王静静，于晓慧，克军宏，2，彭真奇，3，邢安琪，4，刘华雷

（1.中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛 266032；2.塔里木大学，新疆阿拉尔 843300；3.安徽农业大学，安徽合肥 230036；4.宁夏大学，宁夏银川 750021）

新城疫（Newcastle disease，ND）是由新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）强毒株感染引起的一种禽的急性、高度接触性传染病，是严重危害养禽业的重要疾病之一，给养禽业造成巨大经济损失。世界动物卫生组织（OIE）将其列为法定报告动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。NDV 具有遗传多样性，根据病毒F基因差异可分为I 和II 两大类，I 类NDV 只有1 个基因型，均为弱毒株；II 类NDV 至少包括21 种基因型，其中既有弱毒株也有强毒株[1]。目前我国流行的强毒株主要为基因VI型和VII型，且病毒具有明显的宿主特异性[2-3]。20 世纪80 年代后，基因VI型NDV 传至世界各地，并一直在鸽群中流行和传播[4-5]。国家新城疫参考实验室监测数据显示，近年来我国鸽群NDV 强毒阳性率呈上升趋势[6]，提示应对鸽群中基因VI型NDV 强毒株加以关注。

目前，我国ND 诊断主要依靠RT-PCR 结合测序。NDV 强毒鉴定可通过测定1 日龄雏鸡脑内接种致病指数（ICPI）或病毒F 蛋白裂解位点序列分析进行，通过病毒F 蛋白裂解位点碱性氨基酸数量判定病毒毒力。该方法检测周期较长，无法满足快速检测的需求。此外，多家实验室也建立了NDV强毒株荧光RT-PCR 检测方法[7-9]，用于NDV 强毒株的快速筛查，但这些方法均无法区分病毒基因型，所以目前仍无专门针对基因VI型NDV 的快速检测方法。为了满足基因VI型NDV 的检测需求，本研究针对NDVF基因设计特异性引物和探针，建立了一种特异性强、敏感性高、快速有效的基因VI型NDV 检测方法，为开展鸽群ND 的早期诊断提供了重要支撑。……