占日新，华铭，金燕

（杭州市第九人民医院，浙江 杭州 310000）

0 引言

胰岛素抵抗（insulin resistance,IR）是指各种原因使胰岛素促进葡萄糖摄取和利用的效率下降，常伴有高胰岛素血症，易导致代谢综合征和2型糖尿病。内皮细胞和血管平滑肌细胞也对胰岛素敏感，因为高密度的胰岛素受体也存在内皮细胞和血管平滑肌细胞中，胰岛素具有广泛的生物学效应，在心血管系统也表现其作用，如胰岛素的生理浓度可以调节血管张力和维持血管内皮的完整性。其作用机制是胰岛素通过IRS-1/RAS/MAPK/ET-1和IRS-1/PI3K/Akt/NO间平衡协调发挥作用[1]。但高血糖，高脂血症和高胰岛素血症等引起的病理状态可以打破两条通路间的平衡，出现IR和内皮功能失常现象，从而诱发心血管疾病，该病包括动脉粥样硬化、高血压和冠心病等[2]。有研究发现33mmol/L高糖可诱导血管内皮细胞IR，吡格列酮和罗格列酮激活PPARγ后能显著改善高糖诱导血管内皮细胞IR症状[3]，替米沙坦能够部分激动PPARγ作用[4]。Myojo M等[5]研究发现0.1μmol/L、1μmol/L或10μmol/L替米沙坦治疗人脐静脉内皮细胞后可显著提高了eNOS的磷酸化水平，以浓度依赖的方式增加。本实验从替米沙坦对高糖状态下血管内皮细胞胰岛素敏感性的影响展开研究。

1 材料

1.1 细胞株以及主要试剂

人脐静脉血管内皮细胞株（中国医学科学院），DMEM 培养基干粉（gibco）；替米沙坦（罗恩），NO、ET-1、IL-6及TNF-α试剂盒（南京建成生物工程研究所）。

1.2 仪器

超净工作台（苏州净化设备厂）；MD-200-3 型电子天平（上海第三分析仪器厂）；酶联免疫检测仪（BIO-RAD，美国）；超低温冰箱（Sanyo，日本）；Eppendorf 加样器（Eppendorf，德国）；……