，涂蓉，刘梦婵，洪雅敏，李韩建，尤晓光

癌症已成为当前世界威胁人类健康和生命的严重疾病之一[1]。如何早期诊断并治疗肿瘤是分子影像学研究热点之一。磁性氧化铁纳米粒子(iron oxide nanoparticles，IONP)是一种多功能磁性纳米材料，当其粒径在5～100 nm时具有超顺磁性，可作为磁共振成像(MRI)、生物催化活性(纳米酶)以及药物递送等多功能的诊疗工具，IONP合成相对简单、生物相容性好，可以对其进行进一步的表面修饰，增加水溶性并偶连靶向分子，因此可用于肿瘤磁共振显像及治疗[2-3]。C60(fullerene，富勒烯)有着独特的物理化学性质，是近年来被广泛用作肿瘤光动力治疗(photodynamic therapy，PDT)的光敏剂[4-5]。GE11(氨基酸序列YHWYGYTPQNVI)是首个对表面生长因子受体(epithelial growth factor receptor，EGFR)具有高亲和力的人工合成小分子多肽[6]。EGFR受体高表达于上皮源性肿瘤细胞，与人类多种癌症的发生发展密切相关[7]。PDT是指通过特定波长的激光照射靶组织使其产生单线态氧、羟基自由基、过氧化氢等活性氧(reactive oxygen species，ROS)物质[8]。本研究化学合成C60-IONP-GE11靶向多功能MRI对比剂(图1)，观察其体外对乳腺癌细胞EGFR靶点靶向成像及PDT治疗作用，为后续体内实验奠定前期实验基础。

材料与方法

1.材料和设备

人乳腺癌细胞株MDA-MB-231来源于国家实验细胞资源共享平台；靶向小肽GE11(QKYHWYGYTPQNVIQK)和随机小肽(random peptide，RP)(TQRKGKTHRKPHKTKT)由上海吉尔多肽有限公司合成。相关试剂和试剂盒：FBS、磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline，PBS)、0.25%胰酶、Cy3标记山羊抗兔IgG(H+L)、增强型CCK-8试剂盒、ROS检测试剂盒(Beyotime Biotechnology)；DMEM高糖培养基、青霉素-链霉素-两性霉素B混合液(索莱宝)；Annexin-V-FITC/PI凋亡检测试剂盒(杭州联科生物)。设备采用激光扫描共聚焦显微镜(Olympus FV1000，日本)，3.0T MRI和膝关节线圈(Siemens，德国)，多功能酶标仪(SynergyHTX，美国)，532 nm激光器(Oxlasers，上海)。……